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革命性的慢病毒包装体系[新品推荐]
【字体: 大 中 小 】 时间:2009年03月17日 来源:Bioyong
编辑推荐:
操作时间不到1小时; 15cm培养板能够获得1x10^7 ifu的 病毒; 可浓缩病毒10-100倍; 对细胞无毒性…… 这样理想的慢病毒包装系统是什么呢?
更多技术资料与手册>> >>
载体构建----
穿梭载体有多种启动子、标签、抗性可选,满足各种科研需求----慢病毒载体系统---1
接近100%连接效率的无酶连接系统,仅需2~4小时----Clone-it无酶慢病毒载体构建体系---2
转染细胞----
高回收效率、具有10~100倍浓缩效果的纯化试剂盒,操作时间仅需2小时---- MAXifect转染试剂---3
病毒纯化----
高回收效率的浓缩纯化试剂盒,操作时间仅需2小时----PEG-it™病毒浓缩试剂盒---4
滴度鉴定----
简单、灵敏的滴度鉴定试剂盒,采用RT-QPCR技术
功能应用----
包含人全基因、鼠全基因以及各种pathway RNAi文库---- RNA干扰库---5
iPS系统,提供6个基因的慢病毒
1.慢病毒包装系统
SBI为客户提供人源(HIV)和猫源 (FIV)慢病毒载体系统,满足所有人和动物细胞类型的任何序列的表达转染。系统包括三个组分:
(1)慢病毒表达质粒 (即穿梭质粒)
(2)慢病毒包装质粒混合物
(3) 包装细胞系293TN
优势:
高效的转染:包装的病毒系统可侵染最多的细胞类型,包括非分化细胞和难以转染细胞(原代、血、干细胞)或侵染转基因鼠模型。
表达稳定,可遗传:包装基因整合到基因组DNA上,高水平表达,低变异。
不干扰细胞: 细胞功能不受侵染过程影响。
生物安全: 四质粒系统包装最大的安全性;非人源FIV 病毒最大限度降低风险。
高包装效率:病毒包装时采用SBI提供系统质粒转染效率接近100%
无酶连接系统:SBI同时提供了无酶连接载体构建系统,最大限度的克服载体构建过程的困难。
完整的病毒包装体系:SBI提供载体构建、转染、病毒浓缩和纯化、滴度检测等病毒包装产品。最大程度的降低包装繁琐程度,提供包装病毒产品。
穿梭质粒包含三种类型:
cDNA载体
microRNA载体
shRNA 载体
注:SBI提供各种启动子类型、各种抗性、各种标签的载体。详请来电咨询。
2.Clone-it无酶慢病毒载体构建体系
Clone-it Lentivector Systems
原理
克隆载体提供线性粘性末端。要克隆的插入片段的互补末端很容易通过利用交错延伸PCR或经过传统oligo退火产生。把线性载体和获得的插入片段混合,它们的粘性末端因为序列互补退火在一起,产生带切口的杂交质粒。混合物转入E.coli后,质粒的切口会被细胞内的酶连接上。
优势:
不需连接酶、重组酶、拓扑异构酶和限制性内切酶。
快速、直接克隆避免重组误差。
接近100%克隆效率
操作时间很短,适合高通量克隆
cDNA克隆体系利用SBI’s Clone-it cDNA vectors系统精准的克隆你的cDNA且不用担心限制酶切位点问题。该系统能够快速克隆小于5kb的任何cDNA。采用高活性的EF1α启动子驱动转录,Kozak元件优化翻译。蛋白表达可以随意的在N段连接HA表位或C段T2A标签。分类和筛选可选RFP报告基因或嘌呤霉素抗性基因。
shRNA试剂盒可以直接将短目标oligo片段和预制载体混合快速克隆。利用H1启动子可以获得shRNA高水平表达。阳性表达细胞可通过CMV启动子驱动的GFP报告子、RFP报告子或通过嘌呤霉素抗性筛选验证。你也可以选择EF1启动子启动的RFP标签表达。
3.MAXifect转染试剂
MAXifect Transfection Reagent
SBI公司的MAXifect转染试剂是一个操作简单且容易掌握的细胞转染方法。传统的磷酸钙转染法操作繁琐,难于控制,导致转染效率低且重复性差;脂质体转染法则转染效果随细胞类型变化大,对细胞有一定的毒性;为了克服这些困难,SBI创造了MAXifect转染方法。
产品名称 |
规格 |
货号 |
备注 |
MAXifect Transfection Reagent |
50 transfections |
BY-LV |
转染次数以 |
4.PEG-it™病毒浓缩试剂盒
PEG-it™ Virus Precipitation Solution
让你的病毒包装简便起来!
