ScanArray系列产品的激光共聚焦的原理[新品推荐]

【字体：大中小】 时间：2000年12月27日 来源：

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ScanArray系列产品的激光共聚焦的原理

微阵列生物芯片的结果检测需要荧光信号的扫描检测系统。利用激光聚焦扫描原理能够最大限度地减低背景本底，极大地提高图像清晰度，保证图像和数据达到最高质量。

微阵列的非常微小，利用激光共聚焦原理可以让光路直接聚焦到样品点表面，有效防止杂质信号产生的背景噪音干扰。利用共聚焦扫描原理消除的杂质信号包括：灰尘荧光，样本背面的污染，固相基质如玻璃的荧光信号，空气中常见的灰尘颗粒(衣服纤维，皮肤，护肤品等)和来自扫描仪光学组件荧光污染。

"共聚焦"概念是指光路(激发和发射)在两个位置上聚焦。在共聚焦扫描仪中，激发光聚焦在样本上而发射光聚焦在针孔上。这一针孔限制仪器在样本表面的聚焦深度从而降低背景信号的强度。如左图所示，激光光束进入系统经过分光镜后通过物镜透镜，聚焦的激光点诱发荧光，发射的荧光信号由物镜透镜收集转换成平行光束，然后再次通过分光镜，再通过一个发射滤光片到达第二个透镜称为"检测透镜"。检测透镜聚焦平行的荧光光束，在焦聚的位置上有一个共聚焦针孔。检测器，PMT，截取通过共聚焦针孔的光。而只有精确聚焦在样本表面的荧光信号才能通过共聚焦针孔，这样就可以过滤掉非特异的荧光信号。

不同扫描分辨率的比较

目前，主要有两种方法对微阵列荧光信号进行扫描和定量分析。一种是利用CCD检测的图像系统，另一种是利用激光共聚焦原理的扫描检测系统。以CCD为基础的图象系统分辨率比较低，一般可以达到30到50µm;而利用激光共聚焦原理的ScanArray系列扫描仪可以达到高达5µm的分辨率，并且可以根据实验需要选择不同的分辨率水平：5µm，10µm，20µm，30µm和50µm.
微阵列点的直径范围通常在25µm到500µm，大多在100µm左右。对100µm的点进行精确的分析就要求检测系统能够将每个微阵列点分割成尽可能多像素。有意义像素越多，在进行荧光信号的定量分析时个点的边缘可以分析的越准确，就越可以与其它非特异性的信号区分开。一般来说，微阵列扫描仪的像素大小或者说空间分辨率不应大于最小的微阵列点直径的1/8到1/10(例如，10µm分辨率检测100µm微阵列点)。高分辨率和共聚焦扫描的优势使ScanArray系统能提供更准确和统计学上有意义的数据。

生物芯片荧光检测扫描系统简介(GSI Lumonics)

美国GSI Lumonics公司开发的新一代生物芯片扫描检测系统，利用其独特设计的专利的激光共聚焦光学系统，通过计算机软件的控制，对生物芯片的荧光杂交信号进行全自动的扫描采集信号，并通过分析软件系统对数据结果进行全自动的定量分析。其系统特点：

专利设计共聚焦扫描光学系统