GAPDH优质内参
Monoclonal Mouse Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease (GAPDH)
Catalog No: KC-5G4
Size: 100μg/100μl (100 blots)每支仅售988元!
Western Blot 优质内参,条带清晰,高效敏感,
稀释比例可达10,000倍以上,有效期两年
背景:
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
注:因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的。在实验中,可能存在总蛋白浓度测定不准确;或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差;这些误差需要通过测定每个样品中实际转到膜上的GAPDH的含量来进行校正,所以一般的western实验都需要进行内参设置。具体校正的方法就是将每个样品测得的目的蛋白含量与本样品的GAPDH含量相除,得到每个样品目的蛋白的相对含量。然后才进行样品与样品之间的比较。
反应:
抗GAPDH单抗(clone 6C5)能够与鱼、蛙、鸡、兔、小鼠、大鼠及人组织来源的GAPDH反应,但不能与酵母GAPDH反应。
应用:
GAPDH检测。Western Blotting(检测条带大约在36kDa,稀释比例达10,000倍)、ELISA、亲和纯化、免疫荧光及免疫组化。

图示:抗GAPDH单抗(Cat#KC-5G4)检测心脏组织匀浆中的GAPDH水平。A-G分别表示不同实验来源的心脏组织匀浆。抗GAPDH单抗稀释比例为1:10,000,HRP羊抗鼠二抗(Cat#KC-MM-1302)稀释比例为1:1000。采用SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrate Kit试剂盒及X胶片曝光显影。
HRP标记的GAPDH优质内参
HRP-conjugated Monoclonal Mouse Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease (HRP标记的GAPDH)
Catalog No: KC-5G5
Size: 100μg/100μl (100blots)每支仅售1498元!
- 操作省时,无须二级抗体反应
- 结果条带单一,避免二级抗体的非特异性反应
- Western Blot 优质内参,条带清晰,高效敏感
- 稀释比例可达10,000倍以上,有效期两年
背景:
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
注:因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的。在实验中,可能存在总蛋白浓度测定不准确;或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差;这些误差需要通过测定每个样品中实际转到膜上的GAPDH的含量来进行校正,所以一般的western实验都需要进行内参设置。具体校正的方法就是将每个样品测得的目的蛋白含量与本样品的GAPDH含量相除,得到每个样品目的蛋白的相对含量。然后才进行样品与样品之间的比较。
反应:HRP标记的抗GAPDH单抗(clone 6C5)能够与鱼、蛙、鸡、兔、小鼠、大鼠及人组织来源的GAPDH反应,但不能与酵母GAPDH反应。
应用:Western Blotting(检测条带大约在36kDa,稀释比例达10,000倍)、ELISA、亲和纯化、免疫荧光及免疫组化。
方法:免疫印迹反应最后一步加入二级抗体时,同时加入HRP标记的GAPDH抗体温育,即可在检测目的蛋白的同时检测到GAPDH的含量。

图示: A-G分别表示不同实验小鼠心脏蛋白(上样量50ug),兔抗小鼠Akt抗体(Cat#KC-5A01)检测心脏组织匀浆中Akt水平。加入兔二抗(Cat#KC-RB-035)时同时加入HRP标记的抗GAPDH单抗(稀释比例为1:10,000,Cat#KC-5G5)。采用化学发光试剂盒(康成生物Cat#KC-420)及X胶片曝光显影。一次反应即可同时检测目的蛋白(Akt)与内参GAPDH的含量。