新型RNase抑制剂[新品推荐]

    RNA酶污染是全体从事RNA相关实验的人员的头号公敌。即使是100度高温或者是高压灭菌也不能完全灭活无孔不入的RNases。因而相关的实验中往往要用到RNA酶抑制剂。最常用的RNA酶抑制剂Human Placental ribonuclease inhibitor（HPRI）是一种蛋白质，可与多种RNA酶（包括RNases A, B, C类）非共价结合成为等摩尔复合物，抑制RNA酶活性。HPRI需要在DTT存在的条件下保持最大活性。包括RNasin, SUPERase.in, RIP等几个知名品牌的RNA酶抑制剂都属于这个类型。

    Prime RNase Inhibitor是一种全新的非人源的RNase抑制剂，和HPRI一样，能够非共价结合并抑制RNases A, B, C类的RNA酶活性而不影响RNases T1, T2, H, U1, U2和 CL3的活性，因而不会干扰cDNA合成，SP6/T7， Hela细胞提取物系统的RNA体外转录，以及在兔网织红细胞裂解液或者是麦胚提取物中进行的体外翻译。

应用范围：

• 体外转录

• 体外翻译

• 第一和第二链cDNA合成

• 在非变性条件下纯化RNA和mRNA，

• RT-PCR，特别是单细胞RNA的RT-PCR

• RNA结合蛋白的分离

• gel retardation assays

• nuclear run-on transcription assays

• polysome distribution analysis

优点：

• 比HPRI更高效率的抑制RNase活性，一个单位的Prime RNase Inhibitor可以抑制5ng RNase 90%以上的活性，而同样情况下HPRI只能抑制50%的活性。

• 完全不需要加入DTT以维持最高活性。在更宽的pH值范围，更宽的DTT浓度范围和温度范围保持稳定

• 可用于非变性条件的RNA纯化过程，例如可用于带有1%Nonidet溶液的RNA抽提试剂，或者是单细胞RNA纯化和RT-PCR

• 在变性条件下不会释放出已经结合的RNase。

    实际上在没有DTT的条件下Prime RNase Inhibitor的活性更高，而在20mM DTT下Prime RNase Inhibitor仍然有90%以上的活性。由于Prime RNase Inhibitor是一种蛋白质，所以应该保存于-20度，在-70度条件下会导致蛋白变性。

FAQ：
已经加入Prime RNase Inhibitor后的RNA样品应该如何保存？
A：应该在-20度保存。

Prime RNase Inhibitor成分是什么？是否HPRI/或者RNasin Ribonuclease Inhibitor的另一版本？
A：是一种非人源蛋白。由于商业秘密不能透露。但是是完全不同类型的另一种蛋白。并非重组蛋白。

Prime RNase Inhibitor是否适用于病毒RNA的RT-PCR？
A：当然适合

Prime RNase Inhibitor是否适合于原来可以用HPRI（Human Placental RNase）的实验？
A： 实验表明Prime RNase Inhibitor适合于所有可以用HPRI的实验，而且效果更好。

Prime RNase Inhibitor保存期有多长？应该如何保存？
A：正常情况下至少可保存12个月，应该在-20度保存而不能在-70度条件保存。

Prime RNase Inhibitor并不能一直所有的RNA酶，它只对RNase A，B，C有显著的抑制效果，和HPRI一样的。

当抽提得到RNA后需要进行后继实验（例如蛋白质研究），什么时候加Prime RNase Inhibitor是最适合的？
A：在抽提RNA后应该将样品分装保存在-80度，当准备开始后继实验时，将RNA样品取出解冻完全后再加入Prime RNase Inhibitor。

Prime RNase Inhibitor是否抑制RNase H活性？
A：不，Prime RNase Inhibitor只抑制RNase A B C而不会抑制RNase H（RNase H专门降解RNA和DNA的杂交链中的RNA分子），因此有Prime RNase Inhibitor的存在不会影响cDNA合成反应，可以用于cDNA合成反应。

Prime RNase Inhibitor是否需要加入DTT以激活抑制剂？
A：不需要，在没有DTT的条件下Prime RNase Inhibitor的抑制活性最高。

Prime RNase Inhibitor是否可用于带有异硫氰酸胍的RNA抽提试剂？
A：不可以，由于Prime RNase Inhibitor是一种蛋白质，在这个条件下会变性。不过不同于HPRI，Prime RNase Inhibitor在这个条件下不会释放出原来已经抑制的RNase。

Prime RNase Inhibitor是否可用于带有1%Nonidet溶液的RNA抽提试剂？
A：完全可以

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