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从单个样品中分离多个细胞类型的Tips[心得点评]
【字体: 大 中 小 】 时间:2011年06月17日 来源:生物通
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加拿大Stemcell公司(STEMCELL Technologies Inc.)是细胞培养方面的专家,提供多种干细胞的培养基和鉴定产品,以及细胞分选的多个系统,其产品以产品新、品质高、重现性好闻名于生命科学和医学研究领域。该公司每月都会发布一个技术小贴士,给细胞培养人员以指导。生物通特摘录一些,编译后与读者分享。
加拿大Stemcell公司(STEMCELL Technologies Inc.)是细胞培养方面的专家,提供多种干细胞的培养基和鉴定产品,以及细胞分选的多个系统,其产品以产品新、品质高、重现性好闻名于生命科学和医学研究领域。该公司每月都会发布一个技术小贴士,给细胞培养人员以指导。生物通特摘录一些,编译后与读者分享。文中若涉及产品,除特别声明外,均为Stemcell公司产品。
对于样品量有限而又需要分离多个细胞类型的情况,您可能会进行连续分离。这避免了等分样品,也确保了细胞的高效回收。连续分离对于嵌合分析很理想,嵌合分析通常在少量血液样品中开展,需要从单个起始样品中分离超过一种细胞类型,进行谱系特异的分析。
大部分连续分离步骤可从单个样品中分离3种细胞类型,如下:
1. 整个样品用第一种细胞类型特异的抗体标记。随后将这些细胞置于磁场中,上清中未标记的细胞转移至一个新管中,而第一种您想要的细胞类型就留在管内。
2. 第一次分离后的样品用第二种细胞类型特异的抗体标记。操作过程同上,收集第二种您想要的细胞类型。
3. 以同样的方式收集第三种您想要的细胞类型,而上清可倒掉。
连续分离的小贴士:
• 对目的细胞类型的阳性选择(正选)必须在未标记的细胞群体中开展,或是原先的起始样品,或是阳性选择后倒出的部分,或是阴性选择后倒出的部分或富集的细胞群体。
• 我们通常建议先分离最稀少的细胞类型,尽量减少细胞损失,最后分离最常见的细胞类型。
连续分离有不少好处,包括:最大程度回收细胞,允许从少量样品中分离细胞,可快速轻松地分离多个细胞类型,也可利用RoboSeq自动化,以避免交叉污染。
Stemcell公司的产品包括:检测造血干细胞功能的半固体培养基MethoCult®和MyeloCult®系列,培养和鉴定间充质干细胞的MesenCult®系列,培养和分析神经干细胞的NeuroCult®系列,培养胚胎干细胞和多能干细胞的Es-Cult®系列产品,可以分选各种细胞的免疫磁性分选系统EasySep®,全自动细胞分选仪RoboSep®,全自动克隆挑选系统EasyPick®,及与其配套使用的ClonaCell®-HY试剂等等。(生物通 余亮)