microRNAs (miRNAs)的发现时间很短,但已经成为小的内源性RNA家族的重要组成部分。microRNA是一类转录后调控因子,通过碱基配对方式与目的mRNA结合,实现转录后基因调控功能。在细胞质中,miRNAs 通常为19-25个核苷酸的成熟形式,这一形式的miRNA是从长的发夹结构前体顺序剪切而来的,起作用的酶是RNAse III,核酸酶Drosha和Dicer。到目前为止,在脊椎动物,非脊椎动物和植物中,有超过3400种microRNA被发现,其中部分miRNAs与其可能的靶基因也被一一对应。一些 miRNAs在基因组中有多个位点,还有一些编码miRNA的基因串联排列在基因组中。近期的生物信息学预测,结合了芯片分析,小RNA克隆和Northern blot方法,认为脊椎动物基因组中的miRNAs总数 远远超过之前所预测的,可能达到近千个。
    microRNA在基因功能调控中的突出作用。最初的研究认为,miRNA的调控范围可能涉及全基因组中近30%的基因,而且miRNA水平基因调控机制是全新的。到目前为止,研究还发现miRNAs在几种肿瘤和组织分化过程中起重要作用。对miRNA的研究尚处于未完全开发期,研究者们在这一的基因调控研究领域发掘出激动人心的新的研究思路。为研究miRNA功能,一种重要的思路是同时引发大量miRNA表达的显著变化。丹麦Exiqon开发出miRCURY™ LNA芯片,专门用于miRNA表达的大规模研究分析。

    丹麦Exiqon公司在microRNA表达和功能分析领域具有国际领先地位,于2005年获得了Ernst&Youngs生物类大奖。公司提供miRCURY™系列产品,用于研究microRNA的表达,分布和功能。该公司生产的microRNA芯片,固定有427个捕获探针,包括与人,小鼠和大鼠microRNA精确配对的探针,对照探针以及错配探针,并且每张芯片对同一样品重复4次。芯片所采用的捕获探针是基于Exiqon的LNA™技术的探针,在寡核苷酸中掺入LNA,极大的增进了探针与互补的靶DNA或RNA的亲和活力;探针与靶点结合的Tm值上升2-8℃。由于使用了LNA,该芯片表现出比同类产品更为优异的品质。
 
  Exiqon miRCURY™ LNA microRNA芯片特点:
  • 节省样品制备时间,简单方便的一步法标记探针
  • 节省总RNA使用量,仅需要1~2μg 根据您具体实验要求增加或减少样品用量
  • 统一的标记方法保证所有的靶microRNA同等程度被标记,没有序列偏好
  • 使用Tm标准化的捕获探针,保证对所有靶点有相同的亲和活性
  • 灵敏度高,可以检测普通DNA作为捕获探针的芯片不能检出的微量microRNA
  • 高特异性芯片,能区分同源microRNA
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    图3 Exiqon microRNA芯片 实验结果的局部图像
        康成生物作为Exiqon公司中国总代理,为您提供microRNA芯片全程技术服务,芯片检测采用先进的GenePix 4000B荧光检测系统。您只需要提供保存完好的组织或细胞标本,本公司的芯片技术服务人员就可为您完成实验操作,包括样品RNA抽提,RNA质量检测,荧光标记探针制备,芯片杂交,图像采集和数据分析等,并为您提供包括详细的实验方法和芯片实验数据与图表的实验报告。
        康成生物还为您提供microRNA研究相关的其他技术服务,包括microRNA实时定量PCR技术服务;pre-microRNA载体构建技术服务,详情欢迎联系康成生物查询。
     
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