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  宝柏(香港)贸易有限公司(简称宝柏-中国Boppard-China)是一家致力于工业化学领域和生命科学领域研究的高新科技企业。公司成立于1998年,历经十余年的高速发展,宝柏-中国已经成为国内一家知名的试剂、耗材、仪器集中供应商,客户群广泛分布于化学生物技术公司、大学、医院、研究所、工厂等。迄今为止,宝柏-中国已拥有香港、北京、上海和广州等分支机构,为全国客户提供全面的产品,一流的质量,快捷的服务。 21世纪是生物学的世纪,生物医疗,大众健康,环境的可持续发展,都与社会的进步息息相关。在这充满机遇充满挑战的时代,宝柏-中国拥有雄厚的技术力量,完善的市场营销,敬业的销售团队,携手全球知名的合作伙伴,力争成为优秀的市场竞争者,为中国生物化学的科研事业贡献自己的一份力量。 宝柏-中国在此郑重承诺:我们会以有竞争力的价格,高质量的产品,完善的售前售后服务,强大的技术支持,一如既往地为新老客户服务,急客户之所急,忧客户之所忧,为中国科研事业的进步与自身企业的发展而努力。 为完善服务不断创新,永不止步!
α-突触核蛋白聚集检测试剂盒促销活动 [2016-10-21]
  痴呆症是使记忆和辨别能力产生退化丢失的疾病,还没有根本性的治疗。经过多年的科学研究证实,蛋白凝集发生在许多神经变性疾病(包括痴呆症)的大脑退化部分,表明这种聚集的出现与这些疾病的发生和发展密切相关。聚集发生时,正常蛋白形式因特殊原因形成异常结构,并积累在细胞中,每一种疾病有不同的聚集蛋白。在帕金森病/路易体痴呆/多系统萎缩病人脑内,α-突触核蛋白形式结构发生异常。α-突触核蛋白聚集检测试剂盒模仿体内“α-突触核蛋白”的聚集,是可在体外筛选的活性成分。Cosmo α-Synuclein Aggregatio...
Cosmo 可逆热凝胶限时优惠-3D细胞培养 [2016-7-20]
  温敏性水凝胶 Mebiol Gel促销活动【活动编号: MEBIOLGEL_TRIAL】【活动有效期:2016/7/18至2016/12/31】Mebiol Gel,可用于3D细胞培养和其他领域;PNIPAAm-PEG;聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇的嵌段共聚物。 ◆特点 ● 易于操作● 无毒性,生物相容性好● 100%合成,无病原体● 透明度高,利于细胞观察● 性能完善◆应用● 干细胞和多能干细胞培养,增殖和分化● 3D细胞培养● 细胞移植● 器官和组织再生● 药物传递● 非细胞培养应用◆案例1. ...
肥胖、糖尿病、垂体激素、过敏及免疫相关因子免疫检测试剂-Shibayagi [2016-7-7]
  日本 Shibayagi成立于1977年,从事抗体和免疫试剂盒的生产,是日本著名的内分泌研究公司,提供肥胖、糖尿病、垂体激素、过敏及免疫相关因子免疫检测试剂,用于以科学家为基础的研究领域,为客户提供满意和难忘的的服务,在全球业界享有盛誉。Apo B-48为其特有专利产品。和光编号生产商编号产品名称中文名称包装634-01481AKRIN-011T Mouse Insulin ELISA Kit(Ttype)小鼠胰岛素 ELISA试剂盒(T型)96 tests639-23911AKRIN-011RU M...
AteloCell® 细胞培养胶原-限时促销 [2016-4-20]
  AteloCell® 胶原系列促销活动【活动编号:1058】【活动有效期:即日起至2016/7/31】AteloCell系列包含高纯度胶原制成的溶液、海绵和胶原蛋白膜。该系列产品不但适用于日常细胞培养,更可用于再生医学相关的基础研究。其独特的体内转染胶原AteloGene ® ,是目前市面上独一无二的活体转染试剂,机体不会产生免疫反应,且无任何毒副作用。产品编号产品名称包装建议零售价终端活动优惠(75折)KOU-ACB-05SAtelocollagen coated B...
Exosome 外泌体纯化试剂盒-限时特价促销 [2016-4-20]
  Exosome 促销活动【活动编号:EXOSOME】【活动有效期:即日起至2016/7/31】外泌体和其他细胞外囊泡(EVs)属于小细胞膜囊泡,包含蛋白,mRNA,microRNA,DNA和脂类,是由不同细胞分泌,并且在体液包括血液、唾液、尿液、脑脊髓液(CSF)和乳液中稳定存在。这些EVs被当做细胞和细胞沟通的信使,不同疾病的生物标志物。提取外泌体的常规方法有:超滤,使用表面抗原的抗体进行亲和层析,和用多聚物试剂进行沉淀。然而,这些方法在回收效率,纯度和可操作性上不是非常令人满意。 MagC...
卡氏滴定法检测酮类的水分含量 [2016-3-10]
卡氏滴定法检测醛类的水分含量 [2016-3-10]
ENZO Genomics 基因组学产品促销活动 [2016-2-18]
  ENZO Genomics 基因组学产品促销活动创新型核酸标记产品能得到更清晰的实验结果为基因组学分析提供助力Enzo LifeSciences 是研究生命科学的先驱和创新者,针对基因组学的研究和发展,申请了DNA和RNA的化学标记专利。比较基因组杂交(aCGH)试剂盒是我们的分子生物学产 品组合的支柱,能检测DNA拷贝数的变化和染色体异常。aCGH 试剂盒能使我们更好地认识遗传疾病、癌症、和其它的基因组畸变,并且提供了更具体的特征。日常使用的各种各样的分子生物学产品为我们研发aCGH 试剂盒提供很大的帮...
卡尔费休试剂在石油制品中的应用 [2016-1-29]
PEVIVA 细胞凋亡检测——细胞凋亡定量试剂盒 [2016-1-8]
  PEVIVA 细胞凋亡检测——细胞凋亡定量试剂盒 体内实验中,定量检测上皮细胞凋亡或者坏死的ELISA试剂盒 可运用于肿瘤,肝脏疾病,毒理学,败血症,移植和抗宿主疾病(GVHD)等方面的研究。◆原理细 胞角蛋白18(Cytokeratin 18,简写CK18或者K18)是上皮细胞特异性表达的一类蛋白。当上皮细胞早期发生凋亡时,具有活性的caspase(比如caspase-3,- 7,-9)会酶解CK18形成三个片段,其中1个...
Wako 神经胶质瘤免疫组织化学用抗体 [2017-2-24]
  神经胶质瘤免疫组织化学用抗体

神经胶质瘤(glioma)是由支撑神经细胞的神经胶质细胞产生的肿瘤。

在这次新改进的WHO2016,除了常规的形态诊断外,又添加了分子信息的分类标准。根据最新研究发现,IDH(Isocitrate Dehydrogenase)1/2基因、ATRX基因、TERT promoter突变以及1p/19q共缺失等已经在神经胶质瘤的分子诊断受到关注。

Wako已经备全可识别野生型·突变型IDH1以及IDH2、ATRX、TERT,适用于免疫组化染色、免疫印迹的单克隆抗体。

▶抗ATRX,单克隆抗体(AMab-6)

ATRX(α-Thalassemia/mental retardation syndrome X-linked α地中海贫血/智力低下综合征X连锁)是与转录调控和染色质重建相关的蛋白质。已证实ATR-X综合征发病机制与X染色体的ATRX基因突变相关。

