专家解析经典蛋白纯化技术

直击蛋白质组学研究技术全过程

蛋白功能研究新趋势：体外表达产品(上)

因为纯化爱上你:原核表达GE（原安玛西亚）篇

由于细胞破裂会释放出大量的蛋白酶，因此对于我们想要研究的蛋白来说，选择性和有效的抑制这些蛋白酶对于蛋白纯化路线设计来说显得尤为重要。

蛋白酶抑制剂与蛋白酶一样，都是纷繁复杂的，通常使用许多化学物质作为蛋白酶抑制剂，如PMSF 和leupeptin。但是目前一种商业化的“鸡尾酒”蛋白酶抑制剂，只需吸一种溶液或者将一些药片加进蛋白提取溶液中就能帮你实现细胞内抑制蛋白酶的作用。以下是一些常见的蛋白酶抑制剂产品，能有效地抑制一系列物种中的大量细胞内蛋白酶。除了简便之外，由于这些产品经过严格的质量监控，因此想来对于家制的鸡尾酒而言，具有更好的使用重复性，和有效性，让我们在下游应用中得到更洁净和清晰的结果。

Complete Protease Inhibitor Cocktail Tablets
Roche Applied Science 

罗氏公司的这种产品主要用于大规模提取细菌、哺乳动物、酵母细胞、植物细胞中的目的蛋白的时候，抑可以制丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶和金属蛋白酶。这种小药品使用简便，只需将其放进你的缓冲液中即可。这种“鸡尾酒”试剂能在大量的蛋白酶存在的情况下完整的保护蛋白，在动物、植物、酵母、细菌和真菌细胞和组织中提取蛋白时都适用，并且该品毒副作用较少。

ProteCEASE™ Protease Inhibitor Cocktails
G Biosciences

ProteCEASE蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”包含了各种经过浓度优化后的蛋白酶抑制剂，具有良好的抑制广泛物种蛋白纯化中的蛋白酶活性的作用。ProteCEASE已经发展成为大规模制备型，具有50ml和100ml的裂解缓冲液中使用的两种规格。ProteCEASE分含有EDTA型，用于抑制金属蛋白酶（metalloprotease）；和不含有EDTA型，用于维持依赖于二价阳离子的蛋白的活性。EDTA-free ProteCEASE型不会影响使用固相亲和层析的蛋白纯化，这种方便的形式具有强烈的蛋白抑制作用。

AEBSF hydrochloride BioChemica
AppliChem GmbH 

AEBSF通过磺酰化蛋白酶活性中心的一个基团，不可逆地抑制凝血酶thrombin和其他一些丝氨酸蛋白酶（chymotrypsin, kallikrein, plasmin, proteinase K, trypsin）。这种试剂是PMSF和DFP的低毒替代品，具有较高的水溶性，溶液状态的pH为酸性，所以在这种pH下，稳定性较高。
（生物通：亚历）