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       威斯腾生物经过10多年的发展,获得了上百种细胞株和四十余钟原代细胞培养经验,并建立了庞大的细胞库及原代培养资料库;细胞平台有资深实验员、规范的SOP操作文件,万级净化细胞房,这些条件为保质保量完成每个客户的实验提供了保障。同时,威斯腾生物结合多年原代及传代细胞培养经验,结合平台已有的技术优势,建立了完善的体外药筛实验,并引进RTCA(Real-time cellular Analysis,实时无标记细胞记录仪),在药筛过程中,全程实时记录细胞真实状况,为药筛提供最真实精准的实验数据。威斯腾生物与上海中科院生物与细胞所化学生物学技术平台合作,享有英国国家医学研究院科技转化部MRCT独家提供的约1万种核心结构小分子化合物库资源,基于成药性结构设计,特别适于进行以新药研发为目的的活性化合物筛选。精选SiRNA库,包含20个亚库,可根据需求定制提高通路筛选。

原代细胞培养案例

1. 大鼠大脑皮质神经细胞的原代培养
实验步骤如下:

新生鼠 酒精浸泡 剥离脑组织 大脑皮质
剥离血管 洗涤 剪碎消化  200目不锈钢网过滤
 
细胞鉴定:

第一天 第二天 第三天 免疫荧光鉴定

2. 骨髓间充质干细胞BMSCs的原代培养
实验步骤如下


 SD乳大鼠颈椎脱臼法处死 分离出大鼠股骨和胫骨 分离出大鼠股骨和胫骨 剔除骨头表面肌肉

股骨和胫骨 冲骨髓 淋巴细胞分离液分离

细胞鉴定:

第一代 第二代 第三代 第四代

中心可提供的原代培养种类:

原代细胞名称 来源 分离时间 鉴定指标 鉴定方法
大鼠脑星形胶质细胞 大鼠 3-4h 胶质纤维酸性蛋白(GFAP) IHC/IF
大鼠皮层神经元细胞 大鼠 3-4h 神经元特异性烯醇化酶(NSE) IHC/IF
骨髓间充质干细胞 大鼠/小鼠/兔 3-4h CD44+CD34- 流式表面抗原检测
小鼠小胶质细胞 小鼠 3-4h Iba1 IHC/IF
大鼠血管内皮细胞 大鼠 3-4h Ⅷ因子相关抗原 IHC/IF
大鼠膀胱逼尿肌细胞 大鼠 3-4h α-SM-Actin IHC/IF
大鼠心肌细胞 大鼠 4-5h α-actin IHC/IF
大鼠心肌成纤维细胞 大鼠 3-4h a-SA抗体 IHC/IF
小鼠血管平滑肌细胞 小鼠 3-4h 肌动蛋白α-SMA IHC/IF
大鼠牙源性间充质细胞 大鼠 3-4h 波形丝蛋白(vimentin)
角蛋白(keratin)
IHC/IF
小鼠脾脏淋巴细胞 小鼠      
小鼠巨噬细胞 小鼠      
小鼠附睾精子细胞 小鼠      
老年鼠脂肪间充质干细胞 老年鼠 3-4h D44+CD45- 流式表面抗原检测
瘢痕组织成纤维细胞 瘢痕组织 3-4h 波形蛋白 IHC/IF
大鼠皮层神经元干细胞﹡ 大鼠 3-4h Nestin IHC/IF
骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)﹡﹡ 骨髓 3-4h CD34与CD133 IHC/IF
﹡:神经元干细胞原代培养通常需要额外的细胞因子如B-27、EGF、bFGF
﹡﹡:EPCs原代培养需要特殊培养基


细胞平台展示:

万级净化细胞房 超净工作台 荧光显微镜
RTCA仪器 RTCA实现多功能实时无标记检测 RTCA筛选特定作用机制的抗肿瘤药物
高内涵细胞分析仪Opera 高通量自动化药物筛选实验平台 高通量自动化siRNA文库实验平台

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细胞生物学检测

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原代细胞培养

大鼠骨髓间充质干细胞
小鼠海马神经元细胞
骨髓内皮祖细胞
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CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入

基因敲除细胞系
• 基因敲入细胞系
多基因敲除细胞系
miRNA/LnRNA敲除细胞系
基因定点突变细胞系
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