对应每一种限制性内切酶，New England Biolabs 均提供彩色盖子的10X NEBuffer，以保证100%活性。下面表格中列出每一种酶及其随酶提供的最适宜的NEBuffer。同时也列出每种酶在四种不同的NEBuffer中的大致活性，以帮助选择双酶切时最适宜的环境。除非特别指出，温育温度均为37°C。

注意事项：表格中所列出的酶活性是近似值，计算酶活性时所采用的底物与计算该酶的单位时所采用的底物相同。 缓冲液在使用前应充分解冻，并混合均匀。(http://www.ebiotrade.com/)

Enzyme	Supplied NEBuffer	% Activity in NEBuffers
		1	2	3	4
Aat II	4	0	50	50	100
Acc I	4	50	50	10	100
Acc65 I	3 + BSA	10	75	100	25
Aci I	3	25	50	100	50
Acl I	4 + BSA	10	10	0	100
Afe I *	SE-Y	25	50	25	100
Afl II	2 + BSA	50	100	25	100
Afl III	3 + BSA	25	75	100	50
Age I	1	100	50	10	75
Ahd I	4 + BSA	25	75	0	100
Ale I	4	10	20	10	100
Alu I	2	100	100	75	100
Alw I	4	50	100	10	100
AlwN I	4	50	100	50	100
Apa I @25°C	4 + BSA	25	50	0	100
ApaL I	4 + BSA	100	100	10	100
Apo I @50°C	3 + BSA	10	75	100	75
Asc I	4	0	10	10	100
Ase I	3	NR	75	dd100	NR
AsiS I	3 + BSA	50	100	100	50
Ava I	4	10	75	10	100
Ava II	4	50	75	10	100
Avr II	2	100	100	50	100
Bae I @25°C	2 + BSA + SAM	50	100	50	75
BamH I	Udd + BSA	75	100	50	75
Ban I	4	50	100	50	100
Ban II	4	100	10	50	100
Bbs I	2	100	100	25	75
Bbv I	2	100	100	25	75
BbvC I	4	50	100	10	100
BceA I	Udd + BSA	25	NR	NR	75
Bcg I	U + SAM	50	75	100	50
BciV I	4	100	25	10	100
Bcl I @50°C	3	50	100	dd100	75
Bfa I	4	75	50	10	100
BfrB I	4 + BSA	10	25	10	100
BfuA I @50°C	3	0	75	100	10
BfuC I	4 + BSA	100	50	25	100
Bgl I	3	50	75	100	50
Bgl II	3	10	75	100	10
Blp I	4	50	100	10	100
Bme1580 I	2	75	100	75	75
BmgB I	3 + BSA	0	25	100	10
Bmr I	2	75	100	75	100
Bmt I *	SE-W	25	100	10	50
Bpm I	3 + BSA	75	100	100	100
Bpu10 I*	SE-K	0	25	100	25
BpuE I @25°C	2 + SAM	75	100	10	75
Bsa I @50°C	3	75	75	100	100
BsaA I	3	75	75	100	75
BsaB I @60°C	2	75	100	100	100
BsaH I	4 + BSA	50	100	100	100
BsaJ I @60°C	2	100	100	100	100
BsaW I @60°C	2 + BSA	50	100	50	50
BsaX I	4	75	100	10	100
BseR I	2	100	100	75	100
BseY I	3	10	50	100	50
Bsg I	4 + SAM	50	75	50	100
BsiE I @60°C	2 + BSA	50	100	10	100
BsiHKA I @65°C	3 + BSA	50	100	100	100
BsiW I @55°C	3	100	100	100	25
Bsl I @55°C	3	10	50	100	75
Bsm I @65°C	2	75	100	75	75
BsmA I @55°C	3	50	100	100	50
BsmB I @55°C	3	75	100	100	100
BsmF I @65°C	4 + BSA	25	50	50	100
BsoB I @65°C	2	10	100	100	50
Bsp1286 I	4 + BSA	25	25	25	100
BspCN I @25°C	1 + BSA + SAM	100	75	10	75
BspD I	4	25	75	50	100
BspE I	3	0	10	100	0
BspH I	4	10	100	50	100
BspM I	3	NR	NR	100	NR
Bsr I @65°C	3	0	50	100	10
BsrB I	2	50	100	100	100
BsrD I @60°C	2 + BSA	50	100	50	75
BsrF I	U	25	100	75	75
BsrG I	2 + BSA	25	100	10	100
BssH II @50°C	3	100	100	dd100	100
BssK I @60°C	3 + BSA	0	50	100	50
BssS I	3	0	50	dd100	10
BstAP I * @60°C	SE-W	25	25	100	25
BstB I @65°C	4	75	50	25	100
BstE II @60°C	3	50	75	100	75
BstF5 I * @65°C	SE-Y	75	50	25	100
BstN I @60°C	2 + BSA	10	100	100	75
BstU I @60°C	2	100	100	50	100
BstX I @55°C	3	25	100	100	50
BstY I @60°C	2	50	100	75	100
BstZ17 I	3	NR	NR	100	NR
Bsu36 I	3 + BSA	0	25	100	0
Btg I	3 + BSA	25	50	100	100
Bts II	4 + BSA	100	50	50	100
Cac8 I	3	50	75	100	75
Cla I	4 + BSA	10	50	50	100

NEB限制酶在各种NEBuffer 中的活性（D-Z）