细胞培养的最后一道防线[新品推荐]

【字体: 时间:2013年03月27日 来源:生物通

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  在细胞培养中,我们通常使用0.2微米的滤膜来去除污染物。然而,这道防线只能阻挡细菌,而无法阻挡支原体。这时,我们有必要升级秘密武器,与支原体斗争到底。选用孔径更小的滤膜,这也许是个不错的主意。本文介绍了Nalgene 0.1微米滤器与市场上类似产品的性能比较。

支原体号称细胞培养中的大敌。它就像慢性毒药,杀细胞于无形中。据统计,超过25%的细胞系中感染了支原体,而研究者大多并不知晓。常规检测可以降低支原体意外污染的机会,但并不能完全避免。

在细胞培养中,我们通常使用0.2微米的滤膜来去除污染物。然而,这道防线只能阻挡细菌,而无法阻挡支原体。因支原体更小(约为0.15-2 µm),而且形状灵活,故总是能逃过我们传统的滤膜。这时,我们有必要升级秘密武器,与支原体斗争到底。

如何升级呢?选用孔径更小的滤膜,这也许是个不错的主意。目前市场上有多家公司提供0.1微米的滤膜,如赛默飞世尔。Thermo Scientific Nalgene 0.1微米滤器具有独特的Nalgene Rapid-Flow™ 膜支持系统,有四种容量可供选择:150mL、250 mL、500 mL 以及1000 mL。Rapid-Flow™ 系统采用多排柱状结构,使得膜系统相较于其他过滤生产商使用的辐射辐条设计更加均一稳定。据称,这种设计特点能使滤膜通过更大的流速和通量。是不是这样呢?赛默飞世尔的研究人员将Nalgene 0.1微米滤器与市场上的类似产品进行了性能比较。

谁来参加这场比赛?除了Nalgene Rapid-Flow™ 1000mL 滤器、Rapid-Flow™ 500mL 滤器,还有两个强劲的对手,它们分别是M品牌的1000mL 滤器、和C品牌的500mL 滤器。当然,这些都是0.1微米PES滤膜。测试的液体是经典的细胞生长培养基:DMEM+10% FBS(胎牛血清)及RPMI 1640+10% BGS(成牛血清)。

比什么?流速和堵塞体积。研究人员记录DMEM+10% FBS 和RPMI 1640+10% BGS 每滤出100mL 的时间点,直至滤器堵塞(即每秒滤出一滴液体或过滤100ml 液体超过2 分钟)或者1L DMEM+10% FBS、RPMI 1640+10% BGS液体过滤完毕。

流速对比

在1000 mL 滤器的对比中,Nalgene Rapid-Flow™ 产品性能的优势非常明显。结果显示,在过滤DMEM + 10% FBS 以及RPMI 1640 + 10% BGS 时,0.1 微米的Nalgene Rapid-Flow™ 1000 mL 滤器的过滤速度明显快于M 品牌1000 mL 滤器。Nalgene Rapid-Flow™ 1000 mL滤器的流速也与预期一致,明显快于滤膜直径较小的Nalgene Rapid-Flow™ 500 mL 滤器。

在500 mL 滤器的对比中,在过滤DMEM + 10% FBS 及RPMI 1640 + 10% BGS 的过程中,Nalgene Rapid- Flow™ 500 mL 滤器的流速与C 品牌500 mL 滤器的流速接近。在过滤DMEM + 10% FBS 的过程中,M 品牌1000 mL 滤器的过滤速度与Nalgene Rapid-Flow™ 500 mL 滤器接近。但是在过滤RPMI 1640+ 10% BGS 时,Nalgene Rapid-Flow™ 500 mL 滤器的速度明显快于M 品牌1000 mL。

堵塞体积对比

对于所有的实验溶剂,由于0.1微米的小孔径,所测试的所有滤器的平均最大临界通量均未超过1L DMEM + 10% FBS 溶液、1L RPMI 1640 + 10% BGS 溶液。但是,对于DMEM + 10% FBS 和RPMI 1640 + 10% BGS 溶液的过滤,Nalgene Rapid-Flow™ 1000 mL 0.1微米滤器的堵塞体积明显高于M 品牌1000 mL、Nalgene Rapid-Flow™ 500 mL及C品牌500 mL 滤器。M 品牌1000 mL 滤器的堵塞体积与Nalgene Rapid-Flow™ 500 mL 滤器相当。

从这里我们可以看出,在本实验的可控条件下,与M 品牌1000 mL 0.1 微米滤器相比,Nalgene Rapid-Flow™ 1000 mL 0.1 微米滤器在过滤培养基(DMEM+10% FBS、RPMI 1640+10% BGS)方面具有非常优越的过滤性能。同时Nalgene 1000 mL 0.1 微米滤器的过滤效果优于所有其他品牌的500 mL 0.1 微米滤器。事实上,在过滤RPMI 1640+10% BGS 的实验中,Nalgene Rapid-Flow™ 500 mL滤器的平均流速比M 品牌1000 mL 滤器高出34%。

我们都知道,当膜的孔径降至0.1微米时,相应地,流速会降低,堵塞体积也会下降。同时,流量也会受到膜支撑板设计的限制。对于大部分滤器,膜下方的支撑板是由从膜的中间位置辐射出来的条带状结构组成,结构类似车轮上的辐条。抽真空时,辐射条之间的间距会使膜发生形变而导致流体流量的降低。那么,Nalgene Rapid-Flow™ 滤器如何能从一众产品中脱颖而出呢?

首先,这要归结于Nalgene产品具有更大的过滤表面积,然而,这并不能完全解释Nalgene产品的性能优势。Nalgene Rapid-Flow™ 1000 mL 滤器的表面积比M 品牌1000 mL 滤器大56%,其对RPMI 1640+10% BGS 溶液的过滤速度却高出102%。这是因为Nalgene Rapid-Flow™ 滤器采用多排柱状结构,可以为膜提供更加均一、限制更低的支撑,从而获得较快的过滤速度,并提高了过滤体积。

有了这一道坚实的防线,相信支原体再也无法入侵您的细胞。(生物通 余亮)

立即索取Nalgene Rapid-Flow 1000 mL滤器的更多资料

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