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MicroRNA定量研究的高性价比选择


Mir-x系列
      microRNA是一类内源性的非编码小RNA,越来越多的证据表明异常表达的microRNA是人类肿瘤等疾病发生的重要标志。目前,对于microRNA的检测技术日益成熟,包括提取、定量、定位以及功能研究。其中的定量研究被广泛应用于表达谱分析和biomarker筛选的过程中,对癌症等疾病的早期发现有着重大意义。
      Takara公司旗下Clontech品牌提供专用于microRNA Real-Time PCR检测的mir-X系列试剂盒,产品具有以下特点:


实验原理如下图所示:

      Mir-X™ miRNA qRT-PCR TB Green™ Kit的原理是在单管中一步法合成第一链cDNA,然后使用miRNA特异性引物和TB Green™试剂对cDNA进行特异性的定量扩增。 在Mir-X cDNA合成反应中,使用poly(A)聚合酶将RNA加A尾,然后使用修饰的oligo(dT)引物和SMART MMLV Reverse Transcriptase进行反转录。

实验例:

      对Let7 miRNA家族序列进行特异性的定量检测。将合成的8种Let7家族序列混入yeast poly(A)+ RNA中作为模板,使用图A中的8条引物进行检测。将每个特异性引物的定量值取为100时,显示数值如图B所示,除了对应引物的扩增,几乎没有脱靶的扩增。

      Mir-X系列产品包装灵活,有独立的反转录试剂盒和反转录定量二合一试剂盒可供选择,其中独立的反转录试剂盒经过众多用户亲测,可与Takara的定量试剂搭配使用,能够满足大多数实验要求,是高性价比的组合选择。



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microRNA定量检测



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