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眼见为实——Novagen共沉淀剂[新品推荐]
【字体: 大 中 小 】 时间:2008年06月18日 来源:生物通
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再也不用担心乙醇沉淀后的核酸会丢失了,粉红色的沉淀,怎么会视而不见?
你是不是也曾有过这样惨痛的经历:辛辛苦苦花了半天时间提的核酸,乙醇沉淀后几乎看不见,凭感觉操作了一番,最后跑胶一看,啥也没有。郁闷地想一想,可能是在移液的时候不小心把沉淀弄丢了。
现在,Novagen公司的两种共沉淀剂可能会对你有所帮助。Pellet Paint共沉淀剂是一种标记了染料的肉眼可见的载体(carrier),专用于核酸的乙醇沉淀。只需在每个反应中加入2 ul,室温放置2分钟即可,不需要低温冷冻,也不需要延长离心时间,就可以帮助核酸顺利沉淀。即使DNA或RNA浓度很低(2 ng/ml),都能有效沉淀,而且因为Pellet Paint是粉红色,所以沉淀很容易看见。这样下面的洗涤步骤就很容易操作,再也不用担心会沉淀会损失了。
某些PCR反应后需要进行产物纯化来去除引物和其他反应物,并浓缩目标DNA。Pellet Paint共沉淀剂也很适合这项操作,而且过程很快速,小于50nt的引物能被有效去除。另外,在后续操作中也很容易判断DNA是否已经完全重悬。
Pellet Paint共沉淀剂与大部分分子生物学操作兼容,且不含有核酸水解酶。尽管它吸收紫外线,但还是可以用分光光度法对DNA或RNA样品进行准确地定量;在定量核酸浓度时,只要用一个校正因子调整吸光度比值即可。
Pellet Paint共沉淀剂的特点:
◇ 方便:室温沉淀,不需要低温冷冻,不需要延长离心时间
◇ 兼容性:与大部分操作兼容,与醋酸钠、氯化钠、醋酸铵兼容,与乙醇和异丙醇沉淀兼容
◇ 可靠:沉淀清晰可见,减少因疏忽而造成的沉淀丢失,改善再现性与灵敏度
◇ 高效:操作过程只需7分钟,小的单链或双链分子及未掺入的寡核苷酸都可以有效去除
Pellet Paint NF共沉淀剂则是一种非荧光染料标记的载体(carrier),与荧光测序兼容。它可以增加沉淀的速度和效率,减少离心的时间,并帮助去除未掺入的BigDye终止子。因为结合了Pellet Paint NF共沉淀剂的核酸沉淀也是可以看见的,所以小的沉淀也不容易丢失,沉淀溶解的过程也清晰可见。
Pellet Paint NF共沉淀剂与ABI的测序试剂盒完全兼容。为避免额外的操作,Pellet Paint NF共沉淀剂可以直接加到反应体系中。它对测序反应或准确性没有影响。在那些需要荧光检测的应用中,Pellet Paint NF共沉淀剂也可以作为Pellet Paint共沉淀剂的替代品。
Pellet Paint NF共沉淀剂的特点:
◇ BigDye测序产物的快速有效沉淀
◇ 染料终止子的高效去除
◇ 可以看见并追踪沉淀物质
◇ 对测序反应没有影响
◇ 在荧光检测应用中可以替代Pellet Paint共沉淀剂
(生物通 余亮)