本抗体是识别人ATRX蛋白质的单克隆抗体。研究发现ATRX基因突变会导致ATRX蛋白的表达消失,因此可用免疫组化染色检测该基因突变情况。

◆产品概述

▪ 克隆号:AMab-6

▪ 特异性:ATRX

▪ 免疫动物:小鼠

▪ 同种型:IgG1·κ

▪ 形态:液体/ 含叠氮化钠的PBS

▪ 抗体浓度:约1mg / mL(产品标签)

▪ 适用范围:

   Western Blot免疫印迹(1μg/mL~)           

   Immunohistochemistry免疫组化(1〜5μg/mL~)            

   ELISA(1μg/mL~)

※请根据具体实验探究最适宜使用浓度。

【案例】

少突胶质细胞[A]以及弥漫星形细胞瘤[B]的免疫组织染色成像[抗ATRX,单克隆抗体(AMab-6)

1714872991171157.png

标本:脑肿瘤患者病变部位石蜡切片

A:Oligodendroglioma, IDH-mutant [WHO grade Ⅱ]

B:Diffuse astrocytoma, IDH-mutant [WHO grade Ⅱ]

切片厚度:4μm

抗原激活条件:pH 9.0溶液中高压灭菌器处理10分钟后,室温保存40分钟。

淬火:3%过氧化氢溶液,10分钟。

封闭:5%脱脂奶粉溶液,30分钟。

一抗:3μg/mL抗ATRX,单克隆抗体(AMab-6)

二抗:HRP标记的抗小鼠IgG(commercial product)

检测:DAB

对比染色:苏木精

1714872992248913.png

A:Oligodendroglioma(少突胶质细胞), IDH-mutant :

ATRX基因未突变,抗ATRX抗体免疫组织染色呈阳性。

B:Diffuse astrocytoma(弥漫星形细胞瘤), IDH-mutant :

ATRX基因突变,ATRX表达消失。抗ATRX抗体免疫组织染色呈阴性。正常细胞血管内皮细胞核被抗ATRX抗体染色。

数据提供:东北大学大学院医学系研究科 加藤幸成

▶抗TERT,单克隆抗体(TMab-6)

端粒酶是TERT(Telomerase Reverse Transcriptase端粒酶逆转录酶)、RNA模板和调控亚基的复合体。TERT是端粒酶的催化亚基。生殖细胞和组织干细胞中端粒酶活性高,80%~90%的肿瘤细胞中端粒酶活性也很高。

本抗体是可识别端粒酶催化亚基TERT的单克隆抗体。特别适用于免疫组织染色。神经胶质瘤表现之一,是TERT promoter区域的突变导致TERT蛋白抑制表达。这个现象是ATRX基因和相互排斥所致。TERT promoter突变是与IDH基因突变的1p/19q共缺失,在神经胶质瘤比较常见。另外也发现不发生IDH基因突变的神经胶质瘤。

◆产品概述

▪ 克隆号:TMab-6

▪ 特异性:TERT

▪ 免疫动物:小鼠

▪ 同种型:IgM·κ

▪ 形态:液体/ 含叠氮化钠的PBS

▪ 抗体浓度:约1mg / mL(产品标签)

▪ 适用范围:

   Western Blot免疫印迹(1μg/mL~)

   Immunohistochemistry免疫组化(1μg/mL~)

   ELISA(1μg/mL~)

※请根据具体实验探究最适宜使用浓度。

▶抗IDH,单克隆抗体

IDH(异柠檬酸脱氢酶;Isocitrate Dehydrogenase)是异柠檬酸和α-酮戊二酸相互转换的氧化还原酶。人含有:IDH(细胞质型,NADP+依赖性)、IDH2(线粒体型,NADP+依赖性)以及IDH3(线粒体型,NADP+依赖性),共三种类别。

有报道称IDH1以及IDH2基因在胆管癌,急性骨髓性白血病,软骨肉瘤,骨肉瘤和神经胶质瘤等各种癌症中高频率发生突变。

Wako已经备全识别IDH1・IDH2以及野生型·突变型IDH1/2抗体。

▶抗IDH1-R132H,单克隆抗体(HMab-1)[018-24081]

IDH1的突变几乎限定在132位的精氨酸,132位精氨酸被组氨酸置换的R132H突变占80~90%。

本抗体是可特异性识别132位精氨酸被组氨酸置换突变IDH1-R132H的抗体。不能识别野生型以及R132H以外的突变型。

◆产品概述

▪ 克隆号:HMab-1

▪ 特异性:IDH1-R132H

▪ 免疫动物:小鼠

▪ 同种型:IgG1

▪ 形态:液体/ 含叠氮化钠的PBS

▪ 抗体浓度:约1mg / mL(产品标签)

▪ 适用范围:

   Western Blot免疫印迹(5μg/mL)           

   Immunohistochemistry免疫组织化学(5~10μg/mL)            

   ELISA法(1~5μg/mL)

※请根据具体实验探究最适宜使用浓度。

▶抗IDH1-R132H,单克隆抗体(HMab-2)[013-26851]

本抗体与克隆号HMab-1一样可特异性识别IDH1-R132H抗体。不能识别野生型以及R132H以外的突变型。

即使在抗原浓度和抗体使用浓度低的条件下也可使用。

◆产品概述

▪ 克隆号:HMab-2

▪ 特异性:IDH1-R132H

▪ 免疫动物:小鼠

▪ 同种型:IgG1·κ

▪ 形态:液体/ 含叠氮化钠的PBS

▪ 抗体浓度:约1mg / mL(产品标签)

▪ 适用范围:

   Western Blot免疫印迹(1μg/mL~)            

   免疫组织化学(1μg/mL)            

   ELISA(1μg/mL~)

※请根据具体实验探究最适宜使用浓度。

▶抗IDH1-R132S,单克隆抗体(SMab-1)[015-24091]

IDH1突变,132位精氨酸不是被组氨酸,而是被半胱氨酸、丝氨酸、甘氨酸、亮氨酸置换发生突变。

本抗体是可识别132位精氨酸被丝氨酸置换IDH1-R132S的单克隆抗体。

◆产品概述

▪ 克隆号:SMab-1

▪ 特异性:IDH1-R132S

▪ 免疫动物:小鼠

▪ 同种型:IgG1

▪ 形态:液体/ 含叠氮化钠的PBS

▪ 抗体浓度:约1mg / mL(产品标签)

▪ 适用范围:

  Western Blot免疫印迹(为5μg/mL)            

   Immunohistochemistry免疫组织化学(5~10μg/mL)            

   ELISA法(1~5μg/mL)

※请根据具体实验探究最适宜使用浓度。

▶抗IDH1,单克隆抗体(RMab-3)[014-24061]

可识别野生型/突变型IDH1的抗体。可用于各种类型的神经胶质瘤组织切片的免疫组织染色。

◆产品概述

▪ 克隆号:RMab-3

▪ 特异性:野生型和突变IDH1

▪ 免疫动物:小鼠

▪ 同种型:IgG1 

▪ 形态:液体/ 含叠氮化钠的PBS

▪ 抗体浓度:约1mg / mL(产品标签)

▪ 适用范围:

   Western Blot免疫印迹(5μg/mL)

   Immunohistochemistry免疫组织化学(5~10μg/mL)            

   ELISA法(1~5μg/mL)

