——通过RNA干扰去除靶标基因的表达

RNA干扰（RNA interference or RNAi）是一个自然存在的以双链RNA为中介降解具有相同序列RNA的机制。与其相关的过程存在于几乎所有已经检验过的真核细胞内。RNAi迅速成为一个研究基因功能、进行药物筛选的日益重要的手段。在哺乳细胞中，须利用短约21碱基的双链RNA（siRNA）来获得对目的基因的特异性干扰。为获得有效、特异性的RNA干扰，siRNA的设计、制造必须尽可能准确无误。

用于siRNA的RNA试剂：
化学合成的siRNA：不需要使用者做准备，但成本高，价格贵，相对不稳定。
转录产生的siRNA：使用原核RNA聚合酶进行试管转录产生，须多步酶反应、提纯。
从长双链RNA经酶切产生的siRNA：以靶标基因的cDNA为模板进行试管转录产生正义及反义RNA，退火，再利用RNaseIII将其切割成短双链RNA。比经转录产生siRNA省时间，但有更大可能引起非特意性RNAi。

用于siRNA的DNA试剂：
通过将DNA分子导入细胞，在细胞内产生siRNA。通常将编码siRNA或具有类似作用的小发卡型RNA（shRNA）的模板DNA克隆到建有真核RNA聚合酶III启动子及终止子的质粒载体上，利用真核RNA聚合酶III在细胞内转录出siRNA或shRNA。这一聚合酶适合产生小RNA，特别是其终止子是4-5个T碱基，在RNA 3’端留下2个U，正好符合siRNA的要求。这一方法需要克隆、质粒筛选、测序。另外，为满足克隆需要，大多数现有质粒载体的设计要求改变聚合酶III启动子或产生的siRNA有多余碱基。克隆过程中的质粒自连接也是一个经常发生的问题。

The most flexible platform for RNAi

LineSilenceTM：

无须克隆、测序，只要求提前准备好靶标基因特异性PCR引物，进行PCR（可以提纯PCR产物），转染细胞——当天即可完成全部实验。
用于PCR的DNA引物价格低廉，使在同一个靶标基因mRNA上实验多点RNAi，或高通量检查多个基因的功能成为可能；PCR产物很易再产生，也可以进一步克隆到质粒、病毒等任何载体上。LineSilenceTM是灵活有效的极佳RNAi技术平台。

pSilenCircleTM：

绿阳公司自行设计构建的RNAi质粒利用特殊酶切，几乎不会产生自连接。使用者可以直接将合成的双链DNA连到质粒上，成功率极高，不需要进行大量质粒筛选或蓝白选择。重要的优势是pSilenCircleTM产生的siRNA或shRNA不带有与靶标mRNA不配对的碱基，从而保证高效性和特异性。

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