| 表2:MP公司的Alexa荧光染料-藻胆蛋白串联标记产品。

用藻胆蛋白串联标记物进行多目标检测
为了更好地发挥Alexa染料的优异性能,结合我们的专门偶联技术,本公司开发出了一系列的Alexa荧光染料-R-藻红蛋白和Alexa荧光染料-异藻青蛋白串联复合物产品。在这些串联复合物中,藻胆蛋白作为荧光供体,与长波长的荧光染料共价连接,后者作为荧光受体,接收前者所发出的荧光。经过精心优化,建立起荧光共振能量转移(FRET)通路,使藻胆蛋白所发出的荧光可以激发Alexa荧光染料发出长波长的荧光。
抗体和细菌亲和素与这些串联复合物偶联后(表2),可以广泛应用于流式细胞仪系统,其优点是信号强、背景低(图3)。这种Alexa荧光染料-R-藻红蛋白串联复合物在单激发光源下选择合适的滤光片可以实现对五种不同靶目标的同时测定(图4);Alexa荧光染料-异藻青蛋白串联复合物可以同时检测三个不同的靶目标。我们的另外一个产品-Zenon抗体标记试剂盒中,有的也包括了藻胆蛋白串标物,详见我们的网站
www.probes.com/zenon
用Zenon抗体标记试剂盒简化多颜色标记过程
我们的Zenon抗体标记试剂盒是一个多用途的产品,可以用于小鼠、兔或人源IgG的标记,标记物可以是荧光染料(如MP公司的Alexa系列)、半抗原或酶类;且操作简单易行(图5)。这项技术在许多方面都可以取代二级检测试剂使用,且大大简化了多种颜色免疫标记过程,这在此前往往需要在同一个操作过程中使用同种亚型的多种抗体,是一个费时、或者说是不切实际的过程。选择与你的一抗相对应的Zenon抗体标记试剂盒,其中包括了所需的荧光染料、生物素或酶标记物;扩展型的选择方式是混合匹配,可以在不同的染料-抗体间自由组合,用于流式细胞仪(图6)或成像分析(图7)实验。
图5,Zenon标记抗体可以在10min内完成。 |


图6,人外周血单核细胞用特异识别CD3、CD4、CD8的抗体分子标记,用淋巴细胞gate进行鉴别。抗CD3抗体为小鼠源的IgG抗体,预先用Zenon Alexa Fluor488小鼠IgG1标记试剂盒进行标记;小鼠源anti-CD4抗体预先用Zenon Alexa Fluro647-R-藻红蛋白小鼠IgG1标记试剂盒进行标记;小鼠源anti-CD8 IgG2α抗体预先用Zenon R-藻红蛋白小鼠IgG2α标记试剂盒进行标记。上图为CD3对CD4、中图为CD3对CD8、下图为CD8对CD4的分离图谱,都显示了很好的分离效果,及预料之中的CD4+和CD8+细胞的完全分离。 |