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2015创新产品:简便的exosome提取工具
【字体: 大 中 小 】 时间:2016年02月19日 来源:生物通
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QIAGEN的exoEasy Maxi Kit让exosome提取这件头疼事变得轻松。它可快速、简便地从血清、血浆、细胞培养上清等样本中高效分离exosomes或其他细胞外囊泡体。整个分离实验流程只需25分钟,与超速离心法相比,不仅速度更快,并且产物纯度更高,适用于敏感的下游应用。
每到年末,生物通都会奉上一场技术盛宴 – “生命科学十大创新产品”评选,让你不错过每一项创新的产品和技术。2015年年末,经过一个月的网络投票,并参考专家意见,2015生命科学十大创新产品终于诞生了。(延伸阅读:2015生命科学十大创新产品揭晓)
QIAGEN的exoEasy Maxi Kit让exosome提取这件头疼事变得轻松。它可快速、简便地从血清、血浆、细胞培养上清等样本中高效分离exosomes或其他细胞外囊泡体。整个分离实验流程只需25分钟,与超速离心法相比,不仅速度更快,并且产物纯度更高,适用于敏感的下游应用。
囊泡虽小,潜力却很大。exosome及其他细胞外囊泡有望作为生物标志物,在癌症及其他疾病的诊断中发挥一定的作用。囊泡的脂双层结构使得新鲜和长期保存的样本皆可用于RNA分析,甚至一些冷冻达十二年之久的样本也能产生高质量的RNA。不过,我们首先得分离出这些小囊泡。
超速离心是分离小囊泡的常规方法,产量高,质量也OK,不过,对于大多数实验室而言,超速离心机并非触手可及,而且,整个过程耗时耗力,还需要精心优化操作。目前没有标准化的操作可循,实验室使用不同的前处理以及不同的超速离心操作。这就使得各个实验室之间的结果几乎没办法比较。
如果有一种方法,通过普通的离心机来提取exosome,那就完美了。exoEasy Maxi Kit正是你期待的这种方法。
它使用离心柱和专门的缓冲液来分离exosome及其他细胞外囊泡,可处理高达4 mL的血浆或血清。对于细胞培养上清,经实验验证可从高达32 mL的样品中成功提取exosome。
整个流程仅仅需要25分钟。将预先过滤过的血浆、血清或细胞培养上清与Buffer XBP进行混合并结合在exoEasy膜亲和离心柱上。对结合的exosome使用Buffer XWP进行清洗,随后使用Buffer XE(主要含无机盐的缓冲液)进行洗脱,即可用于物理或生化分析。不过,对于生物检测等特定应用,可能需要进行额外的浓缩或缓冲液置换。此步骤可通过孔径尺寸为100 kDa或更小的超滤方法来实现。
提取获得的囊泡具有完整的功能,可用于多种下游应用。比如通过纳米颗粒追踪分析(NTA)或可调电阻脉冲感应(TRPS)对其物理性质进行分析,或者利用电子显微镜分析。当然,你也可以提取出其中的DNA、RNA、蛋白或脂类,开展进一步的分析。
exosome提取,不再需要特殊的仪器,不再需要繁复的操作,这是因为你有了exoEasy Maxi Kit。(生物通 余亮)