经济实惠国产品牌：质粒纯化Kit时代[选购宝典]

生物通技术专评：在追赶科研世界前沿的今天，在技术进步一日千里、而且世界各国激烈争夺抢注科研专利成果、疯狂攫取利益的今天，我们怎能仅靠小米和步枪迎接挑战？据说Qiagen当年刚进入中国时一年才卖了5个Kit。随着越来越多研究人员认识到：要争分夺秒早出成果，我们需要快速简便的试剂盒把我们的思想从繁琐费时的手工基础操作中解放出来――有经费有好装备就能比别人更快出成果，越快出多出成果就越有机会获得更多经费，一如美国已经进入这个更好更快的良性循环，所以国内对质粒纯化试剂盒的市场需求不断扩大。我们向来都很擅长模仿和学习别人的先进技术。印象中似乎是华舜最早开始模仿Qiagen，率先走上了自有品牌生产的道路（记错了欢迎电邮生物通指出！）；如今越来越多国产品牌纷纷涌现，价格也越来越经济，Kit逐渐走进了每个实验室――走进Kit时代！

    现在国内已经有好多国产的质粒提取试剂盒品牌，但质量上真正能得到用户认可的并不多。很多人会觉得国产的质粒提取试剂盒在质量上――比如产率、纯度上可能无法与国外的品牌相比，但是胜在价格便宜。而且在大多实验中我们只是要利用纯化质粒进行细菌转化、测序、酶切鉴定等，并不需要有非常高的产率与纯度，在这个时候国产品牌的优势就出来了。

    国产品牌有很多，像我们熟悉的：北京天为时代、杭州维特洁、上海华舜、中鼎生物、上海生工、上海申能博彩等等。像北京天为时代，从2001年注册到现在，仅仅四年的时间就成为国内一线的核酸纯化品牌，并以其扎实的研发功底引起了国际著名核酸纯化品牌Qiagen的注意，将它归为自己的旗下，这也是国产品牌取得注目成绩的证明。天为时代所采用的纯化材料主要是硅胶，其中可以分为离心柱型和硅胶树脂型。采用的方法是传统的碱裂解法，加入溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，然后离心，把上清加入到柱子中进行吸附。离心柱型是采用硅胶膜进行吸附的，用这种方式提取的质粒纯度较高，可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等实验。在这个级别有小提和小提中量供选择。

    利用硅胶树脂就可以进行大量的提取，其原理是采用液相的硅胶树脂进行吸附。硅胶树脂不像硅胶膜那样吸附量取决于膜的厚度，如果膜太厚对过滤就会产生不利影响，它可以根据客户需要加入不同液体量的树脂进行吸附，因此它具有大提规格。同时它的价格比较便宜，同样是小提规格的50次装，它要比离心柱型便宜上60多块钱。不过它的质粒纯度可能就无法与利用硅胶膜得到的质粒纯度相媲美了。

    如果你想转染比较娇贵的细胞，还是推荐你使用采用硅胶膜技术的高纯度和无内毒素系列产品。无内毒素是在裂解细胞的溶液Ⅰ中加入了特制溶液，可最大限度去除杂质蛋白、有机化合物和痕量核酸酶等，利用大提试剂盒，一次最多可以提取800μg的质粒，相当于Maxi的级别。最让北京天为时代觉得自豪的是Qiagen公司曾经拿过他们的产品去进行测评，结果发现同样是硅胶膜技术的试剂盒，天为时代的得率竟然更高！这可以说也是我们的一个民族骄傲吧。

    除了名列前茅的北京天为时代，接下来，我要介绍一个在南方的公司——杭州维特洁生化技术有限公司。它是 V-gene （外商独资公司）在中国大陆投资的全资子公司，是生产核酸纯化与分析试剂盒、细胞培养器材和生物学实验耗材的专业性厂家。他们的质粒提取产品也拥有不错的口碑。

    杭州维特洁主要有四个系列，日常提取系列，超纯提取系列，无内毒素系列和96孔板系列。在利用柱子的试剂盒中都是采用硅胶膜技术，日常提取系列可以提取20μg左右的质粒。比起其它的小提试剂盒，维特洁的特别之处在于它可以提取比较大块头的质粒，如Cosmid、BAC、PAC等。超纯提取加入了多一道过滤步骤，时间可能会长一点，但是质量也会相应提高。

    细菌内毒素由脂多糖（LPS）和蛋白质复合而成，无内毒素系列是在超纯提取系列的基础上结合两次LPS亲和相分离技术去除细菌剩余的LPS。

    我们在大规模测序时所用到的96孔板提取试剂盒维特洁也有这方面的产品，质粒提取后可用于大规模的测序、体外转录、限制性酶切筛选、连接与转化、PCR扩增、Southern杂交和DNA芯片分析。可以说国产品牌也出96孔板的厂家不是很多，能够生产这种高通量需要的产品也是与国际接轨的一种新现象。

    说一千，道一万，其实大多数客户使用国产试剂盒还是因为其价格的原因。进口质粒提取试剂盒由于外汇比率、运费和关税等各种原因，最后我们用户购买的时候价格实在有点难以承受，特别是作为常规大量筛选时。考虑到大家购买国产试剂盒都不过是用于是为了日常筛选重组子、酶切、连接、电泳等分子生物学操作，因此笔者对几个国产品牌的小提普通纯度试剂盒的产率、价格等进行了比较，方便大家进行选择。

品牌	质粒培养液	产率	特征	参考价格
北京天为时代	1-5ml	15-40μg	硅膜离心柱	￥190（50preps）
杭州维特洁	1-4ml	20μg	硅膜	￥210（50preps）
上海华舜	1-5ml	15 ug	吸附柱，离心	￥370（50preps）
中鼎生物	2ml	1-10μg	离心柱法	￥200（50preps）
上海申能博彩	2-5ml	15 ug	硅胶膜	￥160（50preps）

以上价格可能会因地区、时间不同而有所差异

    随着国外大型生物技术公司不断加强对中国市场的重视，中国的本土企业也开始加强对自己产品的研发。虽然目前很多国产品牌的核心技术－－纯化介质还是依赖进口，一些有志者也开始建立起自己的研发机构，也许将来还有我们自己技术专利的产品走向世界呢，所以不要觉得便宜就没好货，订一个试试看。中国人用自己研发的产品不是更好吗？

生物通作者 谢菲 校对 吴青