分子病理学的利器--玻片组织显微切割系统

【字体: 时间:2014年04月17日 来源:

编辑推荐:

  AvanSci玻片组织显微切割系统采用**的铣磨技术,不仅提高了样本的分离精度而且大大降低了仪器复杂度和制造维护成本,切割样本同时无缝采集到收集管中,能够高效收集足够多的感兴趣样本。而且不论切割的对象是冰冻切片还是石蜡切片,切割收集的样本能够与下游QIAGEN QIAamp® DNA FFPE Tissue 提取试剂盒无缝整合。确保靶区域内核酸(或蛋白)后续提取效果,为Q-PCR,Sanger测序,NGS,芯片等下游实验提供高品质一致性的起始材料,让显微切割技术真正走进各个实验室。

随着生命科学技术的不断发展,研究人员对前期样本组织分离要求精确,对样本的一致性要求日趋严格。他们在研究中发现一致性的样本组织或细胞群才能够真实的反应实验的结果。如下图所示,在混合异质性的组织和单一的细胞群中,糖蛋白、CD53和蛋白酶亚基这三个基因的表达出现了很大的差异。

传统手工挑取分离的方法因为无法有效质控,无法保证重复性,已不能满足当前实验的需求,而激光显微切割技术获得的细胞数量较少,操作繁琐,一种新的技术——Mesectr玻片组织显微切割应运而生。

*Let Professionals Serve Professionals基因有限公司 www.genecompany.com*

美国AvanSci公司诞生于ARUP病理学实验室,ARUP实验室是美国Utah大学的一个独立临床与病理解剖学参考实验室,是美国*主要的病理基准实验室之一,科学家基于ARUP的严格要求,开发出*适用于分子病理学研究的显微切割工具。

Avansci公司的Mesectr玻片组织显微切割仪,使得研究人员对组织切片进行显微切割分离成为可能,这项新的技术可以实现对玻片上的目标组织进行自动切割,提高精确性、一致性和切割效率,为临床或科研的病理学和组织学实验室带来巨大的技术进步。

MeSectr切割分离系统是基于组织切片的自动化组织显微切割分离系统。MeSectr 切割分离系统由4大部分组成:分离工作站、显微镜、配套软件及xScisor耗材。通过操纵杆控制X/Y载物台的移动,配合强大的软件(2iD software)功能实现对组织切片任意部位精确的切割分离。其中,Xscisor削磨刀片是实验过程中不可缺少的利器,对切片上的目标区域的切割就是靠它来完成的。其中刀片的直径大小从100μm,200μm,400μm,800μm和1200μm不同的规格大小,能够满足研究人员对切割精度和面积的不同需求。而且,Xscisor在切割的过程中同时对样本进行收集。

技术原理大致如下,通过向下推压xScisor内管中的柱塞,外管充满研磨液,然后将装满研磨液的xScisor固定在MeSectr切割分离系统上;仪器在旋转xScisor切割样本的同时,向上提拉柱塞,研磨液通过旋转的刀片浸润到正在切割的玻片组织上,被研磨下的目的组织随着研磨液一起被吸到xScisor内管中;整个切割分离过程完成后,通过向下推压柱塞将内管中采集到的目的组织液转移到新的管子中进行下游实验。此外,2iD software能够自动给出整个切割流程的质控报告。而且该软件能够兼容其他第三方成像系统,能够将第三方成像的图片作为参考图片,完成对未染色样本目标区域的切割。

产品一发布就引起了客户的很大兴趣,对于传统的病理实验室更是一个喜大普奔的好消息。因为传统的方法是研究人员通过用针或者其他尖锐物通过显微镜进行人工的挖取。客户反映一方面在操作的精度上有着非常大的偏离,导致获取的样本一致性差。此外,挖取的微小样本很容易受环境影响漂浮在空气中,造成潜在的生物安全问题。

而Mesectr的出现足以改变当前的现状,一方面跟上述手工操作比,它的切割分离精度大大提高,而且易于标准化和自动化操作,实验结果可追溯,实验流程简便高效,能够在10min内完成样本的分离与收集;另一方面同市面上其它基于激光的显微切割系统(laser microdissection)比,它采用**的铣磨技术,大大降低了仪器复杂度和制造维护成本,切割样本同时无缝采集到收集管中,能够高效收集足够多的感兴趣样本。而且不论切割的对象是冰冻切片还是石蜡切片,切割收集的样本能够与下游QIAGEN QIAamp® DNA FFPE Tissue 提取试剂盒无缝整合。确保靶区域内核酸(或蛋白)后续提取效果,为PCR,NGS,芯片等下游实验提供高品质一致性的起始材料,让显微切割技术真正走进各个实验室。

*Let Professionals Serve Professionals基因有限公司 www.genecompany.com*

下面是一个客户的demo实验结果,客户是研究肺癌相关领域,准备对完全癌变的组织进行切割分离,后期进行测序分析。首先,客户对病人的临床组织样本进行取样,制作成冰冻切片。对连续切片的几个切片选择其中一个进行HE染色,寻找切割的目标区域。实验通过参照染色的玻片对未染色的玻片组织进行切割分离、收集。

样本切割后质控结果如下:

收集的实验样本用QIAGEN QIAamp® DNA FFPE Tissue 提取试剂盒进行抽提,*后的洗脱体积为30μl。纯化的DNA用NanoDrop8000进行浓度和纯度的测定,核酸量为47.23 ng/ul,OD260/OD280=1.92。一共收集到47.23*30= 1416.9 ng,平均每mm2组织切片样品可提取28.33ng 核酸。

欲了解组织显微切割在样本制备中的应用请参见:赢在起步—MilliSect组织显微切割在样本制备中的应用(http://www.ebiotrade.com/newsf/2014-1/2014121105935515.htm)。

立即索取更多资料

如需更多信息,请联系基因有限公司各办事处(www.genecompany.com)。

订阅生物通快讯

订阅快讯:

最新文章

限时促销

会展信息

关注订阅号/掌握最新资讯

今日动态 | 人才市场 | 新技术专栏 | 中国科学人 | 云展台 | BioHot | 云讲堂直播 | 会展中心 | 特价专栏 | 技术快讯 | 免费试用

版权所有 生物通

Copyright© eBiotrade.com, All Rights Reserved

联系信箱:

粤ICP备09063491号