操作时间不到1小时
15cm培养板能够获得1x10^7 ifu的 病毒。
可浓缩病毒10-100倍
对细胞无毒性
适用范围:
所有慢病毒、逆转录病毒
主要优点:
操作简单,整个操作流程只需3次离心就可完成,操作时间不超过一个小时。
浓缩效率高,一个15cm培养板能够获得1x10^6 to 1x10^7 ifu的病毒
对所有慢病毒和逆转录病毒颗粒可以浓缩10-100倍
经浓缩纯化的病毒依然稳定,病毒的转染不会受到任何干扰或影响
同超离一样不会积累细胞残片,避免了毒性和免疫反应,对包括ES细胞在内的所有靶细胞无毒
不需特殊的装备,不需超速离心机,降低了昂贵的超离成本。
非常适合于大体积的病毒浓缩-很好的解决了超离方法的容量限制。
提高了细胞转染效率并制备了适于体内转染的超高滴度的病毒。
满足细胞培养中对无菌的要求。
同SBI的LentiMag™ Magnetotransduction Kit试剂盒兼容。
产品规格
产品 | 规格 | 货号 | 浓缩病毒产量 |
PEG-it Virus Precipitation Solution | 100 mL | BY-LV810A-1 | 可浓缩纯化400ml病毒上清,配合SBI慢病毒包装系统可以浓缩2个产量分别为108的慢病毒。 |
PEG-it Virus Precipitation Solution | 250 mL | BY-LV825A-1 | 可浓缩纯化1000ml病毒上清,配合SBI慢病毒包装系统可以浓缩5个产量分别为108的慢病毒。 |
流程示意图
浓缩效果
浓缩纯化病毒的转染效果
图中显示三种不同的启动子CMV、mOct4和mNang的慢病毒经PEG-it浓缩纯化后侵染H9 hES细胞。
5.RNA干扰库
提供全基因组扫描细胞应答基因或信号转导通路扫描
产品名称 |
规格 |
货号 |
备注 |
GeneNet Human 50K siRNA Library in pSIF1-H1-Puro |
>2x 10^7 IFUs |
BY-SI206B-1 |
人全基因组 |
GeneNet Mouse 40K siRNA Library in pSIF1-H1-Puro |
>2x 10^7 IFUs |
BY-SI222B-1 |
鼠全基因组 |
GeneNet Human Kinase siRNA Library in pSIH1-H1-Puro |
>2x 10^7 IFUs |
BY-SI |
Kinase |
GeneNet Human Phosphatase siRNA Library in pSIH1-H1-Puro |
>2x 10^7 IFUs |
BY-SI |
Phosphatase |
GeneNet Human Apoptosis siRNA Library in pSIH1-H1-Puro |
>2x 10^7 IFUs |
BY-SI |
Apoptosis |
用户使用产品发表文章(部分):
Sooryanarayana Varambally,1,2,3* Qi Cao,1,2* etc. Genomic Loss of microRNA-101 Leads to Overexpression of Histone Methyltransferase EZH2 in Cancer .Science 322, 1695 (2008);
Parikh H., Carlsson E., Chutkow W. A., etc. TXNIP Regulates Peripheral Glucose Metabolism in Humans. Plos Med. 4 (5): e158, 2007. (PDF) »
Shaftel S. S., Kyrkanides S., Olschowka J. A., Miller J. H., Johnson R. E., and O’Banion M. K. Sustained hippocampal IL-1ß overexpression mediates chronic neuroinflammation and ameliorates Alzheimer plaque pathology. J. Clin. Invest. 117:1595-1604, 2007.
Si Z., Vandegraaff N., O”hUigin C., Song B., Yuan W., Xu C., Perron M., Li X., Marasco W. A., Engelman A., Dean M. and Sodroski J. Evolution of a cytoplasmic tripartite motif (TRIM) protein in cows that restricts retroviral infection. PNAS, 103 (19): 7454-7459, 2006.
知名用户:
哈佛药学院Harvard Institute of Medicine
麻省理工学院MIT
美国国立卫生研究院NIH
印度国家病毒研究院National institute of Virology
新加坡国立大学 National University of Singapore
SBI公司
System Biosciences (SBI) 致力于开发独特、革新的技术,为客户研究蛋白组学和基因组学功能提供研究工具。SBI 是专业的慢病毒产品公司,提供基于慢病毒的所有相关产品、质粒、试剂盒及相关配套试剂和慢病毒延伸产品如IPS细胞多功能性诱导试剂盒和RNAi筛选文库。
毅新兴业(北京)科技有限公司是一家集科研服务和产品销售为一体的公司,公司依托强大的技术团队和实验室,联合SBI公司为客户打造简便快捷高性价比的产品和服务。
订购信息:
Email: lenti.bioyong@gmail.com
电话:010-83608397-602
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