电泳是在电场作用下带电离子根据其迁移率不同进行分离的技术。该技术简单,但却是研究蛋白性质的一个非常有用的手段。蛋折的迁移率与其结构衙环境都有关系,大多数电泳都有固定介质如聚丙烯酰胺胶和琼脂糖胶中完成的,聚丙烯酰胺胶适合蛋白和小的核酸的分离,琼脂糖胶适合大到蛋白复合物的分离。
因为没有一种方法会得到全部的信息,所以根据不同的物理特性,已发展出多种电泳方法。最常用的几种聚丙烯酰胺凝胶电泳技术如下:
SDS-PAGE:
在分子筛的凝胶中根据蛋白质的分量进行分离。SDS变性剂与所有蛋白结合,破坏结构、使其变性,所带的负电荷与其大小成正比,因此蛋白的迁移率只与蛋白的分子有关,与电荷和形状无关。
Native PAGE:
在非变性的条件下分离蛋白质,对于任何一种分离介质,迁移率都与蛋白的大小、电荷和形状有关。
电泳分离后,可进下步分析蛋白的活性和结构。
IEF(等电聚焦):
在PH梯度胶中根据蛋白质的等电特点进行分离,在蛋白质等电点处,蛋白所带电荷为零。根据后续蛋白的应用,可使用变性或非变性的胶。等电聚焦电泳的分辨率非常高。(http://www.ebiotrade.com/)