核酸电泳操作步骤:
1. 溶胶:
a. 将称好的琼脂糖倒入台面上干净的未污染的三角瓶中,于微波炉中反复加热溶解;
(注意:加热过程要注意控制火力大小,不能让胶淤出来;且此步操作不需要戴手套,以免污染微波炉)
b. 将溶好的胶倒入台面上一专用三角瓶中,然后按比例加入EB;
(注意:移液器不可戴手套拿,以免被EB污染)
2. 倒胶:
a. 将梳子、挡板等于作胶托盘上放好,用台面上一专用吸管吸取少量溶好的胶将挡板和托盘封好;
b. 稍等片刻(待封胶的胶凝固后)倒入溶好的胶,摆好梳子,等待胶凝固;
3. 点样:
a. 待胶凝固后将整个托盘放入电泳槽,然后拔去挡板、梳子(保证胶始终在缓冲液中);
b. 将样品和上样缓冲液(loading buffer)按比例混匀后用移液器点样;
4. 跑胶:
检查正负级电线是否连接正确(注意核酸电泳的点样孔应位于电泳槽的负极端),然后打开电泳仪,调节所需电压(或电流)。
(注意:此步操作也不可戴手套操作,以免污染电泳仪)
核酸废物处理方法:
1. 所有核酸电泳中的废胶、废手套、废枪头等都应放在指定位置,严防乱扔;
2. 废胶在处理前一天加入0.5M酸性KMnO4, 在倾倒前几小时加入当量NaOH;
3. 用铁锨在垃圾堆旁挖一坑,将废胶、废手套枪头等到入坑中,加入废酒精等予以焚烧,然后掩埋。
以上资料由陈昕整理提供
补充:据说EB可在三十分钟穿过一次性手套,所以值得做分子的关注。
焚烧废弃凝胶时,避免站在附近。(http://www.ebiotrade.com/)