罗氏和TIB Molbiol为快速检测EHEC提供解决方案

　　

两周前，德国北部地区首次传出大肠杆菌疫情。如今，疫情已蔓延至欧洲，造成约1200人感染。为此，罗氏应用科学部和TIB Molbiol为科学家们提供了互补的技术，可快速鉴定和检测肠出血性大肠杆菌（EHEC）。

大肠杆菌（E.coli）是一种在人和温血动物肠道内常见的细菌。大多数大肠杆菌菌株无害。然而，一些菌株，例如肠出血性大肠杆菌（EHEC）可引起严重的食源性疾病。它主要通过食用被污染的食物传染给人类，这些食物如生的或烹调不彻底的绞碎肉制品和原料奶。

此次疫情的罪魁祸首为肠出血性大肠杆菌的一个变种――现在被称作“Husec 41”，是目前已知的42种肠出血性大肠杆菌中的一种。因该细菌有较强的抗药性；而且不是这种细菌直接致病，而是通过细菌产生的毒素致病，所以抗生素治疗对这种细菌没有作用。

而EHEC细菌的可靠检测对于疫情监控非常关键。若想快速、灵敏地检测EHEC细菌，最好的方法莫过于通过聚合酶链式反应（PCR）方法来检测其独特的DNA序列。罗氏应用科学部提供了PCR的完整系统，包括LightCycler® 仪器、软件、试剂及耗材。这些检测系统是专为生命科学研究而设计，能够快速开发出PCR分析，加速诊断工具的发展。

早在2002年，德国雷根斯堡大学（U. Reischl教授）、明斯特大学（H. Karch教授）以及美国亚特兰大CDC（N. Strockbine博士）就已经利用LightCycler® 平台开发出EHEC的检测方法，并发表在《Journal of Clinical Microbiology》杂志上。从那以后，实时定量PCR检测被全世界的实验室广泛使用。

TIB Molbiol公司所开发的LightMix® PCR Kit EHEC包含了预混合的引物和探针，以及一个适当的阳性对照，可用于LightCycler® 仪器。该分析检测志贺毒素基因，可在一小时内完成。从MacConkey琼脂平板上挑出细菌，放入PBS缓冲液中，煮沸，离心取上清，即可开展分析。

过去，在检测EHEC时，需要将病人粪便样本中的细菌过夜培养，再开展PCR分析。为了加快分析进程，应对肠出血性大肠杆菌的爆发，可利用自动化核酸分离平台从粪便样本中直接分离细菌中的核酸。MagNA Pure 96是罗氏诊断公司于2009年推出的高通量全自动快速核酸纯化系统，支持1－96个样本的自动纯化。该系统采用装有预装式即用型试剂的优化试剂盒，并配有相应的自动分离方法，能让您以前所未有的速度获得大量具有完美重复性的核酸样本。（生物通 余亮）