融合标签蛋白纯化系列四：常用蛋白酶及蛋白酶切割清除试剂盒

限制级凝血酶
限制级凝血酶特异性切割带有识别位点（LerValProArg GlySer）目标蛋白。产品经过对融合蛋白切割活性的功能性测试，不含有任何杂蛋白酶。凝血酶与10X凝血酶切割缓冲液和对照蛋白一起提供。
单位定义：一单位定义为20°C 200ml反应体系中(20mM Tris-HCl pH8.4、150mM NaCl、2.5mM CaCl2、50mg融合蛋白和酶)16小时切割1mg融合蛋白所需要的酶量。

生物素化凝血酶
生物素化凝血酶与限制级凝血酶相似，但共价结合了生物素，可在酶切反应结束后，通过固定化链亲和素方便地去除蛋白酶。生物素化凝血酶的使用方法与未修饰凝血酶相同，与链亲和素琼脂糖的结合率大于99%。

凝血酶切割/清除试剂盒
该试剂盒包括进行凝血酶酶切以及用于酶切完成后以亲和结合方式去除生物素化凝血酶的试剂。试剂盒中的对照蛋白，用于实验样品平行的对照消化，或测试特定条件下的切割效果。对照蛋白被切割成两个片段，可通过标准SDS-PAGE和考马斯亮蓝染色检测。
对照蛋白 (货号69069-3，10ug)
对照蛋白也可单独购买，用于监测凝血酶或肠激酶的性能。48kDa对照蛋白被切割成35和13kDa的两个片段，通过SDS-PAGE可容易地看到。

重组肠激酶
重组肠激酶(rEK)为牛肠激酶催化亚基的高纯度制品，识别的切割位点与天然酶相同（AspAspAspAspLys），活性也与天然酶相似，但rEK切割速率较快。与一些天然牛肠激酶制品不同，Novagen的rEK纯化到几乎完全均一，不会发生任何杂蛋白酶引起的二级切割。
单位定义：一单位定义为23°C和20mM Tris-HCl（pH7.4）、50mM NaCl、2.5mM CaCl2缓冲液中，16小时切割50mg融合蛋白所需要的酶量。

肠激酶切割/清除试剂盒
肠激酶切割/清除包括用于高特异性酶切的 rEK ，以及用于酶切完成后以亲和结合方式去除 rEK 的试剂。目标蛋白经酶切后，通过EkaptureTM琼脂糖亲和结合可从反应体系中去除99%以上的 rEK ，并可通过离心过滤去除琼脂糖。由于酶切和亲和结合使用相同缓冲条件，因此操作中不需要变换缓冲液。试剂盒中还包括对照蛋白，用于实验样品平行的对照消化，或测试特定条件下的切割效果。48kDa的 rEK对照蛋白被切割成32和16kDa的两个片段，可通过标准SDS-PAGE和考马斯亮蓝染色检测。对照蛋白同时具有氨基末端S?TagTM序列，可用Western杂交精确检测16kDa蛋白裂解产物。
肠激酶切割捕获试剂盒设计用于高特异性切割融合蛋白，并随后快速亲和捕获和去除肠激酶。
目标蛋白切割后，通过EkaptureTM琼脂糖亲和捕获从反应中去除99%以上的rEK。捕获rEK后，通过离心过滤去除Ekapture琼脂糖。由于切割和捕获使用相同缓冲条件，因此不需要更换缓冲液。
试剂盒还包括对照蛋白，用于实验样品平行的对照消化，或测试客户缓冲条件下的切割效果。48kDa对照蛋白被切割成32和16kDa两个片段，通过标准SDS-PAGE和考马斯亮蓝染色可容易地看到。对照蛋白还具有氨基末端S?TagTM序列，可用Western杂交试剂灵敏检测16kDa蛋白裂解产物。

限制级Xa因子
限制级Xa因子是从从牛血浆分离并经过Russell蝰蛇蛇毒活化的高纯度蛋白酶。产品中没有任何杂蛋白酶，因此不会产生二级切割。Xa因子的切割识别位点是IleGluGlyArg的羧基末端，因此可以从相应的重组蛋白中去除所有载体编码的序列。
单位定义：一单位限制级Xa因子在21°C和50mM Tris-HCl（pH8.0）、100mM NaCl、5mM CaCl2缓冲液条件下，16小时切割95%以上的50mg Xa对照蛋白。

Xa因子切割/清除试剂盒
Xa因子切割/清除包括用于高特异性酶切的Xa因子，以及用于酶切完成后以亲和结合方式去除Xa因子的试剂。目标蛋白经酶切后，通过XarrestTM琼脂糖亲和结合可从反应体系中去除99%以上的Xa因子，并可通过离心过滤去除琼脂糖。由于酶切和亲和结合使用相同缓冲条件，因此操作中不需要变换缓冲液。试剂盒中还包括对照蛋白，用于实验样品平行的对照消化，或测试特定条件下的切割效果。49kDa的 Xa对照蛋白被切割成32和17kDa的两个片段，可通过标准SDS-PAGE和考马斯亮蓝染色检测。对照蛋白同时具有氨基末端S?TagTM序列，可用Western杂交精确检测17kDa蛋白裂解产物。

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