分离树突状细胞的新工具[新品推荐]

树突状细胞（DC）为先天性和适应性免疫反应提供了关键性的联系。这些特化细胞具有捕获、处理、并将抗原呈递给原态T细胞以促进其分化和激活的能力。尽管所有的树突状细胞都能够呈递抗原，但它们却是一个异质性的细胞群。几种树突状细胞亚群已经鉴定出，它们在位置、表型和免疫功能上各不相同。这种可塑性使得它们在呈递不同微生物抗原或损伤细胞成分时有差异地形成免疫反应。

人类血液中大约1-10%的外周血单核细胞（PBMC）为树突状细胞。相对低丰度的独特标记物和不断发现的新亚群，使得分离树突状细胞进行功能研究成为了一个挑战。

为了解决这一难题，R&D Systems开发出一种负选试剂盒，能够富集从人类血液中分离出的树突状细胞。与正选试剂盒不同，MagCellect Human Blood DC Isolation Kit让分离出的树突状细胞群未被触碰，减少了细胞在分选过程中发生改变的风险。对用MagCellect Kit分离出的树突状细胞群进行流式细胞分析，证实超过90%的细胞均为CD14–CD19–BDCA1+BDCA2+BDCA3+ (图1A)。其中2-8%为BDCA2+CD45+浆细胞样树突状细胞（pDC；图1B），82-88%为髓样树突状细胞（mDC）。mDC细胞群中有20-40%为BDCA1+CD11c+，20-40%为BDCA3+CD11c+，10-20%为CD16+CD11c+，10-25%为CD56+MHCII+，表明MagCellect Kit能够分离最近鉴定出的CD56+和CD16+ mDC亚群（图1C和1D）。

图1. 利用流式细胞仪对MagCellect Human Blood Dendritic Cell Isolation Kit分离出的树突状细胞进行分析。MagCellect Human Blood Dendritic Cell Isolation Kit可以富集来自人类血液样品的所有树突状细胞（DC）。利用图示的抗体通过流式细胞仪检测不同的树突状细胞亚群，富集前（上图）和富集后（下图）。A. 利用抗CD14、抗CD19、抗CD1c/BDCA1、抗DLEC/BDCA2和抗Thrombomodulin/BDCA3抗体检测所有树突状细胞。B. 利用抗DLEC/BDCA2和抗CD45抗体检测浆细胞样树突状细胞（pDC）。C. 利用抗CD56和抗MHCII抗体检测CD56+MHCII+髓样树突状细胞（mDC）。D. 利用抗CD16和抗CD11c抗体检测CD16+CD11c+ mDC。所检测亚群的百分比可能随供体不同而变化。

对富集的全部DC细胞群的功能分析证实，分离出的细胞维持了在混合白细胞反应中激活异基因T细胞增殖的能力。由于分离出的树突状细胞在整个富集过程中未被抗体触碰，所以它们有可能比用正选技术分离出的细胞保留了更多的功能特性。此外，MagCellect Kit通过两种抗体混合物来标记不想要的细胞，无需分离柱，比其他试剂盒更为易用。R&D Systems新推出的MagCellect Human Blood Myeloid Dendritic Cell Isolation Kit也具有类似的优点。

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