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最新三款细胞分选仪之选购指南(一)

【字体: www.ebiotrade.com 时间:2014年6月20日 来源:生物通

摘要:

  随着越来越多的研究人员在实验中加入了细胞分选,流式细胞仪的实验室就变得拥挤不堪。尽管免疫学家一直是这项技术的主要用户,但在细胞分选仪的预约名单上,其他领域的研究人员也日渐增多,这使得仪器的预约使用近乎饱和。有人打趣说,用上一台细胞分选仪,就像在闹市区找个停车位那么难。

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随着越来越多的研究人员在实验中加入了细胞分选,流式细胞仪的实验室就变得拥挤不堪。尽管免疫学家一直是这项技术的主要用户,但在细胞分选仪的预约名单上,其他领域的研究人员也日渐增多,这使得仪器的预约使用近乎饱和。有人打趣说,用上一台细胞分选仪,就像在闹市区找个停车位那么难。

然而,尽管有些用户需要高度复杂的分选,来获得特定的细胞群,但对于半数以上的用户,他们的分选需求要简单得多。一些分子生物学家刚刚进入这一领域,他们只是希望通过1-2个荧光蛋白或标记抗体来进行分选。根据Bio-Rad的调查,许多客户只是对特定细胞类型的特定蛋白感兴趣,或是希望分离表达GFP的所有细胞,仅此而已。对于他们而言,简单易用的分选仪可能是个更理想的选择。

Bio-Rad的S3细胞分选仪就是为满足这一群体的分选需求而设计的。它是一台高度自动化的系统,最多能检测四种颜色,且体积小巧,大小仅为70 x 65 x 65 cm(宽x深x高),可放置在实验台上。这台仪器内置了液流和温控装置,因此无需其他的台面空间。

对于传统的细胞分选仪,技术人员往往需要几个月的培训,才能熟练地开展操作。但小型的实验室可能没有专门的人员来负责这个,或由于人员流动而出现断层。然而,有了S3细胞分选仪,这就完全不成问题。它的细胞分选操作相对简单,不需要专门的技术人员来完成。之前,土耳其的一个研究小组需要开展细胞分选,但他们没有任何经验。而在使用S3后仅一个星期,他们就能自由地操作。

分选原理

S3采用的是经典的jet-in-air(在空气中激发)的技术进行分选的。为了从多元化的细胞群体中获得感兴趣的细胞,研究人员首先要利用生物标志物标记细胞。然后让单细胞悬液通过流动柱,用激光照射,并将其分割成微小的液滴,每个都包裹着一个细胞。根据荧光信号,液滴在经过偏转板之前被带上不同的电荷。当液滴经过偏转板时,在高压电场的作用下偏转,落入各自的收集容器中。此过程每秒重复数万次,实现大量细胞的快速、高效分选。

(图片来自Bio-Rad)

自动化

S3细胞分选仪的简约大多源自其新颖的液滴延迟计算技术。为了获得最佳的分选纯度,人们需要准确地确定液滴延迟,即细胞检测点与断点处之间的时间间隔。这一过程费时费力。而ProDrop™技术自动确定液滴延迟,并准确地计算出液滴延迟值,使得出错的机会更少。

据Bio-Rad细胞生物学业务部门的经理Steve Kulisch介绍,他们之前问过实验室技术人员,希望细胞分选的哪些过程有改变,得到的答案是:不必一直坐在那里,调整液滴延迟。这种痛苦使得他们重新考虑了细胞分选仪的设计。而自动化的液滴延迟大概就是来自于那个设计过程的最大创新。

S3包含1或2个激光器及最多4个荧光检测器和2个散射光检测器。它还有着用户可更换的滤光片设计,以便优化滤光片和荧光染料的组合。市场上多种滤光片都能与S3兼容。仪器标配了488 nm 100 mW二极管泵浦固态激光器。荧光素(FITC)、绿色荧光蛋白(GFP)、藻红蛋白(PE)、碘化丙啶(PI)以及其他常用的荧光染料都可用此激发并检测。选配的561 nm 100 mW固态激光器适合红色荧光蛋白家族及其他荧光染料。

当然,S3细胞分选仪并不打算取代BD或贝克曼家那些复杂的仪器。对于从事干细胞研究或肿瘤鉴定的研究人员,只需要四色分选,甚至单色GFP分选,这样一台简单易用的分选仪已经足够了。同时,它也让那些更为复杂的系统从简单应用中解放出来,真正应用到高度多重的免疫学分析中。这样,也能提高整个实验室的效率,帮助研究人员更好地安排他们的实验。

据Kulisch介绍,国外有个中心实验室就在自助服务区安装了S3细胞分选仪。研究人员可以预约他们的分选,如果是新手的话,需要接受30分钟的培训,然后开展分选,而几乎不需要监督。这几乎就像使用定量PCR仪那么简单。

细胞分选过程的简化,不仅能提高实验室的效率,也有望实现新的应用。Kulisch说:“随着人们更深入了解这种技术,他们更有可能提出这样的问题,‘细胞分选是否会带来不同?’。也许这个问题会带来遗传过程的发现,或让人了解到一个细胞群体比另一个更容易受到治疗的影响。这可能有助于人们更好地了解疾病状态。”(生物通 余亮)

立即索取S3细胞分选仪的详细资料

(http://www.ebiotrade.com/)
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