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高通量和高特异性的超滤法
【字体: 大 中 小 】 时间:2007年04月20日 来源:生物通
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生物通报道:Penn State化学家实验证实,为目的蛋白附上带电染料,能够同时实现超滤的高通量和高特异性。
生物通报道:Penn State化学家实验证实,为目的蛋白附上带电染料,能够同时实现超滤的高通量和高特异性。
超滤被广泛用于制药产业和乳制品生产、污水净化。新纯化过程扩充了超滤的使用范围和分离效果。实验中,研究人员用一种小的、商业化的、带负电荷染料分子标记目的蛋白,当溶液流过带负电荷的超滤膜时,目的蛋白(现在带负电)比不加染料时截留率高。
化学工程教授Andrew Zydney说在传统超滤过程中,滤膜网孔的大小决定分离效果。有研究显示,利用与蛋白带同样电荷的膜能够提高蛋白的截留率。Zydney等的实验证实,向目的蛋白添加带电染料改变蛋白的电荷,能够增强同一孔径滤膜对蛋白的截留率。具体纯化过程刊登于《Biotechnology and Bioengineering》杂志,题目为《Controlling Protein Transport in Ultrafiltration Using Small Charged Ligands》,作者为Suma Rao和Zydney。
验证实验中,研究人员选择BSA(牛血清白蛋白,bovine serum albumin)和蓝色染料Cibacron Blue。他们将天然滤膜和带负电荷滤膜的筛选数据进行对比,发现向8g/L的BSA添加1g/L的Cibacron Blue,溶液流经带负电荷的滤膜时,BSA筛分系数(sieving coefficient)下降了100多倍。
研究人员强调需要建立一个系统,能够在超滤后将蛋白和染料分开,以便染料循环利用。比如,降低Cibacron Blue和BSA溶液的酸性、添加某种盐分会使染料轻易地离开BSA。染料通过超滤收集。
尽管次证明实验用到的蛋白只有一种,研究人员说利用染料与蛋白的结合特异性,增强蛋白的分离效果,将为膜系统提供新的优势。(生物通记者 小粥)