快速制胶电泳,免染色脱色神器 多款仪器适配PCR管和96孔板 ECL和转印膜超级优惠包

开学大促(一) :快速制胶电泳,免染色脱色神器

TGX Stain-Free FastCast 快速免染丙烯酰胺预混液
层析电泳和Western blot的好帮手!


浓度已经配好(7.5%,10%,12%)制胶极其简单
•  将预混液1:1 混合后加入TEMED/APS即可灌胶
•  不需要计算多个组分体积,不需要添加制胶Tris buffer和SDS
•  不需要加水或者醇压平分离胶,不用等分离胶凝聚可立即加入浓缩胶

电泳只需20 min, 转印最快3 min
•  特殊制胶预混液配方耐受200 - 300V电泳
•  配合Turbo快速半干转印仪,最快3分钟即可完成转印

无需染色、脱色,即可成像看到蛋白分离条带

胶中含有独特的三卤化合物可与蛋白色氨酸结合,在UV的激发下这个小化合物(58道尔顿)可发出荧光信号((Yadav et al. 2014)使得蛋白条带可见。因此,不同于考马斯亮蓝或其它染料费时、有刺鼻气味的染色和脱色过程,Stain-free免染技术使蛋白条带立即可见。 

并且,它的灵敏度和动态检测范围可媲美考马斯亮蓝染色(见图1),类似结论在多篇文章中均有报道(Hammond et al. 2013, McDonald et al. 2008, McDonald 2009, Taylor et al. 2013),而且环保,无毒性。


图1. stain-free免染成像与Coomassie染色比较。使用TGX Stain-Free™ 预混液灌好的胶,加入蛋白标准品和梯度稀释的样品,样品为4种蛋白的混合物,这4种蛋白分子量及所含色氨酸含量分别为phosphorylase B (PB, 1.4% Trp, 97 kD), glutamic dehydrogenase (GD, 0.8% Trp, 56 kD), carbonic anhydrase (CA, 2.3% Trp, 31 kD), lysozyme (Lys, 3.4% Trp, 14 kD)。凝胶在300 V下电泳20 min,进行免染成像(A), 然后把这块胶进行Coomassie染色脱色后成像(B)。

来自层析用户的反馈
Dr. Olivier Dalmas, 是来自NGM Biopharmaceuticals制药公司的科学家,他的工作中要花费大量时间做膜蛋白的表达和纯化,而膜蛋白表达并不容易, 因此他在做层析和SDS-PAGE的实验中希望采用好的快速的技术来提高工作效率,当被问道stain-free技术如何帮助他的研究,他说:“What I like about the stain-free system is the efficiency. It’s way faster than any other staining [method],” “I think it is a no-brainer for scientists like me to use a system like this, and it really cuts corners where you can, without compromising the quality of the data.” 

1610181 TGX Stain-Free FastCast Acrylamide Kit 7.5%, 1mm约65块胶
1610183 TGX Stain-Free FastCast Acrylamide Kit 10%, 1mm约65块胶
1610185 TGX Stain-Free FastCast Acrylamide Kit 12%, 1mm约65块胶