※请根据具体实验探究最适宜使用浓度。

▶抗IDH1,大鼠单克隆抗体(RcMab-1)[014-26381]

可识别野生型/突变型IDH1的单克隆抗体。不识别IDH2。

应用于大脑切片的免疫组织染色以及脑源样品免疫印迹的阳性对照以及内参抗体。

◆产品概述

▪ 克隆号:RcMab-1

▪ 特异性:野生型和突变IDH1

▪ 免疫动物:大鼠

▪ 同种型:IgG2a 

▪ 形态:液体/ 含叠氮化钠的PBS

▪ 抗体浓度:约1mg / mL(产品标签)

▪ 适用范围:

   Western Blot免疫印迹(0.5~1μg/mL)            

   Immunohistochemistry免疫组化(1~5μg/mL)            

   Immunocytochemistry免疫细胞化学(1~5μg/mL)

※请根据具体实验探究最适宜使用浓度。

▶抗IDH2,单克隆抗体(RMab-22)[011-24071]

可识别野生型/变异型IDH2的单克隆抗体。

突变型IDH2为172位精氨酸被赖氨酸、蛋氨酸、甘氨酸以及色氨酸置换突变产生。

本抗体可识别野生型IDH2以及突变型IDH2的IDH2-R172K/M。不识别IDH2-R172W。

◆产品概述

▪ 克隆号:RMab-22

▪ 特异性:野生型IDH2和突变IDH2(IDH2-R172K/ R172M)

▪ 免疫动物:小鼠

▪ 同种型:IgG2b

▪ 造型:液体/ 含叠氮化钠的PBS

▪ 抗体浓度:约1mg / mL(产品标签)

▪ 适用范围:

   Western BlotWestern印迹(5μg/mL)           

   Immunohistochemistry免疫组织化学(5~10μg/mL)           

   ELISA法(1~5μg/mL)

※请根据具体实验探究最适宜使用浓度。

▶抗突变型IDH1/ 2,单克隆抗体(MsMab-1)[015-25691]

可识别突变型IDH1以及突变型IDH2的抗体。不识别野生型IDH1/2。

可识别突变型IDH1:IDH1-R132H/R132S/R132G 突变型IDH2:IDH2-R172M/R172S/R172G。

◆产品概述

▪ 克隆号:MsMab-1

▪ 特异性:突变型IDH1(IDH1-R132H/ R132S/ R132G)和突变型IDH2(IDH2-R172M/ R172S/ R172G)

▪ 免疫动物:小鼠

▪ 同种型:IgG2a·κ

▪ 造型:液体/ 含叠氮化钠的PBS

▪ 抗体浓度:约1mg / mL(产品标签)

▪ 适用范围:

   Western Blot免疫印迹(1μg/mL)            

   Immunohistochemistry免疫组织化学(5μg/mL)

   ELISA(1μg/mL)

※请根据具体实验探究最适宜使用浓度。

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
017-26751  Anti ATRX, Monoclonal Antibody
抗ATRX,单克隆抗体
100μg  免疫化学用 
010-26861  Anti TERT, Monoclonal Antibody 
抗TERT,单克隆抗体 
100μg 免疫化学用 
018-24081  Anti IDH1-R132H, Monoclonal Antibody 
抗IDH1-R132H,单克隆抗体
100μg 免疫化学用 
013-26851  Anti IDH1-R132H, Monoclonal Antibody 
抗IDH1-R132H,单克隆抗体 
100μg 免疫化学用 
015-24091  Anti IDH1-R132S, Monoclonal Antibody 
抗IDH1-R132S,单克隆抗体 
100μg 免疫化学用 
014-24061  Anti IDH1, Monoclonal Antibody 
抗IDH1,单克隆抗体 
100μg 免疫化学用 
014-26381  Anti IDH1, Rat Monoclonal Antibody 
抗IDH1,大鼠单克隆抗体 
100μg 免疫化学用 
011-24071  Anti IDH2, Monoclonal Antibody 
抗IDH2,单克隆抗体 
100μg 免疫化学用 
015-25691  Anti Mutated IDH1/2, Monoclonal Antibody 
抗突变IDH1 / 2,单克隆抗体 
100μg 免疫化学用 

(编号10020)M65® ELISA试剂盒 [2017-2-23]
  

细胞死亡M65® ELISA试剂盒

M65® ELISA

◆原理

 

M65® ELISA检测来自死亡细胞释放的可溶性角蛋白18(K18),可以整体评估细胞的死亡情况,判断是由于细胞凋亡还是细胞坏死引起的细胞死亡。M65® ELISA 最初是为了和M30 Apoptosense® ELISA配套使用而设计研发的,后者特异性检测细胞凋亡。两者配套使用,可定量检测总的细胞死亡、细胞凋亡和细胞坏死。

由于M30 Apoptosense® ELISA 和M65® ELISA 都是用同一标准进行校对的,所以可以评估细胞死亡中细胞凋亡占的比例。

M65® ELISA可用于检测人血清,并且带有CE标记(可用于体外诊断)

M65-ELISA.jpg

M65.jpg

 

 

 

◆优点・特色

 

只特异性定量检测上皮细胞整体的死亡情况

与M30 Apoptosense® ELISA 配套使用,定量检测细胞凋亡、细胞坏死和细胞死亡。

检测更稳定,特异性更高。

夹心法ELISA检测,可拆卸的96孔板。试剂即开即用

肝脏疾病:检测肝脏疾病患者肝细胞总的死亡情况。可用肝脏疾病检测。

肿瘤:监测上皮细胞肿瘤经化疗后肿瘤细胞的死亡情况。

毒理学:临床评估不同药物对肝脏细胞的毒性。

 

 

◆案例・应用

 

体内细胞凋亡或者坏死引起肿瘤细胞死亡。细胞死亡的模式取决于细胞毒素刺激的类型和肿瘤的类型。细胞内ATP产生缺失通常会引起细胞凋亡,但有时候也会导致细胞坏死 (Leist et al., 1997)。细胞坏死期间,未经caspase水解的细胞内蛋白将会释放到细胞外。

角蛋白18(K18)是由很多种上皮细胞高表达的细胞内蛋白。大多数K18分子在细胞内是非可溶性的,但也报道有可溶性K18池(Chou et al., 1993)。细胞死亡期间,细胞内K18会释放到细胞外。检测细胞外可溶性的K18可反映上皮细胞的死亡情况 “过程和原因” (由于细胞凋亡和细胞坏死导致) (Kramer et al., 2004).

K18 在细胞凋亡期间被caspase催化发生水解, caspase-cleaved片段释放到细胞外。因此细胞外的 caspase-cleaved K18 (ccK18)浓度反映了细胞凋亡的数量。而且M30:M65 比代表了总细胞死亡中细胞凋亡的比例(不同 “M30:M65 比”) (Kramer et al., 2004).

