以更SMART的方式合成cDNA[新品推荐]

【字体: 时间:2009年04月29日 来源:生物通

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  想当年,Clontech的SMART技术那可是风靡全球啊,建文库、做RACE的没有不知道SMART的。后来,随着Clontech被收购,市场份额想必也下降了不少。不过,如今Clontech卷土重来,推出了SMART的升级产品SMARTer cDNA合成试剂盒。

想当年,Clontech的SMART技术那可是风靡全球啊,建文库、做RACE的没有不知道SMART的。后来,随着Clontech被收购,市场份额想必也下降了不少。不过,如今Clontech卷土重来,推出了SMART的升级产品SMARTer cDNA合成试剂盒。想想也是,人家SuperScript已经推出第III代了,如果还是恒久不变的SMART,怎么与别人抗衡。

 

SMART技术的原理估计大家都很清楚了,这里就不赘述了。如果有同学不太了解,请阅读《SMART技术回顾》。

 

SMARTer系列试剂盒中的升级产品包括SMARTer II A 寡核苷酸及SMARTScribe™逆转录酶。在与新的SMARTer寡核苷酸共同使用时,SMARTScribe逆转录酶的模板转换能力增强了;你更有可能合成高质量、全长的cDNA,而不管模板的大小或丰度。

 

如果你的起始样品非常少,那么SMARTer cDNA合成试剂盒尤其适合你。那些从激光捕获显微切割样品,或流式细胞仪分选出的细胞中提取出的RNA总是少得可怜,以前的SMART cDNA合成试剂盒根本没法用,而SMARTer试剂盒则能从最少2 ng 总RNA中合成第一链cDNA。

 

以往,很稀的RNA是不能用于常规的cDNA合成的。于是,Clontech设计出SMARTer Pico PCR cDNA合成试剂盒,能从50ul浓度低至20 pg/ul的总RNA合成cDNA。它通过增加反应体积,以及额外的柱纯化步骤,将纯化的单链cDNA全部用于扩增。SMARTer和SMARTer Pico的双链DNA产量都在1-2 ug,它们的步骤比较请看下表。

 

SMARTer RACE也比原始的SMART RACE更灵敏、更特异,而背景更低。SMARTer RACE的起始样本只需要10ng 总RNA,而SMART RACE需要50 ng。

 

SMARTer RACE的特点:

  • 极其易用:单管就能完成两步操作。全部的手工操作时间仅需要4小时。
  • 仅需要10 ng总RNA:SMARTer RACE能利用少量的样品,包括活检、组织切片、胚胎及稀有疾病组织。优化的步骤能显著降低非特异背景,这种降低在处理极少量样品时就显得很重要。
  • 特异富集5’端:改进的SMARTer Oligo能优先杂交到cDNA的5’端,因此与旧版的Oligo相比,整体产量有所提高。
  • 无需RNA预处理:SMARTer RACE的方法无需用DNase预处理RNA。直接用总RNA进行反应即可,哪怕有基因组DNA污染也没关系。

如果你想了解SMARTer cDNA及RACE试剂盒的更详细信息,请点击这里

 

(生物通 余亮)

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