与顽固的支原体斗争到底[新品推荐]

支原体真是让人崩溃的家伙。悄然无息，杀死细胞。与细菌和真菌相比，支原体造成的污染不论在检测、预防还是去除上都更为困难。为什么呢？首先因为它极小，直径在0.2-2 μm，可以轻松地通过滤膜，混入培养系统中；而且它没有刚性的细胞壁，因此普通的抗生素对它根本不起作用。基于以上两点，它即使生长到很高密度，也没有明显的污染迹象，容易逃过实验人员的法眼，逍遥法外。然而，支原体的存在改变了实验结果，怎么办？

对培养物进行常规的支原体检测非常重要。一般来说，每两三个月进行一次定期检测是必要的。如果有新细胞进入实验室，或准备将细胞进行液氮保存，都应该进行检测。当然，如果细胞不大对劲，应立马检测。别不以为然，有研究报告称25%的细胞都存在支原体污染。

目前有多种方法检测支原体，美国MP Bio公司也推出了一款 ImmuMark™ MycoTest™ 试剂盒，它运用免疫荧光方法来检测培养细胞中的支原体污染。这种方法特异性好，也相当快速，能在1小时内获得结果。

该产品中使用的单抗CCM-2特异性针对最流行支原体株系中（包括Acholeplasma laidlawii, M. bovis M. hominis, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. fermentans, M. pulmonis, M. hyopneumoniae和M. salivarium等）的共同抗原。

ImmuMark™ MycoTest™ 试剂盒提供两种检测方法。直接检测法利用荧光标记的单抗CCM-2一步法快速筛选出可疑阳性。间接检测法利用荧光标记的单抗CCM-2和FITC标记的二抗-山羊抗小鼠IgG对极度敏感的支原体进行检测。直接法或间接法孵育样品后，用PBS冲洗掉多余试剂, 在荧光显微镜下观察结果。

若是不幸中招了，那也只能坦然面对。如果可以的话，将细胞扔掉，重新开始吧。若细胞极其珍贵，你可以试试市场上的一些支原体去除试剂，比如MP Bio的MYCOPLASMA REMOVAL AGENT（MRA）。据说，这款试剂被欧洲动物细胞培养协会（ECACC）认为是去除支原体最有效的产品。

MRA具有很强的抑制支原体活性的能力，可从被污染的培养细胞中彻底去除支原体。它属于抗生素喹啉家族的衍生物，通过抑制支原体DNA旋转酶来去除支原体污染，DNA旋转酶是DNA复制过程中必不可少的酶类。

MRA的活性在细胞培养物中可以维持长达7天，对多种支原体株系均有作用，并且浓度达到0.5 μg/ml即可发挥功效。MRA使用非常方便，只要添加到支原体污染的培养细胞中孵育一周即可。一旦使用了MRA，培养细胞就不会再受到同样的支原体污染，从而起到预防污染复发的效果。当然，它也可以作为预防支原体污染使用的试剂。预防浓度为0.1 μg/ml即可。

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