简化小量提质粒第一步----直接在Eppendorf管中培养细菌[创新技巧]

【字体: 时间:2000年10月09日 来源:

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简化小量提质粒第一步----直接在Eppendorf管中培养细菌

    连接产物转化后往往需要从多个克隆中少量提质粒进行鉴定,以前在实验中往往要用玻璃试管培养2-3毫升菌液,再转移到Eppendorf管中离心收菌准备提质粒。这个过程需要用到多个枪头反复吸液,事前要消毒大量试管,事后还要洗试管,相当麻烦。如果能用Eppendorf管加LB直接培养菌液就会方便得多,只是由于盖子不透气而无法实现。

    如今Eppendorf新推出一种带有透气膜的盖子,膜是孔径0.2微米的聚丙烯膜,透气隔菌,可消毒,用时仅需加LB到Eppendorf管中、接种、盖上这种透气盖(管上连着的原来的盖子不动),放入摇床快摇过夜,收菌时直接离心即可。收菌后只要拔掉透气盖,去掉上清,即可开始提质粒并可以在后继步骤中盖上原来的盖子。需要特别指出的是在快摇的过程中沾在盖子上的菌液不会影响盖子的透气性(膜是疏水膜),但是过夜培养物的体积会减少(37度16小时快摇会减少将近5分之1的液体体积)。这种新技术的优点在于:可以准确的定量培养基体积;不会出现交叉污染;无须玻璃或塑料试管等浪费;节约且方便好用。实验数据表明,这种快速培养法的细菌生长情况与在标准试管中培养是差不多的。另外这种盖子还可以用于冻干操作中防止管内液体溅出造成样品损失或者样品污染环境。

    这虽然只是一个小小的改变,却是前进的一步,会给大家带来方便。

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