从单细胞中提取高质量的RNA[新品推荐]

【字体: 时间:2013年07月18日 来源:

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  随着激光捕获显微切割技术(laser capture mi-crodissection, LCM)的发展, 现已能够从含有不同成分的组织中高度选择性地获取某一特定的同类细胞甚至单个细胞。Epicentre的ArrayPure™ Nano-scale RNA Purification Kit可从单细胞中提取高质量的RNA,满足研究者的应用需要。

如何从少量细胞甚至单细胞中提取RNA,一直困扰着广大研究者:使用硅胶膜技术的产品,对起始样本量要求高,再加上硅胶膜吸附造成的损失,导致RNA得率低;直接使用细胞裂解液,虽然可以应用在RT-PCR研究中,但无法直接应用在qRT-PCR、芯片或测序等方面。

Epicentre的ArrayPure™ Nano-scale RNA Purification Kit为您提供简便高效的单细胞RNA提取方法:

• 可从单细胞中提取到高质量的RNA,提取产物可直接用于qPCR实验; 如配合Epicentre**的TargetAmp™技术,可将微量RNA(10 pg)扩增至微克级别,扩增产物可直接用于芯片或测序实验;
• 不使用有毒溶剂,不使用硅胶膜技术,操作简便;
• 高效捕获高分子量和低分子量RNA。

另有多款微量RNA扩增试剂盒及cDNA合成试剂盒,详询基因公司。 

样本为不同数量的HeLa细胞,细胞数量分别为10000(红色曲线)、1000 (蓝色曲线) 、100 (粉色曲线)和10 (绿色曲线)。分别提取不同数量细胞的总RNA,使用Epicentre的MMLV 逆转录酶合成cDNA后进行qPCR扩增(仪器为iCycler iQ™ )

将组织培养法获取的HeLa细胞稀释为不同数量,分别为100、10和单个细胞,通过倒置显微镜确认细胞数量后提取总RNA。经过Epicentre的MMLV 逆转录酶合成cDNA后进行qPCR扩增。

了解单细胞RNA提取产品的更多信息

参考文献:
1. Cunningham, J. T., et al. (2012) {Delta}FosB in the supraoptic nucleus contributes to hyponatremia in rats with cirrhosis. Am J Physiol Regulatory Integrative Comp Physiol 303, R177-185
2. Ciraci, E., et al. (2011) Adult human circulating CD34-Lin-CD45-CD133- cells can differentiate into hematopoietic and endothelial cells. Blood 118, 2105-2115
3. Crawford, J. L., et al. (2011) Oocytes in sheep homozygous for a mutation in bone morphogenetic protein receptor 1B express lower mRNA levels of bone morphogenetic protein 15 but not growth differentiation factor 9. Reproduction 142, 53-61
4. Kudo, K., et al. (2010) Translational control analysis by translationally active RNA capture/microarray analysis (TrIP-Chip). Nucleic Acids Res. , gkq024
5. Negri, L., et al. (2006) Impaired Nociception and Inflammatory Pain Sensation in Mice Lacking the Prokineticin Receptor PKR1: Focus on Interaction between PKR1 and the Capsaicin Receptor TRPV1 in Pain Behavior. J. Neurosci. 26, 6716-6727

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