关于Stain-Free™ 技术的文献和报道:
1.BCC Research, “Technology advancements in protein therapeutics spurring market growth,” Press Release (Wellesley, May 25, 2016).
2.Garfin DE (1990). One-dimensional gel electrophoresis. Methods Enzymol 182, 425–441.
3.Hammond M et al. (2013). A method for greater reliability in western blot loading controls: stain-free total protein quantitation. bio-rad.com/webroot/web/pdf/lsr/literature/Bulletin_6360.pdf, accessed June 6, 2017.
4.Kaspar AA and Reichert JM (2013). Future directions for peptide therapeutics development. Drug Discov Today 18, 807–817.
5.Leader B et al. (2008). Protein therapeutics: a summary and pharmacological classification. Nat Rev Drug Discov 7, 21–39.
6.McDonald K et al. (2008). In-gel protein quantitation using the Criterion Stain Free™ Gel Imaging System. bio-rad.com/webroot/web/pdf/lsr/literature/Bulletin_5782B.pdf, accessed June 6, 2017.
7.McDonald K (2009). Overcoming the Coomassie blues. bio-rad.com/webroot/web/pdf/lsr/literature/Bulletin_5939.pdf, accessed June 6, 2017.
8.Raynal B et al. (2014). Quality assessment and optimization of purified protein samples: why and how? Microb Cell Fact 13, 180.
9.Taylor SC et al. (2013). A defined methodology for reliable quantification of western blot data. Mol Biotechnol 55, 217–226.
10.Yadav G and Liu N (2014). Trends in protein separation and analysis – the advance of stain-free technology. bioradiations.com/trends-in-protein-separation-and-analysis-the-advance-of-stain-free-technology, accessed June 6, 2017.
11.Yang X et al. (2010). Comparison of Criterion™ TGX Stain-Free™ Precast Gel System and standard Coomassie staining procedures for running and imaging protein gels. bio-rad.com/webroot/web/pdf/lsr/literature/Bulletin_6008.pdf, accessed June 6, 2017.


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开学大促(二) :多款仪器适配PCR管和96孔板

一般塑料水杯和乐扣塑料水杯有什么不同吗?
估计很多人会选择使用乐扣水杯,为什么?

Plastics are different !
Bio-Rad PCR塑料耗材采用纯净聚丙烯铸成薄壁反应孔,硬质耐热聚合体铸成Hard-Shell® 专利1 抗变形裙边,加之精湛的制造工艺使得传热迅速、孔间温度和荧光的均一性、荧光强度极其出色。

•  在纯净度10,000级或100,000级洁净车间生产
•  不含DNase,RNase,人类基因组DNA污染
•  抗变形收缩的特性确保了传热不受影响
•  凸起的反应孔边缘使得密封更紧密,减少体系蒸发
•  白色管采集到的荧光是透明管近3倍


精确的尺寸设计,孔板高度和其它尺寸均针对不同仪器优化

为得到出色的实验结果并维护仪器正常运行,建议选择匹配的耗材:


01为透明管,51或05/55/65结尾为白色管,白色管减少光散射荧光信号更强。
以上耗材还可适用其它型号的PCR和荧光定量PCR仪器,兼容性可查询Bio-Rad官网或咨询销售。

1.Hard-Shell plates are covered by one or more of the following U.S. patents or their foreign counterparts owned by Eppendorf AG:U.S. Patent Numbers 7,347,977;6,340,589; and 6,528,302.

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开学大促(三) :ECL和转印膜超级优惠包

开学大促优惠包,同时购买超敏ECL显色底物Clarity和PVDF转印膜,除了大大省钱,还会节省曝光时间、优化实验的时间,两个字“省心”!

0.2µm PVDF 转印膜, 26 cm x 3.3 m  

•  相比0.45 µm膜,孔径更小防止低分子量蛋白穿膜
•  膜韧性强,不易破,操作方便,适合反复杂交
•  蛋白吸附力(150-160µg/cm2)相比NC膜(80-100µg/cm2)高,转印效率更高
   蛋白损失更少,利于提高信号强度

Clarity® 超敏化学发光底物
不是每款ECL试剂都表现一样,市场上出现的各种显色液性能参差不齐。

当目标蛋白条带较弱时;
当曝光等待时间很长时;
当需要曝光多个膜条,为减少操作时间时;
当重复曝光发现信号衰减时;
当曝光出来的背景较黑时;

你需要的是一款高灵敏度低背景的ECL,飞克级Clarity可以满足您绝大部分实验的需求。
如需更高级别灵敏度,可使用Clarity Max® 。

与各种ECL底物PK的实验数据,可在Bio-Rad官网www.bio-rad.com输入产品货号后查看。

优惠包货号:

1705061 Clarity Western ECL Substrate, 500 ml
1620177 Immun-Blot® PVDF Membrane, Roll, 26 cm x 3.3 m

* 本文中的图片和数据均来自Bio-Rad研发部。
* Bio-Rad 是 Bio-Rad Laboratories, Inc. 在特定区域的商标。


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