(视频)如何高效转染原代细胞[创新技巧]

【字体: 时间:2010年02月26日 来源:生物通

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  如何高效转染原代细胞?这可是个难题,研究人员一直在苦苦探索。在转染试剂不太管用的情况下,电穿孔兴许是更为有效的方法。Bio-Rad公司近日发布了一段教育视频,手把手教您如何利用Gene Pulser Mxcell电穿孔系统高效转染原代细胞。

如何高效转染原代细胞?这可是个难题,研究人员一直在苦苦探索。在转染试剂不太管用的情况下,电穿孔兴许是更为有效的方法。Bio-Rad公司近日发布了一段教育视频,手把手教您如何利用Gene Pulser Mxcell电穿孔系统高效转染原代细胞。这段12分钟的视频详细介绍了细胞的准备、仪器的设置及电转过程,并附上了转染后细胞的图像。

通过观看这段名为“利用Gene Pulser Mxcell电穿孔系统高效转染原代细胞”的视频,你们将了解到如何通过简单的实验来快速鉴定目的细胞的最佳转染条件。此视频中使用的是小鼠胚胎成纤维细胞。视频中还有小窍门,教您如何在开展实验的同时进行优化。科学家还讨论了一些导致电穿孔实验成功或失败的关键因素。他们特别提醒,在实验过程中,应使用新鲜分离的健康细胞,并使用与电穿孔缓冲液匹配的电穿孔条件。

另外,视频中还展示了科学家如何更换反应体系,而无需重新优化,将96孔电穿孔板中鉴定出的最佳条件应用在标准的电穿孔比色皿中,快速轻松地转换,而维持相同的电穿孔效率。这一点可值得好好学习,不仅省时,还特别方便。

Bio-Rad的Gene Pulser Mxcell电穿孔系统以及专利申请中的Gene Pulser电穿孔缓冲液是专为将核酸导入哺乳动物细胞及难转染的细胞而设计的。缓冲液的成分与细胞质相仿。与其他系统相比,该系统的一个重要优势是除了预设的程序,每个关键的参数都可设置,从电压到脉冲数,让研究人员能为自己的细胞找到最理想的条件。索取电穿孔系统的技术资料和报价。

Bio-Rad公司负责转染的全球产品经理Michelle Collins表示:“根据科学论文和报告,以及客户反馈,显然,电穿孔是将质粒DNA或siRNA导入原代细胞的最有效途径。”

您可在Bio-Rad公司的网页www.bio-rad.com/mefvideo上看到这段视频,也可在可视实验杂志(Journal of Visual Experiments)的网页http://www.jove.com/index/details.stp?ID=1662上观看。后者还附有详细的操作步骤和结果图片。

www.bio-rad.com/transfectionprotocols上还有全世界科学家提交的电穿孔操作步骤,欢迎查看。(生物通 余亮)

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