简 介
    最近研究蛋白在细胞环境中与其他蛋白的复杂的网络作用关系成为蛋白质功能研究的重要方向。这里我们将介绍一种将两种得到普遍认可的技术表面等离子共振(SPR)和质谱(MS)相结合的新技术，实现配体垂钓和对新的生物分子相互作用以及大分子复合物的研究。

Biacore 3000

•  用Biacore进行生物分子相互作用分析可以无需任何标记直接实时检测两个或多个生物分子间的相互作用。

•  进行分析时，一对结合伙伴分子中的一种分子被固定在传感片的表面。

•  相互作用的过程被记录成时间函数的形式，其中结合的信号直接反应了溶液中的分子与传感片上的分子结合的量(如下图)

应用Biacore 3000系统进行配体回收
方法

•  传感片分子固定完成后（固定过程的传感图此次处未引用）

• 第二步,用与质谱匹配短暂冲洗耳恭听流动池(图1).

•  在回收时，先用与质谱匹配的缓冲液漂洗传感片表面，紧接着加2ul回收液并在传感片表面停顿一段时间（根据用户的设定）。被回收的样品被倒压回进样针并加到小管中或点到MALDI靶(图2)。

  硬 件

•  MALDI靶底座能够直接实现自动化的点样操作

•  传感表面准备部件能最大限度的使用传感片的表

• 面积，实现最大的样品回收量

  软 件

•  回收操作引导精灵提供了非常容易的回收操作设定过程

  配体垂钓

  模式方法

• 钙调素（CaM）

• 钙调素与肌球蛋白轻链激酶的结合域（CBD）

• 与钙调素特异结合的20巯基激酶片段，通过氨基固定在传感片上。