高保真酶不会挑？看完这份选购宝典就全明白了！
第一章：何为高保真？
DNA聚合酶的保真度指的是它能够准确复制模板，或者在引物的3'端加入正确的核苷酸。碱基错配的比率被称为错配率。具有校正活性的PCR聚合酶具有3'→ 5'外切酶活性，可切除不正确的核苷酸并将其替换为正确的核苷酸。
敲重点：高保真DNA聚合酶保真性的一个通用标准是错配率，错配率越低保真性越好！！
第二章：如何测定保真度？
1. 蓝白斑筛选
该方法以表型变化为基础，因其快速、相对简单、经济有效而得到广泛应用。蓝白斑筛选的原始方法，被称为Kunkel方法（Kunkel和Tindall，1987），是基于lacZ基因的α-互补性，它能还原β-半乳糖苷酶基因活性，并产生蓝色菌落。使用此方法，来自含有单核苷酸错配或移码突变的lacZα PCR产物的菌落通常呈白色，而由无错误扩增子衍生的克隆则产生蓝色菌落。
2. 测序
该方法是对PCR后单个菌落进行Sanger测序。蓝白斑筛选法可以快速测定聚合酶的保真度，但不如测序法准确。蓝白斑筛选法检测不到不影响翻译的单核苷酸突变。而测序方法可以检测到所有的突变，因此更加准确。
敲重点：使用测序的方法测定的保真性比较结果更可靠！
第三章：高保真酶的应用？
在进行PCR反应前，首先要考虑你的应用是否需要高保真聚合酶。如果实验结果依赖于正确的DNA序列，那么就要尽量减少错配核苷酸的掺入。高保真酶被推荐用于基因克隆、蛋白质表达、蛋白质结构功能研究、cDNA文库构建和下一代测序等。
敲重点：克隆的重中之重是保真性！ PrimeSTAR®系列是克隆用PCR酶的理想选择！
第四章：高保真酶哪家强？
PrimeSTAR®系列具有很强的3'→5'外切酶活性，保真性优于Takara Bio的其他任一种PCR酶。此外，该系列兼具很高的反应性能，可谓是克隆用PCR酶的理想选择。
敲重点：错配率与所选的基因、PCR条件有密切关系。上述错配率是以GC rich、易发生碱基突变的区域（扩增难度高）为模板，采用测序的方法进行计算的。
终极篇章： PrimeSTAR®系列高保真酶如何选择？
PrimeSTAR®系列包括保真性高、且能快速进行PCR反应的【PrimeSTAR® Max】、能够扩增长链及GC rich样品的【PrimeSTAR® GXL】、无偏差基本型【PrimeSTAR® HS】等，请根据实验目的进行选择。
敲重点：追求反应速度，对保真性要求高的实验请选择【PrimeSTAR® Max】；长链扩增、GC-rich等难扩增模板的实验请选择【PrimeSTAR® GXL】，酶量加倍时也可进行高速PCR反应；基础型高保真PCR实验请选择【PrimeSTAR® HS】。
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