M65 EpiDeath® ELISA 使用两种IgG型的K18小鼠单抗,评估人血清或则血浆中上皮细胞死亡情况。M30 Apoptosense® ELISA 特异性检测在caspase-cleavage d K18 在Asp396形成的新表位 (K18Asp396-NE 或者M30 neo-epitope) ,反映上皮细胞的凋亡情况(Hägg et al. 2002Bivén et al. 2003)。 两种检测试剂盒的单位根据同一标准校对,可以计算caspase-cleaved 和总K18 (“M30:M65 比例”)。培养细胞诱导细胞凋亡导致caspase-cleaved K18释放,M30:M65 比值较高, 然而如果细胞发生死亡,只有K18的水平是升高的,所以M30:M65 比值较低。

 

产品信息

M65®ELISA kit (CE-Mark) 体内,体外实验中,定量检测总的细胞死亡(凋亡和坏死) 。

特异性

样品类型

含有从死亡细胞中释放的CK18的血清或者血浆(EDTA,citrate,heparin plasma)

灵敏度

11 U/I, Standard A(0 U/L)+2 S.D.

范围

125-2,000 U/L

检测目标物

完整的CK18和可溶性caspase酶解的CK18(ccCK18/CK18F/CK18Asp396-NE/M30)

M65 EpiDeath® ELISA 和 M65® ELISA的区别,请参考相关资料。

 

 更多运用案例

产品编号 产品名称 产品规格
10020 M65 ®  ELISA
细胞死亡M65 ®  ELISA试剂盒
96 wells


(编号10040)M65 EpiDeath® ELISA 试剂盒(PEVIVA) [2017-2-23]
  

细胞死亡M65 EpiDeath® ELISA试剂盒Peviva.jpg

M65 EpiDeath® ELISA

 

◆原理

 

      M65 EpiDeath® ELISA检测新一代生物标记物角蛋白18。

      M65 EpiDeath® ELISA 检测新一代的生物标记物角蛋白18。M65 EpiDeath® ELISA检测细胞培养上清,血清和血浆样品中可溶性的角蛋白18。 K18 的含量反应了所有上皮细胞的死亡情况,不管是由于凋亡还是坏死引起的死亡都可以检测到。

M65-EpiDeath-ELISA.jpg

schema-antikroppar-bara-m65_epideath.jpg

 

 

◆优点特色

●    只特异性定量检测上皮细胞整体的死亡情况

●    检测更稳定,特异性更高。

●    夹心法ELISA检测,可拆卸的96孔板。试剂即开即用

●    肝脏疾病:检测肝脏疾病患者肝细胞总的死亡情况。可用肝脏疾病检测。

●    肿瘤:监测上皮细胞肿瘤经化疗后肿瘤细胞的死亡情况。

●    毒理学:临床评估不同药物对肝脏细胞的毒性。

 

细胞凋亡或者坏死引起细胞死亡。细胞死亡的模式取决于刺激的类型 (比如:细胞毒素和化疗后的肿瘤,或者肝脏损伤)和组织类型(比如:肿瘤)。M30 Apoptosense ELISA and 和M65 EpiDeath ELISA配套使用不仅定量检测细胞死亡的数量,而且确定细胞死亡的模式。(凋亡或者坏死)(样品包括血清,血浆和细胞培养上清)

肿瘤中使用的细胞毒素会尽量克服细胞凋亡过程中的紊乱状态,刺激细胞发生凋亡。不同的肿瘤细胞和细胞毒素也会引起细胞坏死。细胞内ATP产生缺失通常会引起细胞凋亡,但有时候也会导致细胞坏死(Leist et al., 1997).

肝脏损伤可能会引起肝细胞的死亡– 凋亡和坏死均可导致。有报道称细胞死亡模式的确定可用于不同肝脏疾病的临床诊断,预判和评估治疗效果(Volkmann et al., 2006)。角蛋白18(K18)是由很多种上皮细胞高表达的细胞内蛋白。大多数K18分子在细胞内是非可溶性的,但也报道有可溶性K18池(Chou et al., 1993)。细胞死亡期间,细胞内K18会释放到细胞外。检测细胞外可溶性的K18可反映上皮细胞的死亡情况 “过程和原因” (由细胞凋亡和细胞坏死引起) (Kramer et al., 2004)。K18在细胞凋亡期间被caspase催化发生水解, caspase-cleaved片段释放到细胞外。因此细胞外的caspase-cleaved K18 (ccK18)浓度反映了细胞凋亡的数量。而且M30:M65 比代表了总细胞死亡中细胞凋亡的比例(Kramer et al., 2004).

M65 EpiDeath® ELISA 使用两种IgG型的K18小鼠单抗,评估人血清或则血浆中上皮细胞死亡情况。M30 Apoptosense® ELISA 特异性检测在caspase-cleavage d K18 在Asp396形成的新表位 (K18Asp396-NE 或者M30 neo-epitope) ,反映上皮细胞的凋亡情况(Hägg et al. 2002Bivén et al. 2003)。两种检测试剂盒的单位根据统一标准校对过,可以计算caspase-cleaved 和总K18 (“M30:M65 比例”)。培养细胞诱导细胞凋亡导致caspase-cleaved K18释放,M30:M65 比值较高, 然而如果细胞发生死亡,只有K18的水平是升高的,所以M30:M65 比值较低。

M65 EpiDeath® ELISA 和 M65® ELISA的区别,请参考相关资料。

M65 EpiDeath®ELISA 是 M65®ELISA 的升级版,用于患者血清/ 血浆或细胞培养样品中总CK18 的测定。

特异性

样品类型

人血清或血浆、人细胞系的培养上清液或裂解液

灵敏度

25 U/L

范围

0–5,000 U/L

检测目标物

可溶性CK18

特点

可进行定量检测;试剂盒包含两个阳性对照;预铺ELISA   板,即用试剂,操作方便;可用于自动化

稀释线性

用M65 EpiDeath StandardA   稀释,平均值是95%(范围88-101%);用血清稀释,平均值是93%(范围82-101%)

更多运用案例

产品编号 产品名称 产品规格
10040 M65 EpiDeath ®  ELISA
细胞死亡M65 EpiDeath ®  ELISA试剂盒
96 wells
(编号10011)M30 Apoptosense® ELISA(细胞凋亡检测试剂盒) [2017-2-23]
  

细胞凋亡M30 Apoptosense®ELISA试剂盒
M30 Apoptosense® ELISA

 

◆原理
 
M30 Apoptosense® ELISA是PEVIVA最畅销的产品。可用于定量检测表达角蛋白18(K18)细胞(人)的凋亡情况。检测结果可信度高,检测结果重复性好。特异性检测可信度高是因为M30 Apoptosense® ELISA 只单独检测可溶性caspase-cleaved 角蛋白18(细胞凋亡产物)。
该产品广泛运用于肝脏疾病,肿瘤,毒理学等研究领域。
M30 Apoptosense® ELISA可用于检测人血清,并且带有CE标记(可用于体外诊断)。所有试剂都是即用型的。
◆优点特色
 
特异性定量检测表达角蛋白18细胞的细胞凋亡,包括肝细胞,乳腺癌、肺癌、前列腺癌、结肠癌等上皮细胞来源的肿瘤细胞。
可用于早期凋亡研究,比常规的Annexin V检测灵敏度高。可检测血清、血浆和细胞培养上清的样品。常规检测细胞凋亡,需要制备细胞裂解液,取材不方便。
可检测多种caspase介导的细胞凋亡(比如caspase-3,-7,-9)
夹心ELISA法进行检测,96孔板,板子可拆卸。试剂即拆即用。
与M65® ELISA 配套使用,定量检测细胞凋亡、细胞坏死和总细胞死亡。
肝脏疾病:定量检测患肝脏疾病病人的肝细胞凋亡情况,可预测患肝脏疾病的可能性。
肿瘤:监测上皮细胞肿瘤患者化疗诱导肿瘤细胞凋亡的情况。
毒理学:临床评估不同药物对肝脏细胞的毒性。
 

 
 
 
M30 Apoptosense® 是基于M30单抗的ELISA试剂盒 (Leers et al., 1999).。 该抗体可以特异性结合caspase-cleaved 角蛋白18 (ccK18, caspase-celaved cytokeratin 18, ccCK18 或者K18-Asp396。caspase水解角蛋白18形成3个片段,其中1个片段 氨基酸第387位-第396位含有新表位(neoeptitope) ,这个片段就称为caspase-cleaved角蛋白),但是不结合天然、未切除的K18。 M30 Apoptosense® 因此可特异性检测上皮细胞的凋亡情况 (Hägg et al. 2002).
 
