首页 > 核心刊物 > 中国生物工程杂志 2017.5 Vol 37, No.5 > 向日葵V-ATPase a3亚基基因的克隆及表达分析

向日葵V-ATPase a3亚基基因的克隆及表达分析

张艳芳1, 孙瑞芬2, 郭树春2, 侯建华1

1. 内蒙古农业大学农学院 呼和浩特 010019 2. 内蒙古农牧业科学院 呼和浩特 010031

 
Key Words:  向日葵 V-ATPase a3亚基 基因克隆 序列分析 基因表达
 

Abstract

摘要: 采用RACE技术,从向日葵P50中克隆V-ATPase a3亚基基因cDNA全长,并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR分析不同浓度、不同时间的NaCl、ABA和PEG模拟干旱胁迫条件下V-ATPase a3亚基基因的表达特征,以及相同胁迫条件下该基因在向日葵不同器官的表达特征。序列分析表明,该基因cDNA全长2 873bp,含5'-UTR 109bp、3'-UTR 295bp及编码区2 469bp,编码822个氨基酸,其编码蛋白质的理论分子质量为204.55kDa,等电点为6.29,GenBank登录号为KU315054。该基因编码的蛋白质为疏水性的跨膜蛋白,亚细胞定位预测其在质膜上。向日葵V-ATPase a3亚基与已报道的10种植物的V-ATPase a3亚基的同源蛋白有高度相似的保守区域,在进化上与朝鲜蓟的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果表明,向日葵受到NaCl、ABA和PEG模拟干旱三种非生物胁迫后,V-ATPase a3亚基基因均上调表达,但表达模式不同,不同器官存在特异性表达差异。研究认为,V-ATPase a3亚基基因响应了向日葵非生物胁迫的应答,为加强对V-ATPase基因的利用奠定基础。


 

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