革命性的慢病毒包装体系[新品推荐]

【字体: 时间:2009年03月17日 来源:Bioyong

编辑推荐:

  操作时间不到1小时; 15cm培养板能够获得1x10^7 ifu的 病毒; 可浓缩病毒10-100倍; 对细胞无毒性…… 这样理想的慢病毒包装系统是什么呢?

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  • 慢病毒包装系统——1
  • Clone-it无酶慢病毒载体构建体系——2
  • MAXifect转染试剂——3
  • PEG-it™病毒浓缩试剂盒——4
  • RNA干扰库——5

载体构建----
穿梭载体有多种启动子、标签、抗性可选,满足各种科研需求----慢病毒载体系统---1
接近100%连接效率的无酶连接系统,仅需2~4小时----Clone-it无酶慢病毒载体构建体系---2

转染细胞----
高回收效率、具有10~100倍浓缩效果的纯化试剂盒,操作时间仅需2小时---- MAXifect转染试剂---3

病毒纯化----
高回收效率的浓缩纯化试剂盒,操作时间仅需2小时----PEG-it™病毒浓缩试剂盒---4

滴度鉴定----
简单、灵敏的滴度鉴定试剂盒,采用RT-QPCR技术

功能应用----
包含人全基因、鼠全基因以及各种pathway RNAi文库---- RNA干扰库---5
iPS系统,提供6个基因的慢病毒
 

1.慢病毒包装系统

SBI为客户提供人源(HIV)和猫源 (FIV)慢病毒载体系统,满足所有人和动物细胞类型的任何序列的表达转染。系统包括三个组分:
(1)慢病毒表达质粒 (即穿梭质粒)
(2)慢病毒包装质粒混合物
(3) 包装细胞系293TN

优势:
高效的转染:包装的病毒系统可侵染最多的细胞类型,包括非分化细胞和难以转染细胞(原代、血、干细胞)或侵染转基因鼠模型。

表达稳定,可遗传:包装基因整合到基因组DNA上,高水平表达,低变异。

不干扰细胞: 细胞功能不受侵染过程影响。

生物安全: 四质粒系统包装最大的安全性;非人源FIV 病毒最大限度降低风险。

高包装效率:病毒包装时采用SBI提供系统质粒转染效率接近100%

无酶连接系统:SBI同时提供了无酶连接载体构建系统,最大限度的克服载体构建过程的困难。

完整的病毒包装体系:SBI提供载体构建、转染、病毒浓缩和纯化、滴度检测等病毒包装产品。最大程度的降低包装繁琐程度,提供包装病毒产品。

穿梭质粒包含三种类型:


 
cDNA载体


 
microRNA载体


shRNA 载体

注:SBI提供各种启动子类型、各种抗性、各种标签的载体。详请来电咨询。


2.Clone-it无酶慢病毒载体构建体系
Clone-it Lentivector Systems

原理
克隆载体提供线性粘性末端。要克隆的插入片段的互补末端很容易通过利用交错延伸PCR或经过传统oligo退火产生。把线性载体和获得的插入片段混合,它们的粘性末端因为序列互补退火在一起,产生带切口的杂交质粒。混合物转入E.coli后,质粒的切口会被细胞内的酶连接上。


 


 
优势:
不需连接酶、重组酶、拓扑异构酶和限制性内切酶。

快速、直接克隆避免重组误差。

接近100%克隆效率

操作时间很短,适合高通量克隆


cDNA克隆体系利用SBI’s Clone-it cDNA vectors系统精准的克隆你的cDNA且不用担心限制酶切位点问题。该系统能够快速克隆小于5kb的任何cDNA。采用高活性的EF1α启动子驱动转录,Kozak元件优化翻译。蛋白表达可以随意的在N段连接HA表位或C段T2A标签。分类和筛选可选RFP报告基因或嘌呤霉素抗性基因。


 
shRNA试剂盒可以直接将短目标oligo片段和预制载体混合快速克隆。利用H1启动子可以获得shRNA高水平表达。阳性表达细胞可通过CMV启动子驱动的GFP报告子、RFP报告子或通过嘌呤霉素抗性筛选验证。你也可以选择EF1启动子启动的RFP标签表达。

 



3.MAXifect转染试剂
MAXifect Transfection Reagent

SBI公司的MAXifect转染试剂是一个操作简单且容易掌握的细胞转染方法。传统的磷酸钙转染法操作繁琐,难于控制,导致转染效率低且重复性差;脂质体转染法则转染效果随细胞类型变化大,对细胞有一定的毒性;为了克服这些困难,SBI创造了MAXifect转染方法。

  • 5分钟完成整个转染过程。
  • 操作极其简便,摆脱了传统的磷酸钙技术操作繁琐且难以控制的缺陷, 
  • 无需孵育操作。
  • 转染效率高,配合SBI系统转染效率接近100%
  • 摆脱了传统磷酸钙技术重复性差的缺陷,重复性很高


 

产品名称

规格

货号

备注

MAXifect Transfection Reagent

50 transfections

BY-LV700A-1

转染次数以10cm培养板为计算单位


4.PEG-it™病毒浓缩试剂盒
PEG-it™ Virus Precipitation Solution

让你的病毒包装简便起来!