 
◆案例应用
 
监测肿瘤治疗
 
人 经常患的肿瘤包括肺癌,乳腺癌,前列腺癌和结肠癌。这些肿瘤细胞起源于上皮细胞,并且表达K18。肿瘤治疗过程中肿瘤细胞发生凋亡,K18被水解后释放到 细胞外和血液中。.相比较而言,其他类型细胞比如淋巴细胞化疗后细胞发生凋亡不会产生K18片段。 Caspase-cleaved CK18 因此成为理想的血液型细胞凋亡标记物。进来研究发现接受不同治疗方案的肿瘤患者,其血清中的caspase-cleaved K18 (ccK18, K18Asp396-NE 或者 M30新表位)有所提高 (Kramer et al., 2004Kramer et al., 2006)。这个提升与临床治疗有关。 (Olofsson et al., 2007Scott et al., 2009Hou et al., 2009).
 
 
肝脏疾病
 
肝细胞表达K18。在涉及细胞凋亡的肝脏疾病比如肝纤维化、肝脏损伤中K18发生水解,导致组织中M30表位暴露 (et al. 2001 Bantel)。患有肝细胞凋亡相关的疾病包括丙肝病毒感染(et al., 2004 Bantel),乙肝病毒感染(Papatheodoridis et al., 2008),非酒精的脂肪肝(NASH)(et al. 2006 Wieckowska),毒剂相关脂肪肝(NASH)(Cave et al., 2010),胆道炎症和严重胆汁郁结 (Yagmur et al., 2007)的患者,其血液循环中可溶性caspase-cleaved K18-Asp396片段升高。 
 
 
其他运用
 
由细胞凋亡引起细胞死亡的其他疾病。检测caspase-cleaved K18 片段证实可用于严重白血病患者的早期预测(et al., 2009 Hofer).
 M30 Apoptosense® ELISA 可用于监测器官移植的病人(et al., 2007 Luft) ,也可用于肝脏移植期间caspase抑制剂的临床实验 (et al., 2007 Baskin‑Bey).
产品信息
M30-Apoptosense®ELISA kit (CE-Mark)       
在体内外实验中定量检测上皮细胞的凋亡。使用血浆样品,可以特异性定量检测小鼠模型中人的异种移植物的凋亡情况。

特异性
样品类型 含有从凋亡上皮细胞中释放的CK18的血清或者血浆(EDTA,citrate,heparin   plasma);含有CK18阳性的凋亡细胞或者组织的细胞裂解液或者上清
灵敏度 25U/L, Standard A (0U/L)+ 2 S.D.
范围 75-1,000 U/L
检测目标物 可溶性caspase酶解的CK18
 

更多运用案例
 
 

产品编号 产品名称 产品规格
10011 M30 Apoptosense ®  ELISA
细胞凋亡M30 Apoptosense ® ELISA试剂盒
96 wells


SuperSep Phos-tag™ 预制胶(蛋白磷酸化研究) [2017-2-21]
  

蛋白磷酸化研究的预制胶新品速递图wako.jpg

SuperSep Phos-tag™

SuperSep Phos-tag™是研究蛋白磷酸化的方法,无需特异性磷酸化抗体或者同位素标记。

SuperSep Phos-tag™


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Phos-tag™是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phostag™ Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中心凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的带条结果也很整齐。

磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白作为不同条带分离。

分离后,胶可用于考马斯亮蓝染色,免疫印迹和质谱实验。

Phos-tag™ SDS-PAGE 的原理

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在HighWire Search 上搜索到的论文数

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运用

利用p35的丙氨酸突变体确定Cdk5 激活p35的磷酸化位点

p35常见的磷酸化位点是Ser8和Thr138。但是Ser8和Thr138位点往往会发生丙氨酸突变,产生3种突变体(Ser8突变体:S8A,Thr138突变体:T138A,Ser8和Thr138双突变体:2A)。这3种突变体、野生型p35、Cdk5和没有激酶活性的Cdk5都来源于COS-7细胞。这些细胞裂解液用Phos-tag™ SDS-PAGE和Western blotting 进行检测(检测抗体:p35抗体)。

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100 μM Phos-tag ™ 丙烯酰胺, 7.5% 聚丙烯酰胺凝胶

可明确磷酸化位点和条带迁移率的关系!

- 泳道1(条带L2和L4)和泳道5(条带M1):p35在Cdk5的作用下发生了磷酸化;

- 泳道1(条带L2和L4)和泳道3(条带L2和L4):在无激酶活性Cdk5的作用下,大约有一半p35蛋白在Thr138位点

发生磷酸化,同样在138位发生突变的p35蛋白亦是如此。

泳道5 (条带M1)和泳道6(条带L3和L4):Ser8和Thr138是主要的磷酸化位点;

- 泳道5(条带M1)、泳道7(条带L1和L2)和泳道8(条带M2):条带M1是Ser8和Thr138都发生磷酸化的条带;

条带M2是只有Ser8磷酸化的条带;条带L1和L2是只有Thr138磷酸化的条带。

※ 条带L1和L3中的X 是不确定哪个位点发生磷酸化的条带;

※ 条带L4是非磷酸化的p35。

【参考文献】

▪ Quantitative Measurement of in Vivo Phosphorylation States of Cdk5 Activator p35 by Phos-tag ™ SDS-PAGE. T. Hosokawa, T. Saito, A. Asada, K. Fukunaga, and S. Hisanaga,Mol. Cell. Proteomics, Jun 2010;9: 1133 - 1143.

【结果提供】

理化学研究所 脑科学综合研究中心 回路功能研究核心 记忆功能研究团队 细川智永(Dr. T. Hosokawa)

首都大学东京 理工学研究科 生命科学专业 神经分子功能研究室 久永真市(Dr. S. Hisanaga)

检测含有Dnmt1磷酸化激酶的片段

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我们可以确定在片段中含有目的激酶!

① 采用亲和色谱法从鼠脑提取液中纯化GST-Dnmt1(1-290)结合蛋白

② 使用0.3 M 和1 M NaCl 的DNA 纤维素柱洗脱得到目的蛋白

③ GST-Dnmt1(1-290)作为体外激酶实验的反应底物

④ Phos-tag ™ SDS-PAGE 用于Western blotting,确定迁移条带中每个片段的激酶活性

【参考文献】

▪ The DNA-binding activity of mouse DNA methyltransferase 1 is regulated by phosphorylation with casein kinase 1delta/epsilon. Y. Sugiyama, N. Hatano, N. Sueyoshi, I. Suetake, S. Tajima, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, and I. Kameshita, Biochem. J.,

【结果提供】

高知大学 综合研究中心 生命、功能物质部门 实验实习机器设施 杉山康宪(Dr. Y. Sugiyama)

香川大学 农学部 应用生物科学科 动物功能生化学研究室 龟下勇(Dr. I. Kameshita)

二维电泳中的应用:分析hnRNP K磷酸化异构体

小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后,裂解细胞,经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中,一维是IPG 胶,二维是Phos-tag ™ SDS-PAGE,可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪,可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。

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同一个等电点的位置上,不同位点发生磷酸化都可以被区分开来

(例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7)

【参考文献】

▪ Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics, Nov 2010; 10(21): 3884-95.

