本期冷泉港手册免费提供的目的蛋白、基因检测法

　　

生物通报道：单从形状上很难辨认我们体内数以万计的蛋白，研究特异蛋白的特征和功能以及特异基因的活性，需要依赖化学标记对其显形和进行操作。本月《冷泉港手册》着重介绍了制作和探测特异蛋白的方法和研究胚胎发育过程中特异基因活性特征的方法。其中两种方法免费向读者开放。

方法一介绍了在目的蛋白上添加GST（谷胱甘肽S-转移酶，glutathione-S-transferase）化学标签的方法。主要原理是在表达菌的目的蛋白基因附近添加一段编码通GST标签的DNA序列，随着细菌生长，它们表达的“GST融和蛋白”，会在目的蛋白周围有一个GST标签。利用一个与GST特异结合的化学物质（谷胱甘肽）很快识别出GST融合蛋白。（http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/8/pdb.prot4738）

为了检测胚胎发育过程中特异基因的活性，研究人员设计出能够表达半乳糖苷酶（galactosidase）小鼠，半乳糖苷酶作为目的蛋白的“报告”蛋白。第二种方法介绍对表达牛乳糖蛋白的转基因小鼠的胚胎进行着色的方法，着色后表达牛乳糖的组织会发蓝光，有助于研究胚胎发育过程中目的基因表达的时间和地点。（http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/8/pdb.prot4725）（生物通记者 小粥）