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Takara分享 | 自动化、高通量全长单细胞转录组研究方案

基于二代测序技术进行单细胞转录组研究,既要求准确、高通量地进行单细胞平行处理,同时要求可用的文库构建试剂能够稳定、高效地完成对目标样本的建库工作。转录本末端捕获与全长转录本捕获两种建库方法,可以为不同的基因表达研究问题提供针对性答案。

全长转录本捕获方法可以获得信息覆盖更均一的转录本,能够对基因融合、SNP检测、可变剪接进行细致地分析,为理解更深入的细胞生物学问题提供重要信息。Takara高通量单细胞分选系统ICELL8 cx Single-Cell System可以提供从单细胞分选到测序文库构建的完整解决方案,实现高通量、自动化的单细胞全长转录组研究!

ICELL8 cx单细胞全长转录组实验流程


• 基因融合检测案例(细胞系HCC2157)

转录本3’端捕获方法仅能检测到junction reads的信息;ICELL8 cx全长转录本捕获方法可以检测到junction reads和spanning reads双重信息,对融合事件有更灵敏的鉴定能力。


• SNP检测案例(细胞系HEK293)


ICELL8 cx全长转录本捕获方法对ClinVar中致病SNP的覆盖率约为转录本末端捕获方法的32倍。即使在转录本3’端((90, 100]),全长转录本捕获方法依然可以提供更高的SNP覆盖率表现。

注:ClinVar数据库中显示,HEK293鉴定到的致病性SNP更多地存在于基因的5’端。

• 文献案例

Schoger, Eric, et al. CRISPR-mediated activation of endogenous gene expression in the postnatal heart. Circ Res. 126, 6-24(2019)

来自哥廷根大学医学中心的研究人员使用ICELL8 cx Single-Cell System,对CRISPR激活系统模型小鼠心肌细胞进行全长转录组分析,在单细胞分辨率下对转化小鼠心肌细胞中指定基因转录本的上调程度进行了细致的研究,明确了该CRISPR激活系统在小鼠心肌细胞中调控转录的可行性。

产品链接:ICELL8 cx Single-Cell System


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