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中科院院士RNA干扰研究新进展
关键字:RNA干扰|草鱼出血病    www.ebiotrade.com  时间:2007年12月27日17:48    来源:生物通

生物通综合:草鱼出血病是由呼肠弧病毒引起的鱼病。病毒的个体极小,呈颗粒状,须在电子显微镜下才能看清。这种病毒寄生在鱼体组
织细胞中,具有很强的抗药性,所以难以用药物治疗。来自中科院水生生物研究所的研究人员在草鱼出血病病毒的RNA干扰抗病研究方面取得了进展,首次在鱼类中应用RNA干扰技术抑制病毒的复制和感染,展现了RNA干扰技术在鱼类抗病育种中的广阔应用前景。

领导这一研究的是朱作言院士,其早年毕业于北京大学生物系,主要从事遗传发育生物学及生物技术方面的研究。取得了多项具有开创意义的重要成果,为鱼类基因育种奠定了理论基础,发表相关论文100多篇,其中3篇已成为转基因鱼领域公认的经典文献,先后6次获得国家和部级科技成果奖。

该研究组以草鱼出血病病毒(GCRV)外壳蛋白基因VP7为靶基因,选择3个不同的siRNA位点,构建了3个草鱼H1基因启动子驱动的shRNA表达载体pH1siGCRV(X)-CMVeGFP及其对照表达载体pH1shHK-CMVeGFP。

他们进行的草鱼肾细胞(CIK)的感染实验结果显示,pH1shGCRV2-CMVeGFP在细胞水平上具有较强的病毒抑制作用,抑制率达82%。接着,他们以pH1shGCRV2-CMVeGFP和pH1shHK-CMVeGFP为外源基因,采用显微注射方法,获得转基因稀有鮈鲫P0代群体。

3月龄转基因稀有鮈鲫和同龄非转基因组攻毒实验结果显示,非转基因组和转pH1shHK-CMVeGFP组在攻毒后第5天开始出现死亡个体,11天内全部死亡,转pH1shGCRV2-CMVeGFP组在攻毒后第5天开始出现死亡个体,第11天死亡率为20%,病程延长至20天,死亡率稳定在30%;进一步的定量PCR分析结果显示,在病程不同阶段,大部分无症状转pH1shGCRV2-CMVeGFP稀有鮈鲫脾脏、肝脏、后肠、鳃和肌肉的病毒含量远远低于转pH1shHK-CMVeGFP稀有鮈鲫和非转基因稀有鮈鲫,表明GCRV在转基因稀有鮈鲫体内的复制受到有效抑制。

附:
朱作言,男,1941年9月出生,汉族,湖南省澧县人。1965年毕业于北京大学生物系,1980年毕业于中国科学院研究生院。自1965年起,先后在中国科学院水生生物研究所任研究实习员、助理研究员、副研究员、研究员和研究所所长,其中,1980-1983和1998-1994年间分别在英国和美国的大学和研究所进修和工作。1997年当选为中国科学院院士,1998年当选为第三世界科学院院士,2007年被授予英国阿伯丁大学科学博士荣誉学位。现任中科院水生生物研究所研究员,国家自然科学基金委员会副主任,《科学通报》执行主编,中国国际科技合作协会会长,从2000年5月起被聘为北京大学生命科学学院教授。

主要从事遗传发育生物学及生物技术方面的研究。取得了多项具有开创意义的重要成果,为鱼类基因育种奠定了理论基础,发表相关论文100多篇,其中3篇已成为转基因鱼领域公认的经典文献,先后6次获得国家和部级科技成果奖。
 
主要研究方向为发育与分子生物学。主要科研成果∶
  
1. 开创鱼类基因研究的新领域∶
  在合作完成了鲤鱼和鲫鱼之间细胞核移植克隆基础上, 开创鱼类基因研究的新领域, 培育出快速生长2.3至4.3倍的鲤、鲫和泥鳅; 揭示了外源基因整合的动力学过程; 证实其嵌合性整合、表达、以细胞核整合和核外非整合两种方式传递给子代, 提出了转基因鱼形成的模型理论和培育纯合转基因鱼品系对策; 阐明了转GH基因对内源垂体分泌GH的代偿作用, 以及转GH基因鱼饵料利用的蛋白质节省效应和合成代谢的蛋白质积累效应。

2. 克隆了鲤鱼和草鱼的机动蛋白基因(CA)和生长激素基因(gcGH), 构建了“全鱼”转基因表达载体CagcGH; 转CagcGH基因快速生长鲤鱼群体已进入子二代; 评价了转GH基因快速生长鲤鱼生态及食用安全性, 为为转基因鱼育种奠定了实用化基础。现在进行着转基因鱼克隆和纯系培育。

3. 发现了鲤鱼种的DNA分子标记以及鱼类GH基因结构对研究脊椎动物早期演化的特殊意义。

(http://www.ebiotrade.com/)
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