新干细胞培养方法：两种膜的结合 -成体干细胞|角膜|培养-生物通

生物通报道：Clinic大学的研究人员证实，他们设计的一种新的成体干细胞培养方法能够使成体干细胞高效长成角膜干细胞。

眼科专家Ana Fernández Hortelano证实，这种培养技术已经成功用于治疗70只兔子的角膜疾病。该研究的目的是希望能够修复受损的上皮细胞并因此恢复角膜的透明。

这项研究证实了利用来自健康眼睛的角膜干细胞来治疗人的角膜病变是可行的。这项技术目前正在被用于人类患者，并且获得了满意的结果。

这项研究分为两个主要部分。一方面，该研究论文描述了一种新的细胞培养方法的设计，另一方面则证实了这个过程的临床应用价值。

两个阶段的培养

这项研究显示，源于活组织切片样本的新培养技术能够使干细胞的数量增加，从而获得足够用于有效治疗的细胞。细胞样本从健康眼睛的limb（负责角膜透明的眼睛结构）获得。

这种培养方法的重点在于它使获得的细胞保持其特征。这种方法将塑料芯片与一种羊膜芯片结合起来。这种技术的新颖之处集中在使用塑料芯片的第一阶段。从健康眼睛获得的组织片段分割成更小的片段以便于在芯片上培养。

组织片段的数量越多就能获得更多数量的干细胞“晕圈”。然后，将获得的细胞样本送到解剖病理学实验室进行细胞的可用性和治疗鉴定。

证实后，将这些细胞转移到羊膜上继续培养，这种膜很适合培养用于眼睛再生治疗的干细胞移植。

一旦放在羊膜上，这些干细胞以一种均一的方式扩散，从而确保更好的细胞等同性，以便于选择最适合用于治疗的单元。这种方法能够精确地找到用于眼睛细胞移植的细胞群，保证了被移植细胞的质量和数量。（生物通雪花）

附：胚胎干细胞培养标准化操作规程

一般培养--维持ES细胞处于未分化状态
ES细胞培养用含有ESGRO（白血病抑制因子）的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1％明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2－3天从达到80％－90％融合的平板按1：8的比率传代细胞一次，细胞传代以后，在将细胞接种在0.1％明胶包被的培养皿之前，通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时，使分化细胞粘附，从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃，5％CO2，100％湿度条件下培养。