操作时间不到1小时
15cm培养板能够获得1x10^7 ifu的 病毒。
可浓缩病毒10-100倍
对细胞无毒性

适用范围:
所有慢病毒、逆转录病毒

主要优点:
操作简单,整个操作流程只需3次离心就可完成,操作时间不超过一个小时。

浓缩效率高,一个15cm培养板能够获得1x10^6 to 1x10^7 ifu的病毒

对所有慢病毒和逆转录病毒颗粒可以浓缩10-100倍

经浓缩纯化的病毒依然稳定,病毒的转染不会受到任何干扰或影响

同超离一样不会积累细胞残片,避免了毒性和免疫反应,对包括ES细胞在内的所有靶细胞无毒

不需特殊的装备,不需超速离心机,降低了昂贵的超离成本。

非常适合于大体积的病毒浓缩-很好的解决了超离方法的容量限制。

提高了细胞转染效率并制备了适于体内转染的超高滴度的病毒。

满足细胞培养中对无菌的要求。

同SBI的LentiMag™ Magnetotransduction Kit试剂盒兼容。


产品规格

产品 规格 货号 浓缩病毒产量
PEG-it Virus Precipitation Solution 100 mL BY-LV810A-1 可浓缩纯化400ml病毒上清,配合SBI慢病毒包装系统可以浓缩2个产量分别为108的慢病毒。
PEG-it Virus Precipitation Solution 250 mL BY-LV825A-1 可浓缩纯化1000ml病毒上清,配合SBI慢病毒包装系统可以浓缩5个产量分别为108的慢病毒。

 

流程示意图


浓缩效果


 

浓缩纯化病毒的转染效果


 
图中显示三种不同的启动子CMV、mOct4和mNang的慢病毒经PEG-it浓缩纯化后侵染H9 hES细胞。



5.RNA干扰库

提供全基因组扫描细胞应答基因或信号转导通路扫描

  • 获得抑制、增强或激发选定表型的潜在药物靶标或诊断标志。
  • 通过常规生长筛选或流程分类发现关键的调控基因。
  • 利用Affymetrix GeneChip®杂交发现功能siRNAs
  • 性价比最好的全基因功能分析
  • shRNA文库猫源或人源慢病毒载体任选
  • 可提供质粒形式文库,用户在自己的实验室大量包装病毒。


 

产品名称

规格

货号

备注

GeneNet Human 50K siRNA Library in pSIF1-H1-Puro

>2x 10^7 IFUs

BY-SI206B-1

人全基因组

GeneNet Mouse 40K siRNA Library in pSIF1-H1-Puro

>2x 10^7 IFUs

BY-SI222B-1

鼠全基因组

GeneNet Human Kinase siRNA Library in pSIH1-H1-Puro

>2x 10^7 IFUs

BY-SI626A-1

Kinase

GeneNet Human Phosphatase siRNA Library in pSIH1-H1-Puro

>2x 10^7 IFUs

BY-SI636A-1

Phosphatase

GeneNet Human Apoptosis siRNA Library in pSIH1-H1-Puro

>2x 10^7 IFUs

BY-SI616A-1

Apoptosis

 



用户使用产品发表文章(部分):
Sooryanarayana Varambally,1,2,3* Qi Cao,1,2*  etc. Genomic Loss of microRNA-101 Leads to Overexpression of Histone Methyltransferase EZH2 in Cancer .Science 322, 1695 (2008);
Parikh H., Carlsson E., Chutkow W. A., etc. TXNIP Regulates Peripheral Glucose Metabolism in Humans. Plos Med. 4 (5): e158, 2007. (PDF) »
Shaftel S. S., Kyrkanides S., Olschowka J. A., Miller J. H., Johnson R. E., and O’Banion M. K. Sustained hippocampal IL-1ß overexpression mediates chronic neuroinflammation and ameliorates Alzheimer plaque pathology. J. Clin. Invest. 117:1595-1604, 2007.
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知名用户:
哈佛药学院Harvard Institute of Medicine
麻省理工学院MIT
美国国立卫生研究院NIH
印度国家病毒研究院National institute of Virology
新加坡国立大学 National University of Singapore

SBI公司
System Biosciences (SBI) 致力于开发独特、革新的技术,为客户研究蛋白组学和基因组学功能提供研究工具。SBI 是专业的慢病毒产品公司,提供基于慢病毒的所有相关产品、质粒、试剂盒及相关配套试剂和慢病毒延伸产品如IPS细胞多功能性诱导试剂盒和RNAi筛选文库。

毅新兴业(北京)科技有限公司是一家集科研服务和产品销售为一体的公司,公司依托强大的技术团队和实验室,联合SBI公司为客户打造简便快捷高性价比的产品和服务。


订购信息:
Email: lenti.bioyong@gmail.com
电话:010-83608397-602
传真:010-83608397
网址:http://www.ebiotrade.com/custon/bioyong/080618/index.htm


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