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质谱兼容的银染
关键字:银染    www.ebiotrade.com  时间:2005年10月26日14:51    来源:Invitrogen

SilverQuest™ Sliver Staining Kit――质谱兼容的银染

  独特配方的SilverQuest™ Sliver Staining Kit提供了更好的银染灵敏度,同时将蛋白的修饰降到最低,从而可以获得最好的质谱结果。SilverQuest™ Sliver Staining Kit不会修饰蛋白侧链和干扰胰酶消化,避免了传统银染中影响质谱的诸多因素。

最佳的银染灵敏度和最快的染色速度

SilverQuest™ Silver Staining Kit实验步骤专门设计,确保最快地得到结果的同时保证最好的银染灵敏度和清晰的背景。90分钟内就可以检测到0.3ng蛋白(图1)。

图1 使用SilverQuest™ Sliver Staining Kit得到亚纳克级灵敏度
下面列出的样品在NuPAGE® Novex 4-12% Bis-Tris凝胶上分离,然后使用SilverQuest™ Sliver Staining Kit染色。箭头表明0.3ng蛋白。
Lanes 1,7:5
Lanes 2,3,4,5,6:5
Lanes 8,9,10:1.2,0.6, and 0.3 ng non-reduced BSA, respectively

彩色试剂简化了染色

SilverQuest™ Silver Staining Kit包含了彩色溶液,简化了冗长费力的银染步骤。因为你能够清楚实验的进程,减少不必要的重复步骤或者遗漏步骤的可能性,确保成功的染色结果。

质谱兼容的染色试剂

SilverQuest™ Silver Staining Kit专门设计使银染和质谱分析兼容,你可以进行较好的胰酶消化并有效除去银离子的干扰,从而得到精确的结果(图23表1)。这是由于包含了含有一种独特的无戊二醛的增敏剂,以改进样品的质谱分析,为了进一步增加检测的灵敏度,试剂盒还提供脱色液,以除去凝胶中的银离子。(http://www.ebiotrade.com/)

图2 菠菜叶绿体抽提物的双向电泳分析,使用SilverQuest™ Sliver Staining Kit
对菠菜叶绿体的抽提物用ZOOM IEF Fractionator进行预分离,然后各组分分别用一定pH值范围的ZOOM胶条和NuPAGE™ Novex 4-12% Bis-Tris ZOOM凝胶进行双向电泳分离,凝胶染色采用SilverQuest™ Sliver Staining Kit

图3 菠菜叶绿体抽取物使用SilverQuest™ Silver Staining Kit染色和脱色后MALDI图谱
光合体系II的放氧复合体蛋白1 MALDI指纹

表1 使用SilverQuest™ Silver Staining Kit染色后的质谱结果
蛋白质 %覆盖度 Z-值
1 光合体系II的放氧复合体蛋白1(菠菜) 69 2.43
2 ATP合成酶CF1 β-链(菠菜) 62 2.43
3 二磷酸核酮糖羧化酶激酶(菠菜) 45 2.37

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