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产品简介

       三磷酸腺苷(ATP)是生物体内的重要能量来源,ATP在活细胞内的含量与细胞的数量成正比。这一特性被应用于定量活细胞的的细胞数量,其中基于荧光素酶(Luciferase)的冷光细胞活力检测系统以其高灵敏度、高稳定性被广泛用于各种活细胞的检测及药物筛选。荧光素酶在底物荧光素(Luciferin)、ATP和分子氧的存在下,能将荧光素氧化成氧化荧光素(Oxyluciferin),从而产生自发的冷光,发光的强度与ATP的量成正相关。

       苏州极创生物科技有限公司利用专有的技术成功开发出Lumi-Glow™ 细胞活力检测试剂盒。该试剂盒为均质即用型(Homogeneous ready for use)试剂,集细胞裂解、荧光素酶、荧光素于一体,通过“加入-混合-检测”免去了先裂解后检测的实验步骤,而且稳定的“辉光”更适合各种肿瘤细胞的增殖检测和药物高通量筛选的应用。

产品特点

1. 更高的稳定性:
     室温(22℃)储存48小时,或4℃储存4周,或-20℃储存12个月,荧光素酶保持 > 90%的活性;

图 1: Lumi-Glow™ 细胞活力检测试剂盒储存稳定性测试:1x105/ml的A549 细胞接种于96孔白板透明底培养板,100μl/孔;24小时后平衡至室温,加入平衡至室温的Lumi-Glow™ 细胞活力检测试剂,50μl/孔,混匀;15分钟后读取荧光值。每次实验中都加入保存于-200C的同批次产品作为对照,对照的信号值用于normalize 稳定性考察样品的相对荧光值。

2. 更高的灵敏度:
     在96孔板中能检测出少于40个细胞/孔的细胞数量;
图2: Lumi-Glow™ 细胞活力检测试剂灵敏度测试:两倍系列稀释的HEK293细胞接种于96孔透明底白板,100μl/孔;24小时后平衡至室温,加入平衡至室温的Lumi-Glow™ 细胞活力检测试剂,50μl/孔,混匀;15分钟后读取荧光值。荧光信号与细胞数之间具有很好的线性关系(r2=0.99)。

3. 更宽的动态量程:

     6-7个动态量程范围内维持稳定的线性关系;

4. 更便捷的实验步骤:
     “加入-混合-检测”使整个实验步骤更为简单,更易操作;

5. 适合于高通量检测:
     荧光信号半衰期超过2小时,且在加入试剂后的5-60分钟内,相对荧光强度保持稳定的线性关系,适合一次实验同时处理大批量的微孔板;
图 3: Lumi-Glow™ 细胞活力检测试剂检测化合物Staurosporine在不同肿瘤细胞中的活性:1-5x104/ml的A549细胞,HeLa细胞,MCF-7细胞,和HCT116细胞分别接种于384孔白板透明底培养板,20μl/孔;24小时后加入不同浓度的Staurosporine,于370C继续培养72小时,然后将细胞平衡至室温,加入平衡至室温的Lumi-Glow™ 细胞活力检测试剂,10μl/孔,混匀;15分钟后读取荧光值。Staurosporine在A549细胞,HeLa细胞,MCF-7细胞,和HCT116细胞的IC50值分别为:2.9nM; 5.4nM; 16.5nM; 和33nM。
表1:5次实验中的Z’值*

细胞
实验1
实验2
实验3
实验4
实验5
A549
0.85
0.81
0.87
0.79
0.82
HeLa
0.82
0.76
0.81
0.84
0.75
MCF-7
0.78
0.83
0.82
0.82
0.85
HCT-116
0.81
0.79
0.78
0.83
0.79

*: 在Z’实验中,分别接种一定浓度的每种细胞到一块384孔白板透明底培养板中,20μl/孔。在实验1,2,3中,细胞铺板24小时后,左半板分别加入1μM的Staurosporine(DMSO的终浓度为0.5%),右半板加0.5%的DMSO; 在实验4,5中,细胞铺板24小时后,右半板分别加入1μM的Staurosporine(DMSO的终浓度为0.5%),左半板加0.5%的DMSO; 加入Staurosporine和DMSO 72小时后,将细胞平衡至室温,加入平衡至室温的Lumi-Glow™ 细胞活力检测试剂,10μl/孔,混匀;15分钟后读取荧光值。

产品组成和储存

1. 产品组成:
荧光素酶,荧光素,缓冲液混合后灌装于10 ml 或100 ml的棕色瓶中,四种规格如下表所示:

产品目录号
产品规格
可检测96-孔板的孔数
可检测384-孔板的孔数
C1001
1 x 10 ml
200
800
C1002
10 x 10 ml
2,000
8,000
C1003
1 x 100 ml
2,000
8,000
C1004
10 x 100 ml
20,000
80,000

2. 储存条件:
       为了长期保持Lumi-Glow™ 细胞活力检测试剂盒的稳定性,请将试剂盒保存于-20℃ 或-80℃。短期内,试剂盒 可储存于室温(22℃)3天; 或4℃1个月。试剂可耐受超过10次的冻融。

订购信息
电话:0512-67261901; 177-6801-0915
Email:info@jnclabs.com


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苏州极创生物科技有限公司
公司简介
苏州极创生物科技有限公司是一家位于苏州生物纳米园的创新型高新技术企业。公司通过其强大的研发专家和团队,致力于为客户提供高性价比的解决方案,从而支持他们在生命科学领域和新药研发领域的研究工作。
极创生物的主要产品建立于公司所特有的基于荧光素酶和报告基因的检测系统,产品具有稳定性高、重复性好、敏感性强的特点,并且适配高通量筛选。所有的产品生产均经过严格的条件和过程控制,并有产品质量分析报告。
极创生物为客户提供化合物特异性评价和药效评价服务。公司所提供的服务平台基于特有的报告基因系统和荧光素酶检测系统,具有极高的性价比。

Company introduction
Suzhou J&C Laboratories Co., Ltd., an innovation-driven biotechnology company, is located in Suzhou BioBay, China. The company is committed to delivering solutions to facilitate bio-research and drug discovery for the customers at effective cost through its strong R&D teams and scientific expertise. The company’s high throughput compatible products were built around luciferase-based proprietary bioluminescence and reporter gene system with high stability, super reproducibility, and ultra sensitivity. All products are manufactured under strictly controlled conditions with certificate of analysis. The company offers services of compound profiling and efficacy evaluation which were implemented in the special reporter gene systems, as well as luciferase-based platforms.

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