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转染原来如此简单![新品推荐]
【字体: 大 中 小 】 时间:2009年04月27日 来源:Invitrogen
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Invitrogen公司最近推出了一款新的转染仪器——Neon转染系统。不看不知道,原来转染还可以如此简单,只要简单的三步就能完成,连难转染的细胞,如原代细胞和干细胞也能轻松搞定!
Neon™ 转染技术可高效地将核酸导入所有测试过的哺乳动物细胞类型,包括难转染的细胞、原代细胞和干细胞。这个开放而灵活的核酸导入系统包含了一个小型的台式电穿孔仪、一个电子移液器吸头架、专利的电子移液器吸头,以及专用的试剂。
即插即用
转染步骤简单到不能再简单了(图1)。(1) 将细胞和质粒混合物吸入Neon™ 移液器吸头中,(2) 插入到移液器吸头架上,并按“开始”。(3) 然后,只需将转染过的细胞加入你的培养容器中。既不需要将样品加入或移出电击杯,也不需要加盖和开盖。转染发生在Neon™ 移液器吸头中。
图1-Neon™ 系统使用简单的3步转染程序。
新颖的移液器吸头(电反应室)
与传统的电击杯一类的电穿孔反应室不同,Neon™ 系统利用了生物兼容的专利移液管反应室,从而产生更均匀的电场(图2)。这种设计能更好地维持生理条件,与传统的电穿孔相比,细胞存活率非常高。
图2. 标准的电击杯反应室与Neon™ 移液器吸头的比较。(A) 标准的电击杯。(B) Neon™ 移液器吸头。在我们全新的移液器吸头设计中,电极的设计已表明能产生能均匀的电场。最终结果是细胞毒性更小,转染效率更高。
杰出的效率
Neon™ 转染技术专为操作简单易用的高效率基因导入而设计(图3)。经过一次防故障的优化实验,即可在任何细胞类型中将导入效率最大化,同时将毒性最小化(表1)(在毒性最小化的条件下获得最大的导入效率)。利用Neon™ 细胞数据库中的验证步骤作为起点,来优化你的实验。
图3. 利用Neon™ 转染系统来高效转染Jurkat细胞。(A) 利用Neon™ 转染系统转染Jurkat细胞24小时后,编码EGFP的报告载体的细胞内吸收。(B) A图的对应荧光图像。
表1-Neon™ 转染系统成功转染的细胞系。对于成功转染过的细胞系的完整列表、操作步骤和更多的参考文献资料,请访问www.invitrogen.com/neon。 细胞系 细胞类型 转染效率* (%) 活细胞 (%) 原代星形胶质细胞 脑神经元 76 88 原代树突状细胞 血液 50 70 Jurkat T细胞白血病 94 97 KG 血液 76 83 原代小鼠胚胎成纤维细胞 胚胎 80 75 小鼠胚胎干细胞 胚胎 88 96
* 转染效率是根据活细胞和死细胞的全部群体来计算的。
Neon™ 转染系统的优势: