-
生物通官微
陪你抓住生命科技
跳动的脉搏
Bio-Rad推出经过实验室验证的qPCR分析[新品推荐]
【字体: 大 中 小 】 时间:2012年08月30日 来源:生物通
编辑推荐:
Bio-Rad公司近日推出了全新的PrimePCR™分析,这是目前市场上仅有的完全经过实验室验证的实时定量PCR引物,可满足MIQE指南。PrimePCR产品满足以下标准:可准确检测20个拷贝;引物二聚体形成和基因组DNA交叉反应性极少;扩增效率在90%-110%;动态范围至少在6个数量级;R2>0.98。
生物通报道 Bio-Rad公司近日推出了全新的PrimePCR™分析,这是目前市场上仅有的完全经过实验室验证的实时定量PCR引物,可满足MIQE指南。
MIQE指南的制定者之一Jo Vandesompele谈道:“PCR引物设计和分析验证是两个最重要的步骤,可确保准确、重复且一致的定量PCR结果。不幸的是,并非所有qPCR用户都知道行业中的qPCR分析并未经过充分验证。”
一些公司也提供经过验证的引物对,但它们只是经过引物设计算法的验证,而并没有经过实验室的验证,以确保这些分析满足MIQE指南。尽管各个厂家都利用基于计算机的算法来设计qPCR的引物,但这不能保证分析能在实验室中起作用。因此,为了确保遵从MIQE指南,研究人员仍需要验证这些分析,浪费时间和资源。
Bio-Rad联合Biogazelle公司的Jo Vandesompele和Jan Hellemans,对蛋白编码基因的每个引物对进行设计、优化以及实验室验证。Biogazelle公司是一家qPCR数据分析和服务公司。所有分析都是以转录本覆盖度最大、与已知SNP的重叠最少,以及在可能情况下跨越大的内含子的原则设计的。
此外,Bio-Rad在实验室中验证了每个分析。Bio-Rad以标准化的分析验证报告形式提供了每个PrimePCR分析的性能。按照MIQE指南,分析经过以下方面的严格评估:
• 效率 – 根据合成模板的十倍连续稀释结果来计算;只有表现出良好的线性和效率的分析才被认为质量合格
• 特异性 – 所有来自cDNA的PCR产物都经过大规模并行测序的验证,这克服了熔解曲线分析和凝胶电泳的限制
• 灵敏度 – 对于背景信号高得无法接受的分析,重新设计使非特异性扩增降至最低
PrimePCR产品满足以下标准:可准确检测20个拷贝;引物二聚体形成和基因组DNA交叉反应性极少;扩增效率在90%-110%;动态范围至少在6个数量级;R2>0.98。目前有单个SYBR® Green分析、预设计的通路和疾病特异的分析板,或定制分析板可供选择。预设计的分析板针对经典通路和相关集合,可协助鉴定感兴趣的生物学研究领域中的关键靶标。定制分析板则有96孔和384孔可供选择。
为了进一步支持qPCR研究人员,PrimePCR分析可与Bio-Rad的CFX实时定量PCR系统和CFX Manager™ 3.0数据分析软件完全整合,带来简化的数据采集和分析。(生物通 薄荷)