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降低CRISPR脱靶效应,这种方法试过了吗?文末套装优惠福利!


由于简便易用的特点,【CRISPR/Cas9基因编辑技术】在癌症和遗传性疾病、能源及粮食领域相关的研究方面都有很大突破,其应用广泛性将止于何处犹未可知。然而,如何降低脱靶效应一直都是CRISPR/Cas9基因编辑技术的一个难题。近期,众多研究表明直接使用核糖核蛋白(Ribonucleoprotein,缩写RNP:“Cas9蛋白质”和“向导RNA”的复合物) 进行基因编辑,可有效降低脱靶效应,成为CRISPR基因组编辑研究趋势。
 
直接使用RNP进行基因编辑,有效降低脱靶效应。RNP导入细胞后,会迅速激活DNA剪切活性,快速切断靶标序列。另外,由于RNP在细胞内能够快速分解,从而有效避免了基因组上靶标序列以外的相似序列被切断(off-target效应),这种方式也因此成为近期CRISPR基因组编辑研究趋势。
参考文献 :Hendriks, WT. et al ., Genome Editing in Human Pluripotent Stem Cells: Approaches, Pitfalls, and Solutions. Cell Stem Cell. 2016, 18(1): 53.
 
RNP基因编辑应用文献逐年增加,受到广泛关注和认可。RNP可以通过电穿孔、显微注射以及转染的方法导入至靶标细胞。通过Google Scholar检索使用RNP进行基因编辑的文献,我们发现无论使用哪种导入法,相关文献数量都在逐年增加。
 
 
RNP基因编辑明星搭档,有效降低脱靶效应,确保实验一致性。
 
① sgRNA体外转录和筛选系统,小操作成就高保障:Guide-it Complete sgRNA Screening System
· 调整了转录起始位点,sgRNA产量可达到约12 μg以上
· 使用PrimeSTAR Max PCR扩增sgRNA编码模板,可减少非特异性扩增
· 使用Clean-Up Kit柱式纯化方式纯化sgRNA,不需要进行繁琐的苯酚/氯仿抽提纯化
· Terra PCR Mix可直接以细胞为起始进行PCR,制备DNA剪切模板
 
 
② 高浓度的重组Cas9核酸酶,有效降低脱靶效应:Guide-it Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)
· 高蛋白质浓度(3 μg/μl),尤其适用于电穿孔
· 可造成活体损伤的甘油浓度比其他公司低
· 经NLS(核定位信号)导入后迅速转运至细胞核
· 有效实现低细胞毒性的突变导入
 
 
③ 轻松制备ssDNA供体模板,荣登《Nature》*杂志,助力T细胞基因编辑:Guide-it Long ssDNA Production System
· 可制备单链DNA长度范围为500 b~5 kb
· 特殊的「Strandase处理」技术将dsDNA转化为ssDNA
· 无需克隆和切胶纯化处理,操作简便
· 10 μg双链DNA起始样品可制备2~4 μg单链DNA
 
参考文献*:Roth, T.L et al., Reprogramming human T cell function and specificity with non-viral genome targeting. Nat. Lett. 559, 405–409 (2018).
 
 
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套装1:RNP基因敲除(Knockout)组合
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  Guide-it Complete sgRNA Screening System 632636 50 Rxns 10,701 8,026
  Guide-it Recombinant Cas9  (Electroporation-Ready) 632641 100 μg 2,450 1,838
 
套装2:RNP基因敲入(Knockin)组合
产品名称 Code No. 包装量 目录价(元) 优惠价(元)
  Guide-it Complete sgRNA Screening System 632636 50 Rxns 10,701 8,026
  Guide-it Recombinant Cas9  (Electroporation-Ready) 632641 100 μg 2,450 1,838
  Guide-itLong ssDNA Production System 632644 25 Rxns 5,654 4,241
 
活动时间:即日起-2019年8月15日
套装订购:请联系当地代理商,如有疑问可联系010-80720985咨询
 
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RNP基因编辑成为近期CRISPR研究趋势



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