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- 重组酶
- 随酶提供10X Reaction Buffer
概述:T4噬菌体基因32编码蛋白是一种单链DNA (ssDNA)结合蛋白,为T4细菌噬菌体DNA复制和修复所需(1)。它协调性地结合并稳定瞬时形成的ssDNA区域,在T4噬菌体DNA复制过程中起着重要的结构性作用(2)。该蛋白也被广泛地用于稳定和标记ssDNA区域,以便用电子显微镜观察细胞内DNA的结构(3)。最近的研究表明,它还能够改善RT-PCR反应中反转录的产量和效率,以及在从含腐殖酸土壤样品中进行PCR时,增加PCR产物的产量(4-7)。
来源:源自重组E. coli菌株,含有高表达T4噬菌体基因32编码蛋白的质粒。
应用:
- 稳定和标记ssDNA结构 (3)
- 增加PCR土壤样品时,目的片段的产量和特异性 (4)
- 增加RT-PCR过程中,反转录的产量和延伸能力(5-7)
随酶提供试剂:NEBuffer 4
热失活条件:65°C 20分钟。
分子量:理论分子量:33,485 道尔顿。
反应条件:1X NEBuffer 4,37°C温育。
1X NEBuffer 4: 20 mM Tris-acetate 50 mM potassium acetate 10 mM magnesium acetate 1 mM dithiothreitol pH 7.9 @ 25°C
单位定义:用纯化后蛋白质的OD280值换算其质量,作为销售剂量单位(1 mg/ml纯化蛋白的 A280 = 0.516, 光程为1 cm)
浓度:6 mg/ml
贮存条件:20 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 0.5 mM DTT, 1 mM EDTA和50%甘油。pH 8.0 @ 25°C
贮存温度:-20°C
质量控制 质保声明:无核酸内切酶和核酸外切酶的污染。每批产品均要检测该蛋白与ssDNA的结合活性,检测方法如下:用10 μg T4噬菌体基因32编码蛋白作为标准来检测改变2.5 μg ΦX174 病毒粒子DNA(单链)迁移率的能力。
每一批的质量控制数据均可以在随产品附带的说明书中查到。(http://www.ebiotrade.com/)
参考文献
- Alberts, B. and Frey, L. (1970) Nature, 227, 1313-1318.
- Bittner, M. et al. (1979) J. Biol. Chem., 254, 9565-9572.
- Delius, H. et al. (1972) J. Mol. Biol., 67, 341-350.
- Tebbe, C.C. and Vehjen, W. (1993) Appl. Environ. Microbiol. , 59, 2657-2665.
- Villalva, C. et al. (2001) Biotechniques, 31, 81-86.
- Baugh, L. R. et al. (2001) Nucl. Acids Res., 29, e29.
- Jeffries, D. and Farquharson, C. (2002) Anal. Biochem., 308, 192-194.
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