【结果提供】

横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)

理化学研究所RCAI 小原收

备注

样品制备:

Phos-tag SDS-PAGE对于蛋白样品中的杂质非常敏感,尤其是螯合剂,钒酸,无机盐,表面活性剂这类物质。

强烈建议在Phos-tag SDS-PAGE之前通过TCA沉淀或渗析法降低杂质含量。

转膜前处理:

另一个必须的步骤是在转膜前,用EDTA去除凝胶中的金属离子(Mn2+或者Zn2+);

该步骤可提高蛋白的转膜效率。

● 分别准备10 mmol/L 含EDTA和不含EDTA 两种1x transfer buffer。

● 将凝胶浸泡在含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,至少20分钟,温和摇晃。更换新缓冲液,重复3次。

● 将凝胶浸泡在不含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,10分钟,温和摇晃。

● 转膜操作*。

* 建议用湿法转膜,以提高转膜效率。

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质量控制

每一批SuperSep Phos-tag™,出厂前均根据其产品规格进行测试,以保证可分离磷酸化和非磷酸化蛋白,以及他们的分离成都在正常参数内。

◆产品信息

用于Bio-Rad伯乐电泳仪

货号

品名

电泳仪

规格

198-17981

SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well,

83×100×3.9mm

Mini-PROTEAN® 

Tetra Cell

(Bio-Rad Laboratories, Inc.)

5 块

195-17991

SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well,

83×100×3.9mm

5 块

用于Life Technologies电泳仪

货号

品名

电泳仪

规格

192-18001

SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well,

100×100×6.6mm

XCell SureLock® 

Mini-Cell

(Life Technologies, Inc.)

5 块

199-18011

SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well,

100×100×6.6mm

5 块

产品编号

产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag™  (50 μmol/L), 10%, 13 well 
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 17 well 
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 13 well 
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well 
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13 well 
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 17 well 
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 13 well 
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 17 well 
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm 
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm 
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm 
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm 
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块



Lysyl Endopeptidase 质谱级赖氨酰肽链内切酶 [2017-2-20]
  

质谱级赖氨酰肽链内切酶新品速递图wako.jpg

Lysyl Endopeptidase


本产品是质谱分析前处理时最常用的蛋白分解酶即赖氨酰肽链内切酶,该酶可以特异性切除赖氨酸基团 C 末端 的多肽,可用于蛋白测序分析和 Lys-X 化合物的酶合成。若同时使用赖氨酰肽链内切酶和胰酶,可更好地切断赖氨酸 基团的多肽,增加多肽的数量。产品已按照使用习惯做成小包装,是方便使用的冷冻干燥品。

来源:细菌

外观:冻干粉(包含2 mmol/L Tris-HCl缓冲液,pH 8)

活性:0.03~0.07AU/vial

分子量:27,000(琼脂糖过滤),30,000(SDS-PAGE)

溶解性:溶于水或缓冲液

稳定性:溶解于pH值5.0-12.0的Tris缓冲液中,可在4℃稳定保存2年;在pH值6.0-11.0 30℃时能稳定保存,但温度超过50℃时不稳定。

最适pH值:9.0~9.5

等电点:6.9~7.0 


底物特异性:

可水解底物——Tos-Lys-OMe,Bz-Lys-NH2,Bz-Lys-pNA,Lys-pNA

不可水解底物——Bz-Arg-NH2,Bz-Arg-pNA,Arg-pNA

抑制剂:DFP,PMSF,TLCK

特点

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●  高特异性、高蛋白质消化率、适用于蛋白质谱分析

  提高裂解效率、增加肽段数量

  根据使用量特意制备小包装,方便使用





应用

  分别采用胰蛋白酶(Tp)、赖氨酰肽链内切酶(Lep) 和Tp 与Lep联用进行胶内酶切的效果比较。

牛血清蛋白BSA 的条带(100ng) 通过SDS-PAGE 获得,然后分别用Tp、Lep 和Lep+Tp 进行酶切,再用MALDI-TOFMS 法进行分析。

这些蛋白酶的实验效果见下表。

表 1:Tp、Lep 和 Lep+Tp 的结果对照

这些结果表明 Lep 酶解的错误裂解率最低。Tp 酶解时加入 Lep 后,错误裂解率有所降低,同时,可以鉴定出更多的多肽。


Tp 

Lep 

Lep +Tp

裂解位点

精氨酸和赖氨酸的C端 

赖氨酸的C端 

精氨酸和赖氨酸的C端

错误裂解率

(  错误裂解所占比例  )

多(8%)

很少(0%)

少(3%) 

鉴定出的多肽数量 

17

19

22

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胰蛋白酶 (Tp)( 图 a) 和赖氨酰肽链内切酶 (Lep)+Tp ( 图 b) 酶切后的质谱结果对照图。

Lep+Tp酶切后,可以在m/z=2000时得到吸收峰,而单独的Tp酶切在m/z=2000时没有吸收峰。该结果表明Lep可以提高测序覆盖度。

 

( 数据由大阪医疗中心和妇婴健康研究所Y. Wada博士提供 )

赖氨酰肽链内切酶

赖氨酰肽链内切酶,最初由Masaki 等人从土壤细菌中分离得到。该酶可以特异性剪切赖氨酸残基C 末端和S-氨乙基半胱氨酸残基的肽键,用于蛋白测序和Lys-X 化合物的酶催化合成。该酶稳定性高,在4M 尿素或0.1%SDS 溶液中30℃孵育6小时之后,仍然拥有完整的生物活性。

外观

冻干粉(包含ca. 10% Tris-HCl buffer,pH 8)

活性

见包装

分子量

27,000(凝胶过滤);30,000 (SDS-PAGE)

溶解性

易溶于水或缓冲液

最佳pH

9.0-9.5(酰胺酶的最佳活性pH)

等电点

6.9-7.0

抑制剂

DFP、PMSF、TLCK

来源

细菌

稳定性

溶于pH 值5.0-12.0 的缓冲液中,可于4℃稳定保存。溶于pH 值6.0-11.0 的缓冲液中,可于30℃稳定保存,但是50℃及以上不稳定。

单位定义

一单位酰胺酶(AU) 指在30℃ pH 9.5 时每分钟产生1 μmol 对硝基苯胺所需的酶量。

底物特异性

水解底物:Tos-Lys-Ome、Bz-Lys-NH2、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA

非水解底物:Bz-Arg-NH2、Bz-Arg-pNa、Arg-pNA

125-05061 Lysyl Endopeptidase, MS Grade 
赖氨酰肽链内切酶,MS级
20μg x 5 质谱级
125-02543 Lysyl Endopeptidase (R) 
赖氨酰肽链内切酶
1vial(2AU) for Biochemistry
129-02541 Lysyl Endopeptidase (R) 
赖氨酰肽链内切酶
1vial(10AU) for Biochemistry
吃鱼请注意组胺中毒——显色法检测组胺试剂盒 [2017-2-6]
  

