如何让你的CO2培养箱正常运作[心得点评]

哺乳动物细胞的培养无疑是生物学研究中最重要的一环。哺乳动物细胞相对娇贵，需要特殊的培养环境。这一环境主要是由CO2培养箱来提供的。让你的CO2培养箱正常运作，远离污染，对细胞的成功培养尤为重要。以下建议来自Eppendorf的产品经理Charlie Villano。

避免污染

哺乳动物细胞是在营养丰富的培养基中培养的，且培养温度有利于几乎所有微生物的生长。尽管许多研究人员在培养基中加入抗生素或抗菌素，作为预防措施，但这并不能解决方法上的错误，反而掩盖了潜在的问题。如果可能的话，避免使用这些抗生素，不断改善你的无菌技术，来保持你的培养箱干净。

微生物通常是“破门而入”。这虽然是显而易见的，但要完全避免，也没那么容易。在培养箱中放置东西时，一定要戴上手套，并尽量减少内层玻璃门打开的时间。偶尔用70%的乙醇擦拭门把手。保持湿度盘中的水清洁，每周更换。定期用肥皂和水清洗湿度盘，并用乙醇擦拭，或高压灭菌。如果培养基洒在了培养箱内，则取出层架，彻底清洁。

这些清洗活动的频率将取决于你的培养箱使用得有多频繁。在大型实验室，培养箱需要经常清洗。如果你刚开始用一个干净的培养箱，处处小心，那么它可在几周或几个月内保持干净。

保证CO2的水平

大多数哺乳动物培养基使用碳酸氢盐缓冲系统。CO2是这一系统中的重要组成部分，必须保持在5%，以维持培养基的生理pH。尽管几乎所有的培养箱都配备CO2传感器，但随着时间的推移，校准会偏离设定点，需要操作人员直接测定CO2来重新校准。测定CO2水平的最简单、最准确方法是使用气体分析仪，如Fyrite装置。它们有专门测定CO2或O2水平的型号。

旧型号的培养箱可能需要更频繁的重新校准，而最新的型号每月会进行CO2传感器的自动归零。尽管这些型号几乎不需要手动校准，但用户也应当用Fyrite装置来检测培养室的CO2水平。

维持37°C

哺乳动物细胞也和我们一样，喜欢37°C的温度。大部分CO2培养箱都配有显示器，报告内室的温度，但定期检查也是个不错的主意。使用一个高品质、已校准的温度计。将温度计贴在玻璃门的内侧，这样可以从外面读取温度，而不用打开玻璃门。在第一天下班前贴上。第二天一早，读取温度。重复一次，如果读数不是37°C，而温度计很准的话，那就有必要重新校准温度传感器。

保持潮湿

培养箱内部的温度相对较高，因此在没有高湿度的情况下培养基的蒸发将是个实际的问题。通过培养箱底部的湿度盘，可维持相对较高的湿度（90%-95%）。但缺点是，装满水的湿度盘也是个潜在的污染源。

总而言之，定期维护和清洁是保持你的CO2培养箱正常运作并远离污染的最有效方法。（生物通 薄荷）

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