从细胞计数轻松升级到多功能分析[新品推荐]

【字体: 时间:2014年12月02日 来源:生物通

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  幸好,自动细胞计数仪的出现,将我们从痛苦的深渊中拉了出来。这些仪器只需要几微升的样品,几十秒的时间,就能自动完成细胞计数。还记得那个状如一瓣西瓜的Countess自动细胞计数仪吗?如今它已升级到第二代,样子变了,性能也提高了。

如果你曾经做过细胞培养,你就知道手动细胞计数有多痛苦。过程的确很简单:收集细胞,与台盼蓝混合,加样到血球计数器,放在显微镜载物台上,然后就是计数、计数、再计数。然而,如果你有大量细胞需要计数,那可就不那么轻松了。你会发现,这个过程耗时乏味,还容易出错。即使你火眼金睛,也未必能获得正确的计数结果。

幸好,自动细胞计数仪的出现,将我们从痛苦的深渊中拉了出来。这些仪器只需要几微升的样品,几十秒的时间,就能自动完成细胞计数。还记得那个状如一瓣西瓜的Countess自动细胞计数仪吗?如今它已升级到第二代,样子变了,性能也提高了。

Life Technologies(赛默飞世尔旗下)的Countess II系列产品于今年9月正式上市,包括两款仪器:Countess II自动细胞计数仪(左图)以及Countess II FL细胞计数&功能分析仪(右图),其中FL就代表多了两个荧光通道。

       

Countess II:让细胞计数更准确

如果你只是想安安静静地完成细胞计数,那么Countess II就是个理想选择。它采用台盼蓝染色原理,利用自动对焦和图像分析算法获得精确的细胞计数。在插入玻片之后,它自动对细胞进行对焦,从而避免了手动对焦带来的人为波动。细胞成团成块?这也不是问题。Countess II的先进计数算法可以清晰判定细胞块内的细胞边界,因此即使是成团块样品,也不必担心结果不准确。

Countess II须需要配合细胞计数板使用。这种计数板是一次性的,带有两个独立的小室,可对同一样品重复计数,也可对两个不同的样品计数。计数面积为3.48 mm2(2.15 mm x 1.62 mm),是血球计数板1 mm2计数面积的约4倍。将10 µL 样品与10 µL 台盼蓝混合后加样到细胞计数板中,插入仪器后按下按键即可,就是这么简单!细胞浓度范围应在1x104 -1x107 细胞/ml,最好在1x105-4x106 细胞/ml,大小最好在5-60 µm。

Countess II FL:不仅仅是细胞计数

在细胞培养的过程中,我们不仅仅要细胞计数,有时也需要观察荧光蛋白的表达或测定转染效率什么的。这时,Countess II FL就能帮上大忙。它不仅仅是一台细胞计数仪,也是一台功能分析仪。与普通的Countess II相比,它增加了两路荧光通道,可实现荧光应用。

一般来说,市面上的细胞分析仪都有着固定的荧光通道。然而,通道固定,实验却不固定。因仪器限制而被迫更改实验,那是件痛苦的事情。对于Countess II FL而言,这都不是事儿。因为其荧光检测技术的核心是专利的EOVS® LED光立方。每个光立方是相对独立的,含有一个LED、发光光学器件和滤光片。你可以根据实验要求,在Countess II FL上插上适当的光立方。即插即用,几乎不需要维护。目前有15种光立方可选择(表1),可谓相当灵活。

你看,下面就是Countess II FL的功能示例。采用CellLight® 组蛋白2B-RFP转导HeLa细胞,用NucBlue® Live ReadyProbes® 试剂染色,取10 μL加入计数板内,然后插入配备有DAPI和RFP光立方的Countess® II FL自动细胞计数仪内。Countess® II FL全自动细胞计数仪的分类和计数算法可以根据细胞的荧光性质对其进行计数。在本实验中,细胞群之中86%的Hela细胞转导有CellLight® 组蛋白2B-RFP。

表1. 最常用的荧光光立方

光立方

激发光谱(nm)

发射光谱(nm)

常用的相容染料/荧光蛋白

DAPI

357/44

447/60

DAPI, Hoechst, BFP

TagBFP

390/18

447/60

TagBFP

CFP

445/45

510/42

ECFP, Lucifer Yellow

GFP

470/22

510/42

GFP, Alexa Fluor® 488, SYBR® Green, FITC

YFP

500/24

524/27

EYFP, acridine orange (+DNA)

RFP

531/40

593/40

RFP, Alexa Fluor® 546, Fluor® 555, Cy®3, DsRed, Rhodamine Red, dTomato

Texas Red

585/29

624/40

Texas Red®, Alexa Fluor® 568, Alexa Fluor® 594, MitoTracker® Red, mCherry

Cy®5

628/40

692/40

Alexa Fluor® 647, Alexa Fluor® 660, DRAQ5®

Cy®5.5

655/46

794/16

Cy®5.5

Countess II FL在耗材上也增加了一个选择,可重复使用的细胞计数板。一次性的细胞计数板当然方便,但价格不菲,每次使用的成本在10元以上(6790元/500块)。一些研究人员出乎经济方面的考虑,而不得不舍弃细胞计数仪。如今,你大可放心了。Countess II FL也可选配可重复使用的玻璃玻片,从而显著降低了长期的耗材成本。当然,一次性的计数板也照样能用。

这两款仪器都采用电容式触摸屏和简单的用户界面,你可以轻松上手,而几乎不需要培训。仪器的维护也很简单,只需定期做一些清洁工作。它们的比较请看表2,你可以根据现在及未来的需求来选择适当的仪器。或者,先试用一下?立即申请>>

表2. Countess II与Countess II FL全自动细胞计数仪之比较

特征

Countess II

Countess II FL

自动对焦

触摸屏

明场计数

一次性玻片

可重复使用玻片

荧光兼容性

能否升级到荧光检测

(生物通 余亮)

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