强大高效的siRNA文库[新品推荐]

     独立的siRNAs可用于研究单个基因的功能，可后基因组时代的今天，研究人员已经不满足于一次“缺失”一个基因这样的研究节奏，功能基因组学更需要能站在全局高度研究多个基因之间关系的工具，siRNAs文库应运而生。如果说基因芯片可以全局高通量地研究缺失某个基因对整个基因组表达产生的影响，那么siRNAs文库则便于同时研究多个基因分别缺失时细胞的变化，从而进行大规模筛选研究基因和功能的关系。

    Silencer® CellReady™ siRNA Libraries可以说是RNAi芯片的雏形----我们在这里可以看到，源自高通量的矩阵芯片概念和RNA干扰结合，使得RNA干扰不再局限于一次一个基因样本沉默的实验，而可以象芯片一样，一次同时进行多基因高通量大规模批量筛选，从而得以站在全局的高度研究不同的基因沉默之间的相互关系！人类基因中特定的某些组，分装在96孔板的siRNA库，形成类似“矩阵”的组合，每孔3pmol，可供一次直接转染使用，终浓度30nmol（Ambion公司siRNA保证有效作用浓度）。同样严谨的，每个基因对应3个不同的siRNA，分别在3块96孔板的同一位置上以便相互参照平衡。每板留有8个空白孔和8个对照孔，用户可以选择多至4个Ambion的对照siRNA（2x4），空白孔留给你做无转染的空白对照或者不加siRNA的负对照。配合高效快速的反向转染技术----先用培养基稀释siRNAs于96孔版，批量加入用培养基稀释的转染试剂于96孔板中，温育形成转染复合物，再批量加入胰酶消化收获的细胞于96孔板中铺板，直接培养24--48小时即可检测。这种技术已经在06年在Nature上有发文章，可以参考生物通相关新闻。多么富有想象力的创新之作！在后基因组时代的今天，在这个全球研究人员不断加速研究各种基因功能以抢夺明日专利的时候，这个雏形的RNAi芯片，再次为我们的研究提速，提速。真的是只怕想不到，不怕做不到。生物通还会在后继的文章中详细介绍这种新技术。

    更惊人之作来自赛默飞世尔旗下的Dharmacon公司。去年业界最大的一宗并购案是热电(Thermo Electric)和飞世尔(Fisher)合并为赛默飞世尔----当今业界最大的公司。旗下Dharmacon公司不愧是RNAi试剂市场上的领头羊之一，率先推出世界上第一个全基因组siRNA文库，靶向基因包含整个人类基因组共计接近22000条基因！毫无疑问，全基因组siRNA文库将大大加速药物的研发并增加科学家对疾病的机理了解。96孔板提供，一次实验就可以分析上百条基因，实现真正意义上的高通量检测。而且保证靶基因沉默效果75％以上！今年4月发表于Nature的一篇文章表明，应用这个全基因组siARRAY®文库中的SMARTpool siRNA文库研究一种肺癌细胞，发现分别沉默其中87个基因后可使肺癌细胞对紫杉醇药物敏感性提高10000倍！也就是说这87个基因中的某一个或者某一组将有可能与肺癌细胞耐受紫杉醇有关，又或者说针对这组基因中的某一个或者某几个的siRNA有可能成为提高肺癌紫杉醇治疗方案的辅助药物。多么令人鼓舞的结果！对于制药业来说可能提供另一种全新的思路----在开发一种新药如此困难和高成本的今天，如果能找到短期提高药物敏感性成千上万倍的siRNA作为原有药物的辅助治疗手段，不也是一种有效的方法吗！如果不是siRNA文库的出现，要得到这样的成果需要花费多少时间和代价，简直难以估计。诚如文章作者怀特博士所说，这种siRNA必将大大加速药物的研发过程，并增进科学家对疾病的机理了解。这种新一代技术研究工具之强大，实在令人惊叹。

人类全基因组siRNA文库筛选虽然效率惊人，但也是相当奢侈的，好在（节选自：生物通ebiotech专刊之《RNAi 5年回顾及技术宝典》）