吃鱼请注意组胺中毒

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鱼类含有大量营养物质,经常吃鱼对人的身体健康有很大好处。但是,夏季高温天气,食物容易变质,而吃鱼也应注意,否则会引起食物中毒。2015年夏天, 深圳曾发生一起因进食不新鲜的鲐鱼而引起26人食物中毒事件。疾控中心的专家提醒,食用含有一定数量组胺的某些鱼类容易引起过敏性食物中毒,市民应避免食 用不新鲜或腐败变质的鱼类食品。

深圳市一职工食堂有26 人因食用不新鲜的鲐鱼而引起食物中毒。病人主要的临床表现为脸红、头晕、头痛、心跳加快、脉搏快,部分病人出现胸闷症状。深圳疾控中心营养与食品卫生科主 任黄薇介绍,这些病人是吃了不新鲜的鲐鱼而引起了组胺中毒。黄主任介绍,海产鱼类中的青皮红肉鱼,如鲐鱼、金枪鱼、鲣鱼、秋刀鱼、鲭鱼体内组氨酸含量较高,当这类鱼贮存不当、鱼不新鲜时,组胺积蓄到一定量,进食后会导致过敏性中毒的发生。

组胺是如何产生

在海产品的运输过程中,如果储运卫生条件不良,污染并繁殖了组胺酸脱羧酶作用强的细菌,这时鱼体中的组胺酸脱去羧基就会形成大量的组胺。

 

组胺中毒的症状

人摄食组胺量达100mg以上时,会出现中毒症状,如酒醉貌、颜面,躯干四肢潮红、头痛、头晕、心跳、呼吸加快、呕吐、荨麻疹以及支气管哮喘等。

 

组胺中毒的预防措施

1.买鱼时要认真挑选,对青皮红肉的鱼要注意其鲜度,鲜度不佳就不要购买。

2.食用易产生组胺的鱼时,烹调前水浸4~6小时,用30%食盐水浸泡1小时。

3.体弱、过敏体质及患慢性支气管炎、哮喘、心脏病、低血压的人食用高组胺鱼类尤应注意。

4.死甲鱼、死鳝鱼不能吃。甲鱼、鳝鱼含有大量的组胺酸,一旦死后,体内就会逐渐分解形成组胺。

 

如何检测生鱼组胺

龟甲万(Kikkoman)的显色法检测组胺试剂盒,步骤简单,操作1小时即可得到结果,性价比高。

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组胺提取简便:用提取溶液稀释后加热即可提取组胺。

测定操作简便:检测液和试剂混合15分钟后即可测定。

 

 

◆特点

● 简单: 前处理操作简单,可以省略荧光光谱法和高效液相色谱法那样测定障碍物质复杂的前处理操作。由于酶的特异性高,无需使用强酸或有机溶剂,任何对象均可简单、安全地分析

● 迅速: 利用具有高组胺特异性的组胺脱氢酶的酶法来检测。如果是生鱼,检测和提取过程仅需要1个小时即可得到结果。

● 廉价: 用廉价的试剂和检测器就可检测,免除了仪器成本。

 

◆测定原理

组胺含有1-Methoxy PMS的情况下,添加组胺脱氢酶会被特异性分解。此时因产生的电子转移会通过四唑盐显色,便可以在470nm上下测量吸光度,计算组胺浓度。

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◆检测条件

检测下限:0.8ppm

(生鱼样本稀释25倍,因此检测下限为20ppm)

反应时间:反应时间 15分钟

操作时间:1小时

 

◆试剂盒内容

产品编号:308-16121  60次(2-8℃保存)

酶溶液  ——6瓶

显色试剂——6瓶

标准溶液——1瓶

缓冲溶液——3瓶

 

◆操作程序

[1]匀浆液制备

[2]提取

[3]过滤

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将鱼肉剁碎。选取1g碎鱼肉,添加24mL提取用溶液(0.1MEDTA),搅拌均匀。

(试剂盒中不含有提取用溶液)

沸水浴20分钟加热处理。然后用冷水等冷却。

滤纸过滤

[4]试剂准备

[5]反应

[6]测定

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图片8.jpg

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显色试剂用蒸馏水溶解,酶溶液用缓冲溶液溶解。

将检测液以及各种试剂向试管中分别注入0.5mL,遮光37℃,

加热15分钟。

各试管的反应液在470nm处检测吸光度,通过计算公式求得组胺浓度。

注意:●测定仪器请使用分光光度计(可检测到470nm左右) 。  

 

◆产品获奖情况

2007年日本水产学会的水产技术奖

2014年日本酱油协会的日本酱油技术奖(应用部门)

 

产品详情请点击:http://www.boppard.cn/product/show/907.html

部分来源:健康卫视乌兰察布、大众健康宝典

Cosmo 可逆热凝胶限时优惠-3D细胞培养 [2016-7-20]
  

温敏性水凝胶 Mebiol® Gel促销活动



  【活动编号:   MEBIOLGEL_TRIAL】

  【活动有效期:2016/7/18至2016/12/31】


  Mebiol® Gel,可用于3D细胞培养和其他领域;PNIPAAm-PEG;聚N-异丙基丙烯酰胺和聚乙二醇的嵌段共聚物。

 

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◆特点

 

 ● 易于操作

 ● 无毒性,生物相容性好

 ● 100%合成,无病原体

 ● 透明度高,利于细胞观察

 ● 性能完善



◆应用


 ● 干细胞和多能干细胞培养,增殖和分化

 ● 3D细胞培养

 ● 细胞移植

 ● 器官和组织再生

 ● 药物传递

 ● 非细胞培养应用



◆案例



1. Mebiol® Gel中培养原发性肿瘤细胞


  选取人肿瘤组织中的原发性肿瘤细胞进行培养该技术能够鉴定来自患者的原发性肿瘤细胞的表征,因此可根据其主要细胞化学敏感性,恶性肿瘤,转移酶活性和其 它参数对患者的治疗进行评估。在胶原或者3D凝胶中培养原发性肿瘤细胞,纤维细胞的过度生长可能对其产生抑制作用。而成纤维细胞在Mebiol® Gel中不容易增殖,因此能选择性增殖原代肿瘤细胞,以便后续进一步分析鉴别。

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图 1:人体癌变结肠组织Mebiol® Gel培养10天。

(提供者:Dr. S. Kubota, Dept. of General Surgery, St.Marianna University School of Medicine)

 

  人结肠癌组织在Mebiol® Gel培养10天。只有原发性肿瘤细胞中Mebiol® Gel中增殖。

  成纤维细胞在Mebiol® Gel中生长受到抑制,而在胶原蛋白和其它许多3D凝胶培养基质中,长满成纤维细胞,阻止癌细胞的增殖。

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图 2:细胞生长曲线


2. 干细胞培养


  猕猴胚胎干细胞用不含LIF的Mebiol® Gel培养(右图),和2D饲养层培养(左图)相比,发现形态学和碱性磷酸酶染色均未分化。

 

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 图 3

左图:2D 饲养层培养。

右图:不含LIF的3D Mebiol® Gel培养(7天)。

提供者:Dr. K. Hishikawa, Dept of Clinical Renal Regeneration, University of Tokyo.

