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最新三款细胞分选仪之选购指南(三)

【字体: www.ebiotrade.com 时间:2014年6月25日 来源:生物通

摘要:

  一直以来,细胞分选都是流式分选(FACS)当道。这当然不无道理,这种技术成熟,灵敏度高,精准度高,应用广泛。然而,流式分选仪价格昂贵,操作复杂,也存在着一些缺陷。德国美天旎(Miltenyi Biotec)公司最新推出的机械式流式分选仪MACSQuant Tyto,采用多种创新的系统,很好地解决了这些问题,将流式分选带入了一个新时代。

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一直以来,细胞分选都是流式分选(FACS)当道。这当然不无道理,这种技术成熟,灵敏度高,精准度高,应用广泛。然而,流式分选仪价格昂贵,操作复杂,也存在着一些缺陷。首先,高压、高速、高电荷经常会引起细胞活性差、得率低的问题;其次,传统分选鞘液和细胞要在外界打开,很难保证无菌,而且不同样本间还有可能发生交叉污染;另外,电荷式分选会产生气溶胶污染,对于感染性的样本会产生生物安全性问题。

德国美天旎(Miltenyi Biotec)公司最新推出的机械式流式分选仪MACSQuant Tyto,采用多种创新的系统,很好地解决了这些问题,将流式分选带入了一个新时代。

与传统的流式分选仪不同,MACSQuant Tyto采用全封闭的无鞘液设计,全部液流系统位于一个样本盒(cartridge)中,样本盒中最关键的部件是一个微芯片控制的阀门,通过阀门的开合控制细胞的分选。该样本盒采用卡槽式的设计,不同的细胞样本可以更换样本盒,这样能避免样本间交叉污染的风险,而且全封闭的设计也保证细胞处于无菌状态。

(图片来自美天旎)

细胞在较小的压力下通过激光的检测区域,检测到目标细胞后微芯片控制的阀门会打开,让目标细胞流入样本收集孔中;非目标细胞经过时,阀门处于闭合状态,细胞进入废液孔中。整个分选过程中,没有高压和电荷的刺激,最大程度保证了细胞的活性;而且没有产生液滴和气溶胶,对分选操作人员没有生物安全性危害。

也许有人质疑,机械式分选速度很慢。其实,近年来随着微芯片技术的发展,微芯片控制的机械阀开合一次仅需几十微秒,已经达到传统分选仪每秒钟上万个细胞的速度。对于MACSQuant Tyto,它每小时能分选多达5000万个细胞,平均每秒达14,000个。

MACSQuant Tyto的操作也很简单,即插即用,只需将样本盒上样到仪器中即可。激光校准也是全自动的,这样就不需要专门的技术人员来操作。仪器特有8色通道,外加侧向散射和2个反向散射通道。

了解MACSQuant Tyto细胞分选仪的更多信息

在早期研究中,人们利用MACSQuant Tyto来分选全血中的CD4+细胞。他们在2 mL全血中加入CD4荧光抗体,孵育,并用8 mL PBS稀释。结果表明,分选前全血中只含有不到0.01%的CD4+细胞,而分选后的CD4+细胞比例超过91%。这个过程实现了接近10,000倍的高效纯化(如下图A和B))。同样,MART-1抗原特异性T细胞也得到了高效的富集(如下图C和D)。

曾几何时,细胞分选仪一直是高大上的产品,让人仰视。然而,最近一些个人型细胞分选仪的出现,让细胞分选不再是少数人的专利,而有望被更多研究人员所享用。(生物通 余亮)

(http://www.ebiotrade.com/)
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