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回收蛋白条带/Western用的PAGE胶新型染色液:更灵敏方便
【字体: 】  www.ebiotrade.com  时间:2003年10月30日    来源:
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摘要:

SeeBand solution——蛋白质PAGE凝胶电泳新型染色液

    分子克隆一书中提供了用于蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)染色的考马斯亮兰染色液的配方。由于配方中含有大量的甲醇和乙酸,在染色过程中会将蛋白固定于PAGE凝胶上,因而会影响蛋白质的洗脱,转移,因而在需要在蛋白质电泳后进行转移(如Western Blot)或者是蛋白质条带电洗脱回收的实验中往往不宜采用这个配方进行染色。这个配方染色后,需要经过长时间的脱色才能看到电泳结果——经过24小时充分脱色后的的检测灵敏度在0.1ug左右,不过由于我们在实验室中常常没有这个耐性而缩短染色特别是脱色时间,使得检测灵敏度达不到这个程度。

    SeeBand蛋白质染色液是经过改良配方,用小于1%浓度的三氯乙酸代替高浓度的乙酸,甲醇的浓度还不到1%,因而在染色过程中不会有变性物质影响蛋白质活性,也不会将蛋白固定在PAGE胶上,因此电洗脱回收蛋白质条带时可以得到很高的回收率,也不会影响Western Blot转膜及后继实验。SeeBand蛋白质染色液特别适合对蛋白质PAGE胶染色而不希望将蛋白固定在凝胶上的实验。SeeBand蛋白质染色液的检测灵敏度很高,可以检测10ng/条带的蛋白质,而且在染色过程中由于背景颜色很浅,可以随时看到染色的进度,不需要用缓冲液反复冲洗脱色——如果用水冲洗能得到透明无色背景从而进一步提高检测灵敏度。

应用:

  • 需要在蛋白质电泳后用电洗脱回收蛋白质条带的PAGE胶染色,可以得到很高的回收率

  • 在进行Western Blot转膜前对PAGE胶进行染色

  • 对需要保持活性的蛋白质进行染色

  • 2D电泳胶进行染色

灵敏度:20ng蛋白/条带

Product SizeSeeBand solution 500mlFor 25 Mini gels(10x10cm) or 50 Mini gel(5x10cm) 
CatalogSB010 (点击定购) 331.00 

Staining of 2D gel: comparison between staining with SeeBand FORTE (Cat # SB020) or SeeBand (Cat # SB010) to staining with Coomassie Blue

Staining sensitivity level with SeeBand FORTE (Cat # SB020) or SeeBand (Cat # SB010)





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