6月冷泉港实验方案发布RNA基本操作[创新技巧]

冷泉港出版社计划在今年年底推出一本关于RNA的新书《RNA: A Laboratory Manual》，那么6月份的冷泉港实验方案就包括了其中部分内容的早期预览。本期的另一篇免费Protocol也非常有意思，关注的是鸡胚胎的活体成像。

冷泉港出版社计划在今年年底推出一本关于RNA的新书《RNA: A Laboratory Manual》，那么6月份的冷泉港实验方案就包括了其中部分内容的早期预览。这些实验方案覆盖了基本的RNA技术，包括利用TRIzol（TRI Reagent）纯化RNA，通过SDS溶解和苯酚抽提纯化RNA，RNA的乙醇沉淀，从组织培养细胞中制备细胞质和核RNA，从RNA中去除DNA，以及RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳等。

在这些技术中，最重要且最常用的RNA分析技术当数凝胶电泳了。此技术通常用于RNA检测、定量、纯化和质量评估。两种最常用的凝胶类型分别是聚丙烯酰胺和琼脂糖。聚丙烯酰胺凝胶用在大部分应用中，适合于600 nt以下的RNA。琼脂糖则适合更大的RNA。于是这一期的CSH Protocols就将RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳这一实验方案开放，供所有读者浏览，点击下面的标题可浏览具体的操作步骤。

Polyacrylamide Gel Electrophoresis of RNA

当然，这些只是《RNA: A Laboratory Manual》中的一小部分。这本关于RNA的实验室指南浓缩了10年来RNA操作方面的各种技术，从最基本的到非常复杂的。这本指南来源于该领域4个最知名的实验室，提供了RNA研究的策略，详细的操作步骤以及大量的提示和常见问题分析。不过，价格也不菲，精装本的售价达240美元。期待影印版能早点上市。

本期的另一篇免费Protocol也非常有意思，关注的是鸡胚胎的活体成像。生物学成像技术的快速发展，让人们能更深入地了解胚胎发育。但是对于高等动物来说，它们的蛋不透明，或者是内部发育，这样胚胎所获得的光就有限。尽管目前有各种胚胎培养方法，但是脊椎动物的发育最好在完整的胚胎模式下研究。

美国斯托瓦斯医学研究所（Stowers Institute for Medical Research）的Paul Kulesa及同事就展示了鸡胚胎的卵内活体成像。他们先在蛋壳上敲一个小洞，然在附上一层特富龙膜，这种膜能透氧，但不透液体。他们对神经嵴细胞进行荧光标记，这种细胞类似多潜能干细胞，能分化成多种衍生物，并在整个胚胎中大范围移动。通过结合卵内培养和共聚焦显微镜或双光子显微镜观察，胚胎可维持最多5天，而神经嵴细胞可在长时间（36小时）内观察。点击下面的标题可浏览卵内活体成像的全过程。（生物通 余亮）

In Ovo Live Imaging of Avian Embryos

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