 

  猕猴(灵长类)胚胎干细胞在Mebiol® Gel 培养,碱性磷酸酶染色表现强阳性,表明未分化。

  图4.png

图 4

左图:2D 饲养层培养。

右图:不含LF的3D Mebiol® Gel培养(5天)。


3. 体干细胞的选择性分离培养(小鼠胚胎皮肤源)


  Epithelial Stem Cells from Dermis by a Three-dimensional Culture System” Journal of Cellular Biochemistry, 98 (1), 174-184 (2006).

 

4. 体外3-D软骨细胞培养再生软骨组织


  Chondrocytes Containing Growth Factors in a Novel Thermoreversible Gelation Polymer Scaffold” Tissue Engineering, 12 (5), 1237-1245 (2006).

 

5. 体外3-D培养人细胞间质干细胞(hMSC)进行骨诱导


  “Gene expression profile of human mesenchymal stem cells during osteogenesis in three-dimensional thermoreversible gelation polymer” Biochem. Biophys. Res. Commun., 317, 1103-1107 (2004).

 

6. 人类肝细胞3-D培养生产丙型肝炎病毒(HCV)


  “Production of infectious hepatitis C virus particles in three-dimensional cultures of the cell line carrying the genome-length dicistronic viral RNA of genotype 1b“ Virology, 351 (2), 381-392 (2006).

 

7. 通过局部加热进行通道控制(芯片细胞分选系统)


  “On-Chip Cell Sorting System Using Laser-Induced Heating of a Thermoreversible Gelation Polymer to Control Flow”, Y. Shirasaki, J. Tanaka, H. Makazu, K. Tashiro, S. Shoji, S. Tsukita, T. Funatsu,Anal. Chem., 78, 695-701 (2006).


 

货号

名称

规格

目录价

活动价

MBG-PMW20-1001

Mebiol® Gel

1*10ml

5,500

3,300

 

 


肥胖、糖尿病、垂体激素、过敏及免疫相关因子免疫检测试剂-Shibayagi [2016-7-7]
   

日本 Shibayagi成立于1977年,从事抗体和免疫试剂盒的生产,是日本著名的内分泌研究公司,提供肥胖、糖尿病、垂体激素、过敏及免疫相关因子免疫检测试剂,用于以科学家为基础的研究领域,为客户提供满意和难忘的的服务,在全球业界享有盛誉。
Apo B-48为其特有专利产品。

和光编号

生产商编号

产品名称

中文名称

包装

634-01481

AKRIN-011T  

Mouse Insulin ELISA Kit(Ttype)

小鼠胰岛素 ELISA试剂盒(T型)

96 tests

639-23911

AKRIN-011RU  

Mouse Insulin ELISA Kit(RTU)

小鼠胰岛素 ELISA试剂盒(RTU

96 tests

630-10371

AKRIN-011H  

Mouse Insulin ELISA Kit(H-type)

小鼠胰岛素 ELISA试剂盒(H型)

96 tests

637-01471

AKRIN-010T  

Rat Insulin ELISA Kit(T-type)

大鼠胰岛素 ELISA试剂盒(T型)

96 tests

636-24141

AKRIN-010RU  

Rat Insulin ELISA Kit(RTU)

大鼠胰岛素 ELISA试剂盒(RTU

96 tests

633-10621

AKRIN-010H  

Rat Insulin ELISA Kit(H-type)

大鼠胰岛素 ELISA试剂盒(H型)

96 tests

633-01451

AKRIN-012T  

Dog Insulin ELISA Kit

狗胰岛素 ELISA试剂盒

96 tests

630-01461

AKRIN-013T  

Pig Insulin ELISA Kit

猪胰岛素 ELISA试剂盒

96 tests

634-13071

AKMAN-011  

Mouse/Rat HMW Adiponectin ELISA Kit

小鼠/大鼠 人高分子量脂联素 ELISA试剂盒

96 tests

633-15121

AKMGP-011  

GLP-1(Active)  ELISA Kit

胰高血糖素样肽-1GLP-1)(活性) ELISA试剂盒

96 tests

631-07231

AKRCP-031  

Mouse C-peptide ELISA kit (U-type)

小鼠 C- ELISA试剂盒(U型)

96 tests

639-07271

AKRCP-030  

Rat C-peptide ELISA kit (U-type)

大鼠 C- ELISA试剂盒(U型)

96 tests

637-10381

AKRLP-011  

Mouse Leptin ELISA kit

小鼠瘦素 ELISA试剂盒

96 tests

634-04301

AKRAL-121  

Mouse Albumin ELISA kit

小鼠白蛋白 ELISA试剂盒

96 tests

631-04311

AKRAL-120  

Rat Albumin ELISA kit

大鼠白蛋白 ELISA试剂盒

96 tests

631-07091

AKRBS-018  

Bovine Albumin ELISA kit

牛白蛋白 ELISA试剂盒

96 tests

638-25561

AKRAL-021S  

Mouse Urinary Albumin Assay Kit(S-type)TIA

小鼠尿白蛋白检测试剂盒(S型)TIA(含量)

60 tests

634-25301

AKRAL-020S  

Rat Urinariy Albumin Assay Kit(S-type)TIA

大鼠尿白蛋白检测试剂盒(S型)TIA(含量)

60 tests

635-13741

AKRGH-010 

Rat GH ELISA Kit

大鼠生长激素(GH ELISA试剂盒

96 tests

636-23921

AKRLH-010S  

Rat LH ELISA Kit(S-type)

大鼠促黄体生成素(LHELISA试剂盒(S型)

96 tests

639-02891

AKRIE-010  

Mouse IgE ELISA Kit

小鼠免疫球蛋白EIgE ELISA试剂盒

96 tests

632-04341

AKRIE-011  

Rat IgE ELISA Kit

大鼠免疫球蛋白EIgEELISA试剂盒

96 tests

639-07651

AKRIE-030  

Mouse OVA-IgE ELISA Kit

小鼠梁清蛋白特异性免疫球蛋白E(OVA-IgE) ELISA试剂盒

96 tests

636-07661

AKRIE-040  

Mouse OVA-IgG1 ELISA Kit

小鼠卵清蛋白特异性免疫球蛋白G1(OVA-IgG1) ELISA试剂盒

96 tests

639-13761

AKRKM-010  

KLH(TDAR) Rat-IgM ELISA Kit

血蓝蛋白(KLH)T细胞依赖性抗原)大鼠免疫球蛋白M(IgM) ELISA试剂盒

96 tests

632-13751

AKRKG-010  

KLH(TDAR) Rat-IgG ELISA Kit

血蓝蛋白(KLH)T细胞依赖性抗原)大鼠免疫球蛋白G(IgG) ELISA试剂盒

96 tests

633-02671

AKRRG-101  

Mouse IgG Rheumatoid Factor ELISA Kit

小鼠免疫球蛋白GIgG)类风湿因子 ELISA试剂盒

96 tests

630-02681

AKRRG-111  

Mouse IgM Rheumatoid Factor ELISA Kit

小鼠免疫球蛋白MIgM)类风湿因子 ELISA试剂盒

96 tests

637-02691

AKRDD-061  

Mouse Anti-dsDNA ELISA Kit

小鼠抗双链DNA抗体 ELISA试剂盒

96 tests

633-10643

AKHB48  

Human ApoB-48 ELISA Kit

人血清载脂蛋白B-48ApoB-48ELISA试剂盒

96 tests

622-04909

AKRB48

Rabbit ApoB-48 ELISA Kit

兔血清载脂蛋白B-48ApoB-48ELISA试剂盒

96 tests

ES细胞・iPS细胞培养用血清代替品 [2016-5-18]

 
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